倒置螢光顯微鏡的使用

2021-02-08 明美光電

倒置螢光顯微鏡是近代發展起來的新式螢光顯微鏡,其由倒置顯微鏡和落射螢光裝置組成,具有在培養皿或培養瓶內進行顯微觀察的特點,可實現活體細胞和組織、流質、沉澱物等差螢光觀察是科學研究工作中的理想儀器。所以,在醫學科研型研究生的實驗教學中,掌握倒置螢光顯微鏡的使用至關重要,只有正確的使用和妥善的管理倒置螢光顯微鏡,才能發揮它的功能和提高使用率,使之更好地為實驗教學和科學研究服務。


倒置螢光顯微鏡的正確使用


倒置螢光顯微鏡是用於高端生物科學研究領域的多功能顯微鏡,其結構複雜且價格昂貴,因此,要想醫學研究生正確掌握倒置螢光顯微鏡的操作使用規範,教師得首先在示範倒置螢光顯微鏡的實際操作之前,開設學習倒置螢光顯微鏡基本知識的課程,介紹倒置螢光顯微鏡的結構、原理、功能和基本使用方法,再在具體的使用操作中,針對不同的標本,示範不同的功能,由淺入深,逐漸使醫學研究生對倒置螢光顯微鏡的操作使用規範化。


    1.明視野觀察的正確使用。倒置螢光顯微鏡的功能之一是明視野觀察,其基本原理是標本經光線照射後,各部分對光吸收的不同而在明亮的背景中實現成像,主要適用於經染色或本身具有顏色的細胞、組織切片等標本的觀察。


   2.相差觀察的正確使用。倒置螢光顯微鏡的功能之二是相差觀察,其基本原理是將樣本不同部分的光程差轉變為振幅差,經過帶有相位片的相差物鏡和帶有環狀光闌的聚光鏡實現觀測,主要適用於活細胞或不染色的組織切片觀察,在實驗教學過程中,除了正確引導醫學研究生遵守相差觀察的基本操作方法,同時更為重要的是引導他們對使用相差觀察的標本認識和掌握。對他們來說,在日後的科學研究中,最為常用的是培養細胞的顯微觀察。首先,對於細胞器材的選擇,一般建議使用玻璃材質和塑料材質的培養皿、培養板和培養瓶。它們多為無色透明,可直接在倒置螢光顯微鏡上進行觀察,不用倒掉細胞液和經過其他處理。其次,在進行顯微觀察中,不要隨意打開器材的蓋子,以免汙染細胞。最後,對於操作人員來說,需佩戴手套、口罩和白大衣,不僅可以保護自身健康而且可以防止細胞汙染。


   3.螢光觀察的正確使用。倒置螢光顯微鏡的功能之三是螢光觀察,其基本原理是利用激發光激發樣本產生螢光,從而實現樣本的形狀與定位觀察,主要適用於螢光標記樣本的觀察。螢光觀察是倒置螢光顯微鏡的重要功能,其配件昂貴且使用特殊。要想醫學研究生正確地掌握螢光觀察的操作使用規範,教師除了教會他們掌握基本的操作方法,同時更為重要的是教會他們掌握它的特殊性。首先,在標本製作中,載玻片和蓋玻片應表面光潔且厚度適宜(載玻片在0.8mm~1.2mm之間,蓋玻片在0.17mm左右);標本應厚度適宜,同時避免細胞重疊或雜質掩蓋;封裱劑應使用甘油和碳酸鹽緩衝液(0.5mol/L PH9.0~9.5)的等量混合液。其次,在螢光觀察前,應關閉房間內的電燈和倒置螢光顯微鏡的白光,確保處於暗室環境。最後,在螢光觀察中,應嚴格控制觀察時間,一般以1~2小時/次為宜,否則螢光會出現衰減和消失的現象;調整光源時應佩戴防護眼鏡,避免紫外線對眼鏡的傷害。

   4.圖像拍攝的正確使用。在科學研究中,不僅要求倒置螢光顯微鏡可以實現多種觀察,而且要求倒置螢光顯微鏡可以實現圖像拍攝。倒置螢光顯微鏡系統通過光電轉換將光學顯微鏡與計算機結合在一起,不僅可以在目鏡上進行顯微觀察,而且可以在計算機上進行實時動態圖像的觀察、編輯和保存。



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    品牌【血液科顯微鏡】多功能螢光生物顯微鏡型號齊全,現貨銷售。微特視界科技(深圳)有限公司WTD-3倒置生物顯微鏡採用優良的無限遠光學系統。配置長工作距離平場物鏡與大視野目鏡,緊湊穩定的高剛性主體,充分體現了顯微操作的防振要求。旋轉擺入擺出式聚光系統,可對高培養皿或圓筒狀燒瓶進行無沾染培養細胞觀察。
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    (三)數碼攝像系統1.攝像頭2.圖像採集卡3.軟體4.微機光學顯微鏡有多種分類方法:按使用目鏡的數目可分為雙目和單目顯微鏡;按圖像是否有立體感可分為立體視覺和非立體視覺顯微鏡;按觀察對像可分為生物和金相顯微鏡等;按光學原理可分為偏光、相襯和微差幹涉對比顯微鏡等;按光源類型可分為普通光、螢光、紫外光
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