炭疽桿菌（BA）IgG 抗體檢測試劑盒（酶聯免疫法）

炭疽桿菌（BA）IgG 抗體檢測試劑盒（酶聯免疫法）

使  用  說  明（96T/48T）

作者： 江彬

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[原理]

本試劑盒採用親和素-生物素化BA純化抗原預包被板ELISA 原理，檢測人血清/血漿中存在的炭疽 IgG 抗體，並配以酶標記抗人IgG單克隆抗體作為標記物。加入底物TMB顯色後終止反應，在450nm波長測各孔O.D值，O.D值的大小與待檢抗體含量成正             比。生物素系統（biotin-avidin system）的穩固級聯放大作用，使試劑的特異性、靈敏度、穩定性極大地提高是本試劑含有的獨特優點。

[用途]

本試劑盒用於定性檢測人血清/血漿中的炭疽桿菌（BA）抗體，用於炭疽菌苗接種後效果監測和流行病學調研及從患者標本中未獲得炭疽芽孢桿菌陽性和分離結果時，可依據血清學結果輔助診斷。

[試劑盒組成]

1、生物素化抗原預包被板      1塊（8X12/4X12）

2、陰性對照                  1瓶（直接使用）         

3、陽性對照                  1瓶（直接使用）

4、標本稀釋液               

            1瓶（20/10 ml，直接使用）

5、酶結合物           1瓶（12/5ml，直接使用）

6、濃縮洗滌液             

1瓶（20/10ml，加蒸餾水1：30稀釋使用）

7、顯示劑A、B液            各1瓶（5/3ml）

8、終止液（2M H₂SO₄）          1瓶（5/3ml）

9、說明書                       1份

[操作步驟]

1. 將試劑盒平衡至室溫後取出反應板拆封。

2. 標本稀釋：用標本稀釋液以1：11（20ul—200ul）稀釋標本。於反應板中加已稀釋待檢標本及陰陽性對照（100ul）各一孔，設空白對照一孔（加100ul標本稀釋液）輕拍混勻。

3. 37℃溫育30分鐘。甩去孔內液體，用洗滌液洗板3次並在吸水紙上拍幹。

4. 加酶結合物：每孔2滴，混勻後置37℃溫育30分鐘。同上法洗滌3次並拍幹。

5. 顯色：每孔加顯色劑A、B各一滴，輕拍混勻（或震蕩器混勻）後置37℃10分鐘。

[結果判斷]

1．目測：在白色背景下觀察各孔顯色情況，藍色者為陽性，無色者為陰性。

2． 酶標儀測定：每孔加終止液一滴，混勻後在450nm下測定各孔O.D值。

1. S/N=標本O.D值/陰性對照O.D值。

2. S/N≥2.1為陽性；

3. S/N＜2.1為陰性

4. 陰性對照(NC)小於0.10時以0.10計算, 大於0.1小於0.21時以實際O.D值計算 ;若大於0.21時,實驗可能出現了較大誤差,需重複實驗。

5. 陽性對照（PC）值通常≥0.4,實驗成立,否則需重做。

   [注意事項]

   1. 微孔板須密封防潮，從冷藏環境中取出時，應置室溫平衡至潮氣盡幹後方可開啟使用，餘            者封存置2-8℃。

   2. 滴加試劑前應將液體翻轉數次混勻，滴加時保持瓶身垂直。

   3. 洗滌時每孔均須加滿，防止孔內有游離酶不能洗淨。

   4. 試劑置2-8℃存放，不能凍結，有效期10個月。

   5. 避免用溶血、混濁或脂血標本。

   6. 最好用新鮮標本，如需保存，可於2-8℃冷藏48小時或-20℃凍存4周（樣本應避光）。

   7. 試劑盒中陰陽性對照雖然已經過滅活和處理後無汙染，但也應該按照實驗室常規作為汙染物對待處理，以保證生物安全性。