雷公藤甲素幹預脊髓損傷模型Thy-YFP轉基因小鼠調節自噬及抑制細胞凋亡

2020-10-20 中國組織工程研究雜誌

文題釋義：

細胞自噬：自噬是一種細胞的自我保護機制，通過自噬體-溶酶體途徑降解和再循環受損細胞器、有毒物質、錯誤摺疊蛋白質等，在維持細胞穩態方面具有重要作用

轉基因小鼠：1974年，Rudolf Jaenisch通過將SV40 病毒的DNA注射到小鼠的囊胚中，創造了第一隻攜帶外源基因的小鼠。後來又有研究人員把Murine leukemia病毒注射到小鼠胚胎得到了能通過生殖系統穩定遺傳的小鼠，並且外源基因能在後代中穩定表達。這些能穩定遺傳且表達外源基因的小鼠即現在一般意義上所說的轉基因小鼠。

背景：研究表明，在腦卒中大鼠模型中，雷公藤甲素治療減少了缺血性病變區域面積、水含量和神經細胞死亡。此外，雷公藤甲素能通過抑制星形膠質細胞增生、小膠質細胞活化和抑制炎症反應促進脊髓損傷修復。

目的：研究雷公藤甲素對Thy-YFP轉基因小鼠脊髓損傷後細胞自噬和細胞凋亡的影響，探討雷公藤甲素對脊髓損傷的保護作用及機制。

方法：將60隻Thy-YFP轉基因小鼠隨機分為4組，分別是假手術組、二甲基亞碸組、甲基強的松龍組和雷公藤甲素組。假手術組只進行椎板切除術，不損傷脊髓；其他3組建立脊髓損傷模型。雷公藤甲素組、二甲基亞碸及假手術組小鼠術後立即分別腹腔注射雷公藤甲素[0.2 mg/(kg·d)]或等量5%二甲基亞碸-生理鹽水溶液，連續給藥7 d；甲基強的松龍組小鼠於術後30 min、6 h、24 h腹腔注射甲基強的松龍溶液(30 mg/kg)。BMS評分檢測小鼠運動功能恢復情況，蘇木精-染色及Nissl染色法檢測各組脊髓組織恢復情況，免疫印跡及免疫螢光染色檢測各脊髓組織中自噬相關蛋白Beclin-1、LC3B、p62及凋亡相關蛋白Bcl-2、Bax、caspase-3的蛋白水平。動物倫理獲得河北北方學院批准(W20200002)。

結果與結論：①雷公藤甲素及甲基強的松龍組脊髓損傷後運動功能改善，神經細胞死亡減少；②雷公藤甲素處理後自噬相關蛋白LC3B上調，p62降低，細胞凋亡相關蛋白caspase-3和Bax降低，抗凋亡蛋白Bcl-2升高；③結果表明，雷公藤甲素能促進脊髓損傷後運動功能恢復，其機制與促進自噬和抑制凋亡有關。結果提示雷公藤甲素可能對脊髓損傷具有潛在的神經保護作用。

ORCID: 0000-0002-8986-6091(朱寧)

中國組織工程研究雜誌出版內容重點：組織構建；骨細胞；軟骨細胞；細胞培養；成纖維細胞；血管內皮細胞；骨質疏鬆；組織工程

關鍵詞: 雷公藤甲素, 自噬, 凋亡, 脊髓損傷, 動物, 小鼠, 實驗

文章來源：朱 寧, 楊新明, 阮建偉. 雷公藤甲素幹預脊髓損傷模型Thy-YFP轉基因小鼠調節自噬及抑制細胞凋亡[J]. 中國組織工程研究, 2020, 24(35): 5650-5655.

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