石蠟切片與冰凍切片

2021-01-21 廣西醫大睿谷Rexplo

1、固定:

將新鮮組織切成小塊,固定於10%中性緩衝福馬林液。固定時間則根據材料塊的大小及松密程度而定,離體組織的及時固定可以保持組織細胞與生活時的形態相似,抑制組織自溶及細菌繁殖所致的腐爛,可以凝固組織中的物質成分、終止細胞的一切代謝過程,同時能使組織硬化,有利於切片的進行。


2、脫水:

為了減少組織材料的急劇收縮,應使用從低濃度到高濃度遞增的順序進行脫水,經過75%、85%、95%直至無水酒精,每次時間為1小時,可根據實驗室情況適當調整脫水時間。固定後的組織需除去留在組織內的固定液及其結晶沉澱,否則會影響後期的染色效果。原因在於透明劑多數是苯類,苯類和石蠟均不能與水相融合,水分不能脫盡,苯類無法浸入。酒精是最為常用的脫水劑,它既能與水相混合,又能與透明劑相混。


3、透明:

二甲苯是最常用的透明劑,也是石蠟的溶劑。純酒精不能與石蠟相溶,需用能與酒精和石蠟相溶的溶劑,替換出組織內的酒精。組織塊在透明劑浸漬過程稱透明。


4、浸蠟:

先把組織塊放在熔化的石蠟和二甲苯的等量混合液浸漬1小時。先後移入2個熔化的石蠟液中浸漬1小時左右使石蠟浸入組織中而起支持作用。


5、包埋:

將熔化的石蠟倒入包埋模具內,而後用加熱是鑷子將浸過蠟的組織塊放入包埋模具中,包埋完成後置於冷臺上冷卻讓石蠟固定。


6、切片:

切片刀的銳利與否、蠟塊硬度是否適當都直接影響切片質量,通常切片厚度為3-5微米,用毛筆輕託輕放在40度水浴中展片。

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