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穀氨酸棒桿菌多基因表達調控技術方面取得進展
穀氨酸棒桿菌是重要的工業發酵菌種,被廣泛用於胺基酸、有機酸的生產。儘管近年來基於CRISPR的基因組編輯技術以及基於CRISPRi的基因表達沉默技術在穀氨酸棒桿菌中取得了突破,為基因敲除和改造提供了重要工具,但目前可用的基因表達快速調控工具還相對有限。
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【綜述】治療性CRISPR/cas9技術研究進展
有目標性位點的靶向核酸酶被廣泛用於基因組編輯。2013 年第一次將 Crispr/cas9 技術用於基因組編輯以來,這個領域發生革命性的變化。作為基因組編輯工具,Crispr/cas9 最成功的地方是它可以輕鬆的設計嚮導性 RNA 序列將 Cas9 引導到基因組的特定位點上,然後通過 Cas9 的核酸酶切割活性造成 DNA 斷裂。最近的幾項研究,成功地應用 Crispr/cas9 糾正動物模型,體細胞和體外誘導的多能幹細胞中引起疾病的突變基因,這也對基因組編輯技術應用於臨床燃起了希望。
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CRISPR-Cas9基因編輯技術:熱度背後的冷思考
,引起基因組非靶向位點的突變,這樣會造成研究結果的不確定性。,CRISPR/Cas9技術可在生物水平上精準地對基因組進行編輯,並沒有引入很多非預期的脫靶突變。2017年初,Broad研究所和合作者們被授權了關於真核生物細胞(包括人類細胞)的基因組編輯的CRISPR專利,而加州大學伯克利分校和合作者授權的專利是關於將CRISPR技術用於到cell-free系統中,並不是涉及真核細胞的基因組編輯。
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遺傳發育所在CRISPR-Cas9玉米基因組編輯方法研究中取得進展
遺傳發育所在CRISPR-Cas9玉米基因組編輯方法研究中取得進展 2018-04-04 遺傳與發育生物學研究所 【字體:大 中 小】
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天津工生所在代謝工程改造穀氨酸棒桿菌生產L-半胱氨酸方面取得進展
中國科學院天津工業生物技術研究所研究員劉君帶領的微生物生理和代謝工程研究組以穀氨酸棒桿菌為宿主細胞,探究了L-半胱氨酸合成瓶頸,構建了高效的L-半胱氨酸合成細胞工廠。該研究首先通過敲除半胱氨酸脫巰基酶和過表達自身的絲氨酸乙醯轉移酶(cysE),實現了L-半胱氨酸的積累。
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代謝工程改造穀氨酸棒桿菌生產L-半胱氨酸方面取得進展
中國科學院天津工業生物技術研究所研究員劉君帶領的微生物生理和代謝工程研究組以穀氨酸棒桿菌為宿主細胞,探究了L-半胱氨酸合成瓶頸,構建了高效的L-半胱氨酸合成細胞工廠。該研究首先通過敲除半胱氨酸脫巰基酶和過表達自身的絲氨酸乙醯轉移酶(cysE),實現了L-半胱氨酸的積累。
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Nature子刊:抗CRISPR蛋白介導的CRISPR-Cas9系統可提高基因編輯...
雖然之前開發的方法報告了較少的與CRISPR技術相關的脫靶效應,但是這些研究人員表示,這些方法往往表現出較低的編輯效率。論文通訊作者、廣島大學生物醫學與健康科學研究生院教授Wataru Nomura說,「我們的目標是開發出避免脫靶效應的方法,脫靶效應是基因組編輯領域最具挑戰性的問題之一。我們的方法是一箭雙鵰。我們可以同時提高基因組編輯的精確性和抑制脫靶效應。」
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Gene KO Mediated by CRISPR-Cas9 System (Cas9-2hitKO)
更為重要的是,Ryan願意無償分享cas9系統的全套載體,還可以抽空指導大家實驗。小白們快加入實驗小白微信群和Ryan學習技術吧!What is the CRISPR-Cas9 system?To achieve higher knockout efficiency, vector carrying one cas9 protein and two guide RNA expressing cassettes is generated.
