MTT法又稱MTT比色法，是一種檢測細胞存活和生長的方法。其檢測原理為活細胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍紫色結晶甲瓚（Formazan）並沉積在細胞中，而死細胞無此功能。二甲基亞碸（DMSO）能溶解細胞中的甲瓚，用酶聯免疫檢測儀在540 或720nm波長處測定其光吸收值，可間接反映活細胞數量。在一定細胞數範圍內，MTT結晶形成的量與細胞數成正比。該方法已廣泛用於一些生物活性因子的活性檢測、大規模的抗腫瘤藥物篩選、細胞毒性試驗以及腫瘤放射敏感性測定等。
1 主要試劑和儀器
MTT試劑：Sigma
DMSO：GBCBIO Technologies
1-1000ul加樣槍、12道排槍：Eppenderf。
Thermo Multiskan MK3 酶聯免疫檢測儀： Thermo。
其他：待測細胞，藥物等（（以A549細胞、DDP化療藥為例）
2.1 化療藥物敏感性實驗
(1) 分別將對數生長期的A549細胞以3×103個/ml接種於96孔細胞培養板中，每孔100μl，設5個復孔，過夜貼壁；
(2) 實驗組加入梯度濃度的鉑類化療藥，另設細胞對照組(只加細胞不加藥)和空白對照組(只加培養基)，37℃培養箱共同孵育72h；
(3) 每孔加入20ml 5 mg/mL 的MTT溶液，繼續培養6~8h後棄去上清液，每孔加入200 ml DMSO，室溫振蕩15 min；
(4) 用酶標儀分別在波長570 nm和630 nm處測定光吸收值（OD值），抑制率=(1一實驗組OD值均值／細胞對照組OD值均值)×100％，用CalcuSyn軟體計算半數抑制濃度(IC50)值；
(5) 實驗至少重複3次。
耐藥指數(resistance index，RI) = 耐藥細胞IC50／敏感細胞IC50。
2.2 細胞生長曲線的繪製
(1) 細胞培養：取對數生長期的細胞，消化傳代（不能消化時間過長，以免影響細胞活力），計數細胞並調整至所需細胞的濃度，接種於96孔板中，37℃培養箱中繼續培養，共培養5d；
(2) 細胞計數：每24h加入MTT溶液20 ml，繼續培養6~8 h，後棄去上清液，每孔加入200 ml DMSO，室溫振蕩15 min後於酶聯免疫測試儀570 nm和630 nm波長處測定OD值。
(3) 細胞生長曲線的繪製：以橫坐標為生長天數，縱坐標為OD值，對每種細胞的生長曲線作圖，比較各種細胞間生長速度的差異。
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第一課：實驗室小白普及教學：細胞培養
第二課：實驗室小白普及教學：三維細胞培養
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