高內涵篩選系統(HCS)與酶標儀、流式細胞儀和螢光顯微鏡從功能上分析HCS可以完成酶標儀、流式細胞儀和螢光顯微鏡的大部分功能,但是HCS的功能不僅僅局限與此。小編帶大家了解一下高內涵篩選系統的全面功能。
從自動數據獲取、自動數據分析、單個細胞分析、多個參數檢測、貼壁細胞、懸浮細胞、空間信息、形態學角度來分析,高內涵篩選可以完成上述所有功能,而酶標儀、螢光顯微鏡(包括Confocal)和流式細胞儀則各有不足之處。
HCS與雷射共聚焦顯微鏡的比較
共聚焦顯微鏡的目的是獲取圖像質量高的圖片,進行的是定性的研究;而HCS在獲取類似共聚焦圖片質量的同時,還可以進行在線的數據分析,是定性與定量的結果;HCS可以用於大規模的藥物篩選,具備適合高通量的要求;HCS對樣品的要求不高,在實驗室現有的細胞螢光實驗基礎上,就可以展開實驗;而共聚焦對於樣品的要求極高,達不到要求根本獲得不到高質量的圖片;
HCS只需要普通的多孔板就可以掃描,而共聚焦需要使用玻璃板,成本高;HCS可以進行長期的實驗觀察;共聚焦的雷射光源對於細胞有極大的損傷。
HCS與流式細胞儀的比較
流式細胞儀不可能觀察每個細胞的形態,也不可能得到每個細胞在不同螢光通道的圖片;而HCS可以觀察到每一個細胞的形態,得到相應的圖片,並可根據所獲取的圖片,對大量的細胞進行分析,也可以得到類似流式細胞儀分析的直方圖和象限圖。
流式細胞儀不可能觀察貼壁細胞,每次檢測需要把細胞消化下來,對細胞的生命活動有一定的影響,不可避免的損失了某些細胞生命活動的真實數據。
流式細胞儀不可能進行活細胞的動態觀察,HCS配有活細胞工作站(可以培養72h以上),可以進行動態觀察,拍攝相應的錄像;並可選配GFP標記的融合蛋白穩定轉染的細胞株,加入外界刺激後,在HCS中進行動態觀察。HCS可以進行6個通道的檢測,而流式細胞儀最多進行4個通道。
HCS與傳統圖像分析系統的比較
和普通的圖像分析系統不同的是,HCS不是簡單的組合,而是在一個新的更高層次的平臺,它突出的是多信號,多數據,自動分析的特點。此外,傳統的圖像分析系統都需要一個定標校準的步驟,否則,螢光強度的分析就很不準確,不能被國際認可,在數據分析上有很大的缺陷;而HCS的光路系統是一個封閉的系統,已經經過了嚴格的定標校準過程,得出的圖像數據分析是被國際認可的,很多頂級雜誌(如Science、Nature、Cell)都認可HCS的數據分析。
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