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MTT法和CCK-8測定細胞毒性和增值的優劣比較
首頁 » MTT法和CCK-8測定細胞毒性和增值的優劣比較 MTT法和CCK-8測定細胞毒性和增值的優劣比較 來源:丁香園論壇 2007-01-10 21:41
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CCK-8實驗補充說明
※※加入10ul待測藥物(設置不同濃度梯度)後,稍微搖晃96孔板混勻。※※檢測OD值前,如果孔內有氣泡,可用小的針頭扎破它,避免影響OD值結果,加量小的液體需貼壁加,量較大時不需貼壁,避免產生更多氣泡。
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不可不知的細胞檢測方法——MTT
MTT原理 MTT全稱為3-(4,5)-dimethylthiahiazo (-z-y1)-3,5-di- phenytetrazoliumromide,漢語化學名為 3-(4,5-mtt二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴鹽,商品名:mtt噻唑藍。是一種黃顏色的染料。
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cck-8
概述:Cell Counting Kit- -8 (CCK- -8) 利用了Dojindo開發的水溶性四唑鹽- -wsT@-8(2-(2-甲氧基-4-硝苯基)3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯) -2H-四唑單鈉鹽),它在電子載體1-Methoxy PMS存在的情況下能夠被還原成水溶性的甲臢染料,如圖1所示。CCK- 8溶液可以直接加入到細胞樣品中;不需要預配各種成分。
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CCK-8實驗原理及步驟簡析
CCK8全稱Cell Counting Kit-8試劑,可用於簡便而準確的細胞增殖和毒性分析。其基本原理為:該試劑中含有WST-8[化學名:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑單鈉鹽],它在電子載體1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯(1-Methoxy PMS)的作用下被細胞中的脫氫酶還原為具有高度水溶性的黃色甲瓚產物(Formazan dye)。生成的甲瓚物的數量與活細胞的數量成正比。因此可利用這一特性直接進行細胞增殖和毒性分析。
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如何做好CCK-8實驗
CCK-8實驗可檢測細胞活力、增殖、細胞毒性等,廣泛應用於藥物篩選等臨床前實驗研究。1. 細胞鋪板將檢測細胞對象按照合適的細胞濃度接種到96孔板,一般來說,每個孔這種3000-5000個細胞就可以了。加CCK8孵育,上機檢測每孔加入10微升CCK8溶液,同時避免產生氣泡。也可根據實驗需要調整加入CCK8的量,但是組間要統一。加入CCK8後,避光孵育1-4小時後,酶標儀檢測OD450 nm處吸光值。
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淺談CCK-8實驗步驟
今天我們介紹一種用得很廣泛的檢測細胞活性方法CCK-8。CCK-8具有很多優點:(1)比MTT更敏感;(2)對細胞無毒性(3)步驟簡單(4)性能穩定等。CCK-8是 Cell Counting Kit-8的簡稱,CCK-8性能很穩定,在室溫避光的情況下可以保存6個月,在2-8℃可以保存2年,-20℃以下可以更長時間保存。小編簡單為小夥伴們介紹下CCK-8的使用方法,以藥物處理貼壁細胞為例。
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CCK-8檢測細胞活性操作手冊(中英文對照版)
Cell Counting Kit-8,簡稱CCK-8試劑盒,是一種基於WST-8(化學名:2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽)而廣泛應用於細胞增殖和細胞毒性的快速、高靈敏度檢測的試劑盒。
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科研達人 | CCK-8,你值得了解!
Cell Counting Kit-8(CCK-8試劑盒)是由日本同仁化學研究所(Dojindo)開發的檢測細胞增殖、細胞毒性的試劑盒,為MTT法的替代方法。Cell Counting Kit-8(CCK-8試劑盒)利用了水溶性四咗鹽——WST-8 (2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽),它在電子載體1-Methoxy PMS存在的情況下能夠被還原成水溶性的甲臢染料。如下圖1所示。CCK8溶液可以直接加入到細胞樣品中,不需要預配各種成分。
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關於CCK8 說明書不會告訴你的事!
