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CRISPR-Cas9基因編輯技術:熱度背後的冷思考
近年來，CRISPR/Cas9基因編輯技術正在給整個科研界帶來革命性變化，該技術使用CRISPR系統將Cas9蛋白和嚮導RNA注入小鼠受精卵，就能輕鬆實現基因敲除，同時，注入Donor DNA則可實現基因敲入，甚至國際著名學術期刊Genome Biology有文章指出這項新技術將很快取代使用胚胎幹細胞的基因修飾，看起來小鼠胚胎幹細胞基因修飾技術的終結不可避免。
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基因編輯技術-CRISPR/Cas9
CRISPR/Cas是進行基因編輯的強大工具，可以對基因進行定點的精確編輯。在嚮導RNA（guide RNA， gRNA）和Cas9蛋白的參與下，待編輯的細胞基因組DNA將被看作病毒或外源DNA，被精確剪切。但是，CRISPR/Cas9的應用也有一些限制條件。首先，待編輯的區域附近需要存在相對保守的PAM序列。其次，嚮導RNA要與PAM上遊的序列鹼基互補配對。
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什麼是CRISPR cas9基因編輯技術?
參考---什麼是CRISPR cas9基因編輯技術？
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科普:基因編輯技術和CRISPR
你知道基因編輯技術嗎？你知道CRISPR技術嗎？你知道20年前的基因編輯核心技術都被掌握在同一家公司手裡嗎？DNA雙螺旋結構，簡單的說就是：兩條纏繞在一起的DNA長鏈應該遵循著非常樸素的配對原則，一條鏈上的A鹼基總是需要和另外一條鏈上的T鹼基配對，C鹼基則一定要和G鹼基配對，這樣的話就形成了穩定的雙螺旋模型。這種結構既穩定又有活力，而且能夠解釋以往出現的幾乎所有問題。然而問題還是出現了：我們如何對這樣完美的結構進行準確的剪切和編輯呢？
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《科學》：CRISPR兩大先驅合作，揭示單鹼基編輯易脫靶的原因
▎藥明康德內容團隊編輯 2012年，被喻為「上帝的手術刀」的CRISPR-Cas9系統橫空出世，短短的八年裡，這種工具已經應用到包括醫藥、農業、基礎科研等諸多領域。以經典的CRISPR-Cas9為基礎，科學家們還開發出一系列工具，例如可以轉換單個核苷酸的鹼基編輯器，以期治療單基因點突變導致的遺傳疾病。
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基因編輯大牛揭示鹼基編輯器的作用機制
如今，我們不僅可以了解它什麼時候起作用，什麼時候不起作用，而且還可以設計下一代鹼基編輯器，使之變得更好、更適合於臨床使用。」鹼基編輯器是由一種酶和部分失活的Cas9（dCas9）融合而成，其中dCas9可以結合DNA，但不切割DNA，這種酶可以激活或沉默基因，或者修改相鄰的DNA區域。由於這項研究報告了這種融合蛋白的首個結構，它可能有助於指導無數其他基於Cas9的基因編輯工具的設計。
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《科學》:CRISPR兩大先驅合作,揭示單鹼基編輯易脫靶的原因
日前，基因編輯領域的兩位宗師級科學家Jennifer Doudna教授和劉如謙（David Liu）教授聯手，在《科學》雜誌上報導了一種鹼基編輯器的首個詳細3D結構。 但除了效率提升外，要將鹼基編輯器應用到人類遺傳疾病的治療上，科學家們還迫切想要解決「脫靶效應」，也就是針對無關DNA片段的編輯。
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CRISPR/Cas9基因編輯技術!珍藏版protocol!
》（CRISPR-Edited Stem Cells in a Patient with HIV and Acute Lymphocytic Leukemia）的研究論文，標誌著世界首例通過基因編輯幹細胞治療愛滋病和白血病患者的案例由我國科學家完成了！
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從基因編輯狗談CRISPR/Cas9
近日，中國科學家利用基因編輯技術——CRISPR/Cas9，對抑制狗骨骼肌生長的基因（MSTN）進行了敲除，培育出兩隻肌肉發達的「大力神」狗，成功構建了世界首個基因敲除狗模型。科研人員所使用的「基因編輯技術」，顧名思義，能夠讓人類對目標基因進行「編輯」，實現對特定DNA片段的敲除、加入等。
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PNAS:構建出提高CRISPR-Cas9基因編輯精確度的新變體---SaCas9-HF
2019年10月13日訊/生物谷BIOON/---在一項新的研究中，來自中國香港城市大學的研究人員開發出基因編輯技術CRISPR-Cas9的一種新變體，它有潛力在人類基因治療期間提高基因編輯的精確度。相比於野生型CRISPR-Cas9，這種新變體降低了DNA中出現的意外變化，這表明它可能在需要高精確度的基因療法中發揮作用。
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盤點|CRISPR基因編輯技術研究進展
該團隊後續的研究將致力於提高肺上皮組織基因編輯的效率，以及評估將基因編輯技術傳遞給肺的不同機制。不同的基因編輯技術也在進一步的探索中，可能未來有一天能夠糾正嬰兒遺傳性肺病中觀察到的確切突變。基因編輯為何又頻頻被「潑冷水」雖然基因編輯技術仍在快速發展，卻有很多根深蒂固的風險沒有得到解決。其中最主要的就是」脫靶「的問題。
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Science子刊:基因編輯工具CRISPR-Cas9遭遇新挫折!新研究揭示它可...
