中文摘要:
目的:
以園藍為研究材料,鑑定園藍花青素提取物(GBBAEs)中的功能性成分的結構,建立脂多糖(LPS)誘導的體外炎症模型,並評價其抗炎作用和初步機制。
創新點:
首次探究了藍莓花青素對建立的LPS誘導體外炎症模型的營養幹預作用,並初步探究了發揮抗炎機制的作用通路。
方法:
將RAW 264.7細胞分為對照組(不作處理)和實驗組(1 µg/ml LPS刺激建模)。實驗組進一步分為3個不同濃度組:400 µg/ml GBBAEs組、800 µg/ml GBBAEs組和1200 µg/ml GBBAEs組。用酶聯免疫吸附測定(ELISA)試劑盒檢測一氧化氮(NO)、前列腺素E2(PGE2)、白細胞介素1β(IL-1β)、白細胞介素6(IL-6)、幹擾素γ(INF-γ)等炎症因子的釋放量;用實時定量聚合酶鏈反應(RT-PCR)分析IL-1β、IL-6、TNF-α、環氧合酶-2(COX-2)及單核細胞趨化蛋白-1(MCP-1)的炎症相關基因mRNA的表達水平;用蛋白質印跡法(Western blot法)測定相關炎症蛋白COX-2和NF-κBp65表達水平。
結論:
試驗結果表明,通過ELISA法測定GBBAEs可以顯著性抑制NO、PGE2、IL-1β、IL-6、INF-γ等炎症因子的釋放;RT-PCR分析闡明在LPS誘導的單核-巨噬細胞RAW 264.7中,GBBAEs可以顯著性抑制IL-1β、IL-6、TNF-α、COX-2及MCP-1的炎症相關基因mRNA的表達水平。此外,Western blot法進一步顯示GBBAEs對相關炎症蛋白COX-2和NF-κBp65表達具有明顯抑制作用,進一步證實GBBAEs通過NF-κB機制通路來發揮抗炎作用。
關 鍵 詞:
園藍花青素;抗炎;單核-巨噬細胞RAW 264.7細胞;環氧合酶-2(COX-2);NF-κBp65
作 者:
Wei Xu, Qing Zhou, Yong Yao, Xing Li, Jiu-liang Zhang, Guan-hua Su, Ai-ping Deng
本文引用格式:
Wei XU, Qing ZHOU, Yong YAO, Xing LI, Jiu-liang ZHANG, Guan-hua SU, Ai-ping DENG, 2016. Inhibitory effect of Gardenblue blueberry (Vaccinium ashei Reade) anthocyanin extracts on lipopolysaccharide-stimulated inflammatory response in RAW 264.7 cells. Journal of Zhejiang University SCIENCE B (Biomedicine & Biotechnology), 17(6):425-436
http://dx.doi.org/10.1631/jzus.B1500213