什麼是CCK8:CCK8的英文全稱是Cell Counting Kit-8,翻譯即為:數細胞的試劑盒8。嗯,就很字面意思就對了。CCK8檢測細胞增殖的原理:CCK8的主要成分為WST8,它可以與活細胞中的脫氫酶反應,生成橙色物質WST8-Formazan,這種物質可以被釋放到細胞外,溶解在培養基中。
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MTT法
比較 Cell Counting Kit-8(CCK-8)法原理:CCK-8中的主要成分WST®-8能被細胞內的脫氫酶還原為水溶性的橙黃色甲臢,生成甲臢的量與細胞數成正比,可間接測定活細胞數量。
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MTT原理和注意事項
MTT比色法,是一種檢測細胞存活和生長的方法。其檢測原理為活細胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍紫色結晶甲瓚(Formazan)並沉積在細胞中,而死細胞無此功能。二甲基亞碸(DMSO)能溶解細胞中的甲瓚,用酶聯免疫檢測儀在490nm波長處(也有用570nm波長的,我目前用的都是570nm)測定其光吸收值,可間接反映活細胞數量。
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【全攻略】|| 你還在糾結是做MTT還是CCK8?一文全解細胞活性檢測的9個常用方法!!
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CCK調製
本站 發表於 2009-03-01 17:40:19 CCK調製CCK是一種已編碼調製技術,它把擴頻、信道編碼和調製作為一個整體進行設計
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AbMole CCK-8 QASPNIPAM製備通用抗菌表面
由於PNIPAM微凝膠具有出色的成膜能力和季銨鹽(QAS)的高效殺菌性能,因此合成了基於QAS的PNIPAM(QAS PNIPAM)微凝膠,並用於修飾一系列常用材料的表面,包括金屬,塑料和彈性體。在這種經QAS-PNIPAM微凝膠修飾的表面上進行細菌培養,以檢查附著細菌的生存力。
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MTT實驗心得
這時可以將細胞不進行計數,將消化好的細胞混勻後(可能是10 ml)直接在一個廢棄(最好進行過無菌處理)的96孔板中依次加入180、100、50微升細胞,將細胞放置幾分鐘就會沉到板底了,這時在顯微鏡下觀察,推測哪個孔的細胞48 h能基本長滿板底,假設50 微升的孔比較合適,而點板時沒孔需點200 微升,那麼就將細胞濃度再稀釋4倍就可以正式點板了,這時順便將細胞進行計數(因為實驗記錄要求寫啊)。
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8款經濟型示波器比較
超頻現在比較難了,Rigol也減低了100MHZ示波器DS1102E的價格。來看看它們的參數:Screen: 8″ TFT, 800×600 pixelsSample rate: 500MS/s (SDS6062) or 1GS/s (SDS7102)Bandwidth: 60MHz (SDS6062) or 100MHz (SDS7102)Memory
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MTT實驗兩年心得
這時可以將細胞不進行計數,將消化好的細胞混勻後(可能是10 ml)直接在一個廢棄(最好進行過無菌處理)的96孔板中依次加入180、100、50微升細胞,將細胞放置幾分鐘就會沉到板底了,這時在顯微鏡下觀察,推測哪個孔的細胞48 h能基本長滿板底,假設50 微升的孔比較合適,而點板時沒孔需點200 微升,那麼就將細胞濃度再稀釋4倍就可以正式點板了,這時順便將細胞進行計數(因為實驗記錄要求寫啊)。
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8種常見機器學習算法比較
引用一個比較經典的例子,比如,雖然你喜歡Brad Pitt和Tom Cruise的電影,但是它不能學習出你不喜歡他們在一起演的電影。優點:樸素貝葉斯模型發源於古典數學理論,有著堅實的數學基礎,以及穩定的分類效率。