CCK-8法細胞毒性檢測步驟可以按照試劑盒說明一步一步來即可，這裡就不在累贅了，但是，重點來了！tips還是非常重要滴，拿走不謝~~
1、首次做實驗時,建議先做幾個孔摸索接種細胞的數量和加入CCK8試劑後的培養時間；
2、接種時注意細胞懸液一定要混勻,以避免細胞沉澱下來,導致每孔中的細胞數量不等,可以每接種幾個孔就混勻一下；
3、懸浮細胞與貼壁細胞相比較難顯色。對於懸浮細胞在加入CCK-8培養1-4小時後,可先從培養箱中取出,目測染色程度或用酶標儀測定決定。若顯色困難,可將培養板放回培養箱,繼續培養數小時後再確定；
4、 加CCK-8試劑時，斜貼著培養壁加，不要插到培養基液面下，容易產生氣泡，會干擾O.D值讀數；
5、為使CCK-8試劑和培養基充分混勻,建議在加入CCK-8試劑後輕輕振搖培養板。為了避免加樣時由於CCK-8試劑在槍頭上的殘留所帶來的誤差,可以在加樣前用培養基稀釋CCK-8試劑並混勻後加樣；
6、如果待測物質有還原性，就會和CCK-8試劑發生顯示反應，增加吸光度，如果藥物有氧化性則降低吸光度。請檢查背景的OD值，即在不含細胞的培養基中加入藥物,然後加入CCK-8試劑在一定時間內檢測,和不加藥物的培養基進行比較(只加CCK-8試劑),如果OD值明顯偏高,則說明有反應，也可以在加CCK-8之前更換新鮮培養基，去掉藥物影響。
7、加入待測物質的濃度需要多參考文獻，選擇合適的濃度梯度進行篩選。
8、儘量使用多通道移液器，可以減少平行孔間差異。
9、如果樣品為高渾濁度的細胞懸液，可以設定600nm作為參比波長，扣除參比波長的OD值。