人4型腺病毒（HAdV-4）是一種能夠導致成人和小孩嚴重呼吸道疾病的高度傳染性病原體。目前，市場上還沒有針對於該病毒的有效授權藥物和疫苗。篩選針對HAdV-4的有效中和抗原表位，有助於開發有效的抗病毒疫苗及治療該病毒感染的單克隆抗體（MAb）藥物。近日，中國的科學們在Journal of Virology雜誌上在線發表了一篇題為「Identification of a Critical and Conformational Neutralizing Epitopein Human Adenovirus Type 4 Hexon」的論文。該研究在HAdV-4的Hexon蛋白上發現了一個重要的中和表位，通過試驗證實該中和表位可以用於亞單位疫苗及治療用單克隆抗體的開發。
1、篩選能夠直接結合HAdV-4 hexon蛋白的單克隆抗體MN4b：研究人員通過從製備的6中抗HAdV-4hexon蛋白的單克隆抗體中，篩選到了一個具有高中和效價的單克隆抗體MN4b。通過使用MN4b中和其它血清型的腺病毒（HAdV-3，HAdV-5，HAdV-7），證實該中和抗體只特異性中和HAdV-4腺病毒。
2、鑑定MN4b識別的HAdV-4hexon蛋白構象表位：研究人員以Adc68 hexon蛋白的晶體結構為模板，構建HAdV-4 hexon蛋白的同源三聚體模型。通過序列比對和構建的模型，研究人員預測出了4個潛在的抗體中和表位，分別為：R1，R2，R5，R7-1。通過對這4個預測的抗原表位進行生物合成及小鼠免疫發現，只有抗原表位R7-1能夠與單抗MN4b結合併刺激小鼠產生中和抗體。
3、構建HAdV-4 HVR7突變株進一步確定MN4b識別的表位：HVR7表位由兩個獨立的表位組成，分別為R7-1和R7-2。研究人員通過構建HAdV-4突變株rAd4-3R7，rAd4-3R7-1，rAd4-3R7-2，發現rAd4-3R7和rAd4-3R7-1能夠完全逃離MN4b抗體的中和作用，說明R7-1位點是MN4b識別的重要表位。
4、HAdV-4抗血清對突變毒株的中和作用：研究人員通過分別使用兔抗HAdV-4血清和人抗HAdV-4血清對HAdV-4突變株rAd4-3R7，rAd4-3R7-1，rAd4-3R7-2作用發現，抗HAdV-4血清對突變株rAd4-3R7，rAd4-3R7-1的中和效價降低了16-32倍，進一步證實R7-1是主要的抗體中和表位。