螢光納米金剛石(Fluorescent nanodiamonds,FND)中氮空位(nitrogen-vacancy,NV)缺陷的量子自旋特性,不僅在量子計算和通信領域應用廣泛,其螢光性能也十分優異,包括高量子產率,無光閃爍或光漂白,高穩定以及低毒性等。在磁場量化、溫度傳感和生物標記等方向上也存在著廣泛的應用。與中性(NV0)中心不同,NV-中心的主要優勢在於,其螢光可以通過自旋調控的方式進行選擇性調節,從而在高背景環境中實現信號分離。
傳染病對全球健康構成了巨大挑戰,而早期的診斷對於各種傳染病有效的治療和預防至關重要。目前對傳染病病毒,如人類免疫缺陷病毒(HIV)或是新冠病毒(SARS-CoV-2)檢測的方法較為繁瑣,且需要較長時間。而與妊娠測試相似的紙基側向流動測試(lateral flow assay, LFA)則是一種便捷的檢測方法。其工作方式為將紙的一端浸入樣本中,通過顏色(或螢光信號)的變化與否進行診斷。這種方法便捷且迅速,無需在實驗室中處理結果。然而,當前基於納米顆粒的生物傳感器的靈敏度仍然欠缺。
近日,英國倫敦大學學院 Benjamin S. Miller等人在 Nature雜誌發表了題為:Spin-enhanced nanodiamond biosensing for ultrasensitive diagnostics 的最新研究論文。
該研究將螢光納米金剛石用作體外診斷的超靈敏標籤,並通過微波調節發射強度與頻域分析,將信號與背景螢光信號分離,突破了靈敏度的限制。
基於該技術的低成本檢測試紙,對生物素-親和素模型的檢測極限達到了8.2×10-19摩爾。在對HIV病毒檢測實驗中,比傳統使用金納米顆粒的檢測靈敏度提高了98000倍。
此外,由於HIV病毒相對於抗原和抗體能夠更早的被檢測到(分別提早7天與16天),因此與現有的基於實驗室的核酸檢測或即時蛋白檢測相比,該技術提供了更早診斷的潛力。除了HIV病毒之外,該技術還適用於SARS-CoV-2病毒,並正在進行新冠病毒的試點。
傳統的生物傳感檢測中,螢光標記物受到來自於樣品或試紙條的背景螢光的限制,大大阻礙了對低濃度的RNA或DNA的檢測。在該研究中,研究人員主要利用了納米金剛石中氮空位缺陷的量子特性。這種量子特性允許通過微波場調控的方式,對靶向分子發出的螢光信號進行調節,將信號固定在設定好的頻率上,從而將目標螢光信號與背景信號分離,實現低濃度檢測。
基於納米金剛石的側向流動測試
通過微波對納米金剛石螢光信號進行調節
光學結果表明,與金納米顆粒相比,基於納米金剛石的樣品靈敏度提高了五個數量級(98000倍)(這意味著生成可檢測信號所需的納米顆粒數量要少得多)。且恆溫核酸擴增耗時僅為10分鐘(RNA增殖),這使得對愛滋病病毒的單分子檢測成為現實。
基於納米金剛石的側向流動測試的檢測極限
第一作者Benjamin S. Miller博士表示,基於紙的測向流動測試避免了繁瑣的實驗室分析,顯著提升了測試便捷性與及時性,同時大大降低了成本,這使得它們在資源貧乏地區特別適用。
另一位通訊作者Rachel A. McKendry表示,該技術非常靈活,可以輕鬆適應其他疾病和生物標記物類型。當下研究團隊正在進行該技術在新冠病毒檢測方面的研究。Rachel A. McKendry相信,這種變革性的新技術將使患者受益,並保護人們免受傳染病的侵害。
目前,該技術已經成功在實驗室環境中進行了演示,但是,研究人員希望進行進一步的測試,以便可以使用智慧型手機或可攜式螢光讀取器讀取結果。這意味著將來可以在資源較少的環境中進行測試,從而更便捷的進行病毒檢測。
論文連結:
https://www.nature.com/articles/s41586-020-2917-1
來源:高分子科學前沿