抗體組庫技術篩選特異性抗體

2020-12-05 漫天飛絮home

人源化抗體是指抗體的可變區部分(即Vh和V1區)或抗體全部由人類抗體基因所編碼。人源化抗體可以大幅降低醫院抗體對人類集體造成的免疫副反應。人源化抗體的而形式也從最初的嵌合抗體、改型抗體等逐步發展為人源化抗體。

抗體組庫

全人抗體是治療性抗體的發展趨勢,目前通常使用抗體組庫的方法生產全人抗體。抗體庫技術的發展使體外不經過免疫獲得抗體成為可能。原理都是將抗體分子片段展示在某介質的表面,通過與固定的抗原經過多輪結合-洗脫-信號放大,獲得特異性抗體片段。由於篩選基於競爭結合的機制,抗體庫中拷貝數多的抗體會優先被篩選出來,不利於篩選出高親和力、低拷貝數的抗體。將經過1~2輪篩選後的抗體庫直接測序,就可以篩選出傳統方法難以發現的高親和力、低拷貝數抗體。

經典的抗體庫都是通過噬菌體外殼蛋白Ⅲ和蛋白Ⅷ融合單鏈抗體(ScFv)的形式展示於噬菌體表面, 繼而通過多輪的抗原淘選可獲得完全人源的單鏈抗體(ScFv)。現在有一種改進的方法可以使ScFv的篩選完全在體外完成。該技術從ScFv基因文庫開始, 在非細胞系統使基因轉錄, 基因中不插入終止子, 形成一個RNA-ribosome-ScFv 複合體, 以類似噬菌體庫的篩選方式得到特異結合靶分子的複合物之後,分離RNA 進行PCR擴增 , 在擴增的同時還能引入突變,刺激親和力成熟過程並獲得包含更高親和力的次級抗體庫。

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