【專家診木】刺蝟紫檀木材DNA條形碼鑑定研究

2021-01-19 新會古典家具城

     1.2.1   DNA提取及純化  稱取500mg木材粉末置於50mL無菌離心管中，使用DNA提取試劑盒（DNeasy Plant MaxiKit，QIAGEN）提取木材總DNA。木材DNA純化採用PCR擴增模板純化試劑盒（High Pure PCR Template Prepara⁃tion Kit，Roche）純化DNA提取物。


    1.2.2   DNA條形碼序列的擴增、產物純化及克隆測序  通過比較和分析GenBank已公布的紫檀屬細胞核ITS2、葉綠體matK基因和葉綠體基因間隔序列ndhF-rpl32，設計3對DNA條形碼序列擴增引物。引物合成由生工生物工程（上海）股份有限公司完成。3條DNA條形碼序列擴增引物信息和反應體系見表2。PCR產物特異性通過1.5%瓊脂糖凝膠電泳檢測後，採用Easy Pure Quick Gel Extrac⁃tion Kit （全式金）進行膠回收純化回收，純化回收後的DNA條形碼片段克隆採用pEASY-T1 Simple Cloning Kit（全式金），並在固體LB平板中進行培養和藍白斑篩選。將鑑定為陽性克隆重組子的菌液送至生工生物工程（上海）股份有限公司測序，為保證測序結果準確性，每個樣品選擇5個獨立的克隆重組子進行雙向測序。


     1.2.3   DNA條形碼序列的分析  測序結果採用Laser⁃gene Suite 7軟體進行正反向序列校對和拼接，去除引物兩端載體序列。採用MEGA 5.0軟體的Kimura two param⁃eter （K2P）模型進行DNA條形碼種間和種內遺傳距離計算，統計序列的鹼基組成、變異位點和信息位點等序列特徵信息。採用BLAST方法對獲得的DNA條形碼序列在GenBank資料庫中進行相似性同源搜索。將GenBank中與刺蝟紫檀DNA條形碼序列同源性序列較高的同屬其他種序列（見表3）與本研究獲取的DNA條形碼序列一起採用鄰接法（neighbor-joining，NJ）構建系統發育樹，系統發育樹各分支的置信度用自舉檢驗法（boot-strap text）作1000次可信度分析。

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  • 中國林科院木材所出具我國首份木材DNA鑑定報告
    木材所木材鑑定團隊在形態解剖學基礎上，通過提取木材樣品DNA，採用DNA條形碼技術對其進行了科學分析，準確鑑定出送檢木材樣品為豆科紫檀屬的刺蝟紫檀（Pterocarpus erinaceus Poir.），2016年已被列入《瀕危野生動植物種國際貿易公約》（CITES）附錄II管制，並正式出具了我國首份木材DNA權威鑑定報告。該鑑定報告為我國海關部門執法提供了有力科學證據。
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    根據國家標準化管理委員會關於下達2020年的四批推薦性國家標準計劃的通知（國標委發〔2020〕53號），由全國木材標準化技術委員會申報並歸口管理的國家標準《木材鑑別 DNA條形碼方法》（計劃編號：20204633-T-432）獲批立項。
  • 木材的螢光現象之一「光致光」
    直到1852年，英國數學和物理學家Stokes經過觀測研究後 ，提出 了螢光是光發射的概念，並首次使用了「螢光」這一術語。5.螢光技術之於木材識別的意義⑤傳統的木材識別方法是建立在木材解剖學基礎之上，單純依據木材及其解剖構造特徵進行的，由於較難或無法得到諸如皮、根、葉、花、果等直觀特徵的配合，一般只能鑑定到「屬」或「類」。
  • 木材知識 最硬的木頭到底是什麼木
    NO4: 小葉紫檀　　　　紫檀可是說是我們接觸最多的一種木質手串，紫檀產自印度，學名檀香紫檀，民間稱謂小葉紫檀，大體上說紫檀玩的是密度，在了解這一點以後我們再區分金星紫檀，牛毛紋紫檀，雞血紫檀，火焰紋紫檀，紫檀瘤，等等很多叫法。
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    安達曼紫檀，豆科蝶形花亞科紫檀屬，喬木樹高可達15m，直徑可達60cm，主產於印度安達曼群島。木材顏色紅色帶紫，心材紅褐至紫紅褐色，常帶黑色條紋，受紫外線照射後，材色變深；紋理典型交錯，鹿斑花紋；木片劃痕可見，水浸出液黃褐色有螢光。木材花紋美觀，氣幹密度0.69-0.87g/cm。
  • DNA條形碼 海洋生物的「身份證」
    海洋生物將擁有「分子身份證」 　　早在2004年第225次的香山科技會議上，業內專家就曾針對「海洋生物基因資源的研究與利用」進行過研討。 　　「眾所周知，每種生物都有其特有的遺傳密碼，即以DNA為載體的基因的核苷酸序列，如同商品標籤上的數字條形碼一樣，因此有科學家提出可以利用DNA核苷酸序列（即DNA barcoding，DNA條形碼）作為物種的鑑定標籤。生物技術的發展，使得DNA的提取和測序越來越簡便、經濟，使利用DNA條形碼技術進行生物的快速準確的鑑定成為可能和發展趨勢。
  • 【每日動態】微型dna條形碼,用於識別在臺灣海峽沿岸市場出售的商業魚類
    微型dna條形碼，用於識別在臺灣海峽沿岸市場出售的商業魚類Food Control（IF 4.248，1區）檢測魚類替代和造假已成為食品行業的一個重要主題，越來越需要可靠、快速和可重複的檢測來識別商業魚類。最認可的形態學方法並不簡單，不能用於加工產品。全長DNA條形碼可以部分解決這個問題，但由於DNA降解，在高度加工產品中應用並不成功。
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