MTT法和CCK-8測定細胞毒性和增值的優劣比較

2020-12-03 生物谷
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MTT法和CCK－8測定細胞毒性和增值的優劣比較

來源：丁香園論壇 2007-01-10 21:41

Cell Counting Kit-8簡稱CCK-8試劑盒，是一種基於WST-8的廣泛應用於細胞增殖和細胞毒性的快速高靈敏度檢測試劑盒。

Ø WST-8是一種類似於MTT的化合物，在電子耦合試劑存在的情況下，可以被線粒體內的一些脫氫酶還原生成橙黃色的formazan。細胞增殖越多越快，則顏色越深；細胞毒性越大，則顏色越淺。對於同樣的細胞，顏色的深淺和細胞數目呈線性關係。

Ø WST-8是MTT的一種升級替代產品，和MTT或其它MTT類似產品如XTT、MTS等相比有明顯的優點。首先，MTT被線粒體內的一些脫氫酶還原生成的formazan不是水溶性的，需要有特定的溶解液來溶解；而WST-8和XTT、MTS產生的formazan都是水溶性的，可以 省去後續的溶解步驟。其次，WST-8產生的formazan比XTT和MTS產生的formazan更易溶解。再次，WST-8比XTT和MTS更穩定， 使實驗結果更加穩定。另外，WST-8和MTT、XTT等相比，線性範圍更寬，靈敏度更高。
該方法已被廣泛用於一些生物活性因子的活性檢測、大規模的抗腫瘤藥物篩選、細胞增殖試驗、細胞毒性試驗以及藥敏試驗等。

總之，CCK-8的原理跟MTT其實是相同的，不同之處在於CCK-8法生成的formazan是水溶性的，不需要再吸出培養液加入有機溶劑溶解這個步驟，因此可以減少一定的誤差。其他優點就是重複性優於MTT；對細胞毒性小；為1瓶溶液，毋需預製，即開即用。
但是CCK-8比MTT的價格要貴不少，所以一般來說，還是MTT法用的多。

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