圖片來自CRISPR-Cas9是一種在過去十年中開發的基因編輯技術。它切割出基因組中不需要的部分，並插入新的DNA片段。人們已經進行了許多研究來測試這種技術，以期有一天可以將它用於修復導致疾病的遺傳缺陷。有關脫靶編輯的報導阻礙了這一目標的實現，這導致了旨在阻止脫靶編輯的新研究。在這項新的研究中，這些研究人員發現這種技術還可以導致大量不想要的DNA重複。
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CRISPR-Cas9基因編輯技術簡介
CRISPR-Cas9是繼ZFN、TALENs等基因編輯技術推出後的第三代基因編輯技術，短短幾年內,CRISPR-Cas9技術風靡全球, 成為現有基因編輯和基因修飾裡面效率最高、最簡便、成本最低、最容易上手的技術之一，成為當今最主流的基因編輯系統。
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基因編輯系統CRISPR/Cas9的原理及應用
，ZFNs)和轉錄激活樣效應子核酸酶技術（Transcription activator-like effector nucleases，TALENs）後，CRISPR/Cas9作為新出現的第三代基因編輯技術，因其簡易、高效、成本低等優點，受到了許多科學家的青睞。
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5 分鐘學會 cas9 基因敲除——原來設計方案如此簡單
利用 Cas9 來摧毀入侵 DNA 的 Type Ⅱ CRISPR/Cas 系統， 可以在體外進行基因的編輯。為了提高CRISPR/Cas9 的特異性，使用 Cas9 切口酶和一對 sgRNA，兩個相近的切口造成 DNA 雙鏈斷裂， 誘導細胞發生非同源末端連接修復， 造成目的基因的突變。利用 CRISPR/Cas9 進行基因的編輯，首先要構建有效的 sgRNA。
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CRISPR∕Cas9基因編輯技術
科學家利用CRISPR/Cas系統可以對多種細胞的特定的基因組位點上進行切割，以便插入新的遺傳物質。在需要對目的基因的功能進行破壞，或者要進行目的基因替換時都可以使用CRISPR/Cas系統，可以像編輯文字一樣編輯基因，因此被稱為基因編輯技術。本技術具有簡便、快捷、精準等優點，於2016年獲得被喻為「豪華諾貝爾獎」的生命科學突破獎。
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Nature子刊:抗CRISPR蛋白介導的CRISPR-Cas9系統可提高基因編輯...
2020年12月9日訊/生物谷BIOON/---CRISPR-Cas9基因編輯可能會引起不想要的遺傳變化。在一項新的研究中，來自日本廣島大學和東京醫科齒科大學的研究人員開發出一種很有前途的修複方法，即關閉CRISPR-Cas9基因編輯，直到它達到關鍵的細胞周期階段，在這個階段，更精確的修復可能會發生。
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如何運用CRISPR-cas9基因編輯技術發高分文章?
最近「基因編輯嬰兒問世」事件引起了業內強烈的轟動，在該項研究中賀建奎採用了CRISPR-cas9技術對胚胎進行編輯，用5微米、約頭髮二十分之一細的針把Cas9蛋白和特定的引導序列注射到還處於單細胞的受精卵裡，來達到預防HIV病毒的目的。
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Microb Cell Fact:穀氨酸棒桿菌CRISPR/Cas9基因組編輯獲進展
穀氨酸棒桿菌是一個重要的胺基酸生產菌株，其胺基酸產量每年超過400萬噸，近年來被廣泛用於生產各種天然和非天然產物，預計到2020年穀氨酸棒桿菌發酵產品市值可達204億美元。傳統的工業菌株主要依賴長期的理化誘變及篩選獲得，這個過程漫長，基因組水平實現快速、高效的理性編輯依然是穀氨酸棒桿菌代謝工程改造的難點。近日，中國科學院天津工業生物技術研究所系統與合成生物技術研究團隊開發了穀氨酸棒桿菌的CRISPR/Cas9基因組編輯工具。
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Cas9穩轉細胞株,令CRISPR/Cas9基因編輯更高效
獲得2020年諾貝爾化學獎的CRISPR/Cas9基因編輯系統，作為第三代基因編輯工具，自2012年面世以來，極大簡化了基因編輯操作，降低了研究門檻，讓基因編輯迅速成為熱門領域。隨之大量基於CRISPR/Cas系統的實驗方法被開發出來。