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2019國自然熱門寵兒——CRISPR/Cas9技術
早在2013年,基因編輯 CRISPR/Cas9 技術就被《科學》列為年度十大科技進展之一,是發展最為迅猛的基因編輯技術,CRISPR/Cas9技術的優勢已經顯而易見,它不僅同時靶向多個靶點,切割效率高,而且設計簡單,簡明的鹼基互補設計原則,識別不受基因組甲基化影響,適應面廣。
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意想不到的突變,CRISPR-Cas9的應用仍然是任重道遠
CRISPR和DNA片段據美國「物理學組織」網站報導,當地時間美國「物理學組織」網站報導,來自哥倫比亞大學弗朗西斯克裡克研究所和美國俄勒岡健康與科學大學的三個獨立研究團隊發現,CRISPR-Cas9基因編輯系統可能導致基因組的意外突變。
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PNAS:構建出提高CRISPR-Cas9基因編輯精確度的新變體---SaCas9-HF
作為另一個版本,來自金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的Cas9核酸酶(SaCas9),它的體積小得多,因而它可以輕鬆被裝入到遞送這種基因編輯系統的腺相關病毒(AAV)載體中,但是,它缺乏與SpCas9同樣高的精確度。不精確的基因編輯可能最終會在意想不到的位置編輯DNA,從而潛在地造成嚴重後果。
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多項研究開發出可增強基因組編輯範圍的新型CRISPR/Cas9工具
CRISPR的應用範圍從治療遺傳疾病到農作物的營養功效,它已經成為最有前景的基因組編輯工具之一。然而,Cas9酶依賴特定的DNA郵政編碼來確定切割和編輯的位置。雖然來自釀膿鏈球菌的Cas9(SpCas9)受到最廣泛使用,但是它需要靶位點旁邊存在兩個G鹼基。只有不到10%的DNA序列符合這一要求。
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Science子刊:基因編輯工具CRISPR-Cas9遭遇新挫折!新研究揭示它可...
圖片來自CRISPR-Cas9是一種在過去十年中開發的基因編輯技術。它切割出基因組中不需要的部分,並插入新的DNA片段。人們已經進行了許多研究來測試這種技術,以期有一天可以將它用於修復導致疾病的遺傳缺陷。有關脫靶編輯的報導阻礙了這一目標的實現,這導致了旨在阻止脫靶編輯的新研究。在這項新的研究中,這些研究人員發現這種技術還可以導致大量不想要的DNA重複。
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CRISPR-Cas9應用依舊任重道遠
在這三項獨立的研究中,科學家們利用CRISPR-Cas9基因編輯系統分別修復了對胎兒發育有重大影響的突變、已知的致盲突變和已知會導致心臟問題的突變,結果發現,第一個案例的靶位點附近出現了大量不希望發生的變化,第二個案例中出現了染色體的大片段缺失,而第三個案例的靶位點附近也出現了多個意外的突變位點。
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PNAS:首次利用CRISPR-Cas9對古生菌進行基因組編輯
2017年3月11日/生物谷BIOON/---在一項新的研究中,來自美國伊利諾伊大學厄巴納-香檳分校的微生物學教授Bill Metcalf和博士後研究員Dipti Nayak首次記錄了在古生菌(Archaea,也譯作古細菌,或古菌)中使用CRISPR-Cas9介導的基因組編輯。
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基因編輯技術-CRISPR/Cas9
CRISPR是存在於細菌中的一種基因組,該類基因組中含有曾經攻擊過該細菌的病毒的基因片段。
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...蛋白介導的CRISPR-Cas9系統可提高基因編輯效率,同時降低脫靶效應
雖然之前開發的方法報告了較少的與CRISPR技術相關的脫靶效應,但是這些研究人員表示,這些方法往往表現出較低的編輯效率。論文通訊作者、廣島大學生物醫學與健康科學研究生院教授Wataru Nomura說,「我們的目標是開發出避免脫靶效應的方法,脫靶效應是基因組編輯領域最具挑戰性的問題之一。我們的方法是一箭雙鵰。我們可以同時提高基因組編輯的精確性和抑制脫靶效應。」
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Genome Biology |中科院微生物所邱金龍課題組通過轉錄激活調節染色質構象進而提高CRISPR/Cas9的編輯效率!
CRISPR/CAS9系統已被廣泛成功地應用於多種真核生物的基因組工程,為基因治療和植物育種提供強有力的工具。
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【重磅消息】MIT和哈佛共建CRISPR-Cas9全球專利技術共享平臺丨醫...
現在,隨著CRISPR/Cas9基因編輯系統逐漸進化,並趨於成熟,商業化道路也漸漸明朗起來,然而關於這項技術的專利問題還有待完善。 關於CRISPR基因編輯技術的發明,曾經與加州大學伯克利分校上演了幾番專利大戰。
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盤點|CRISPR基因編輯技術研究進展
CRISPR/Cas基因編輯技術是繼鋅指核酸內切酶(ZFN)」、「類轉錄激活因子效應物核酸酶(TALEN)」之後出現的第三代基因組定點編輯技術。CRISPR/Cas這項技術自從問世以來,已經吸引了無數歡呼和掌聲,在短短幾年之內,它已經成為了生物科學領域最炙手可熱的研究工具。我們先來了解一下近期科學研究者們運用這把基因魔剪做的研究。