MTT 細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒操作說明書

MTT 細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒操作說明書

中國教育裝備採購網 2015/7/14 14:53:57 圍觀321次 我要分享

MTT 細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒產品簡介：MTT 比色法是一種檢測細胞存活和生長的方法。MTT 細胞增殖及細胞毒性檢測試劑 盒(MTT Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit)被廣泛應用於細胞增殖和細胞毒性 的檢測。MTT 檢測原理為活細胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性 MTT 還原為水丌溶性的藍紫色 Formazan 並沉積在細胞中，而死細胞無此功能。在特定溶劑存在的情況下，可以被完全溶解。然後通過酶標儀可以測定 570nm 波長附近的吸光度。細胞增殖越多越快， 則吸光度越高；細胞毒性越大，則吸光度越低。eMTT 細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒採用了自主研發 Formazan solvent，使檢測本底低，靈敏度高，線性範圍寬。產品組成：編號名稱 CT0026500T Storage試劑(A): MTT solution(5mg/ml) 5ml -20℃ 避光試劑(B): Formazan solvent 60ml RT使用說明書 1 份自備材料：1、 細胞培養液2、 胰蛋白酶消化液3、 低速離心機4、 96 孔培養板5、 細胞計數板或計數器6、 細胞培養箱7、 搖床8、 顯微鏡9、 酶聯免疫檢測儀操作步驟(僅供參考)：1、 細胞用含血清的培養液培養至對數生長期，常規胰蛋白酶消化液消化細胞(懸浮細胞無需 消化)。2、 低速離心，收集細胞沉澱。3、 用培養液重懸細胞沉澱，製備成單細胞懸液，並計數。4、 細胞接種於 96 孔培養板，一般接種密度為 3000～10000 個細胞/孔。通常細胞增殖實 驗每孔加 3000 個細胞，細胞毒性實驗每孔加入 6000 個細胞。具體每孔所用的細胞的 數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定。5、 37℃ 5%CO2 繼續培養或按照實驗具體需要進行培養，一般培養 6～24h。6、 按照實驗具體要求，給予 0～20μl 幹預藥物處理，37℃ 5%CO2 繼續培養至合適時間。7、 棄培養液，每孔加入 10μl MTT solution 和 100μl 新鮮培養液，在細胞培養箱內繼續 孵育 4h。8、 棄培養液，每孔加入 110μl Formazan solvent，置搖床上低速振蕩 10 min，使結晶物 充分溶解。如果紫色結晶較小或較少，溶解的時間會短一些。如果紫色結晶較大或較多， 溶解的時間會長一些。9、 在酶聯免疫檢測儀 570nm 測定各孔吸光度。注意事項：1、 MTT solution 儘量減少反覆凍融的次數，當顏色變為灰綠色時，請勿使用。2、 由於使用 96 孔板進行檢測，如果細胞培養時間較長，應注意蒸發問題。3、 MTT solution 在低溫情況下會凝固，置於室溫或 20～25℃水浴至全部融解後使用。4、 Formazan solvent 可以-20℃儲存，當產生沉澱或凝固時可以 37℃水浴孵育以促進溶 解，並且必須在全部溶解並混勻後使用。5、 觀察 formazan 是否完全溶解，亦可以藉助光學顯微鏡觀察。6、 培養細胞時儘量細菌避免汙染。7、 應注意設立 OD 調零孔和對照。8、 為了您的安全和健康，請穿實驗服並戴一次性手套操作。有效期： 12 個月有效。

掃一掃,歡迎關注

教育裝備採購網官方微信

掌握教育裝備行業最新、最權威資訊

版權與免責聲明：

① 凡本網註明"來源：中國教育裝備採購網"的所有作品，版權均屬於中國教育裝備採購網，未經本網授權不得轉載、摘編或利用其它方式使用。已獲本網授權的作品，應在授權範圍內使用，並註明"來源：中國教育裝備採購網"。違者本網將追究相關法律責任。

② 本網凡註明"來源：XXX（非本網）"的作品，均轉載自其它媒體，轉載目的在於傳遞更多信息，並不代表本網贊同其觀點和對其真實性負責，且不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。如其他媒體、網站或個人從本網下載使用，必須保留本網註明的"稿件來源"，並自負版權等法律責任。

③ 如涉及作品內容、版權等問題，請在作品發表之日起兩周內與本網聯繫，否則視為放棄相關權利。