RNAi途徑較為明顯優勢是，促使後生物動物細胞中，普遍存在的轉錄後基因沉默（PTGS）機制。小番健康再接上一章，深入介紹當前用於開發全球慢性B肝新藥常見的RNA幹擾（RNAi）和其他靶點有什麼不同。
B肝RNAi新藥機制，強而特異性基因沉默，受小雙鏈RNA影響
這種途徑開發的研究藥物，強而特異性的基因沉默，主要是受到小的雙鏈RNA影響，比如，21-23nt短幹擾RNA（siRNAs）和≈22nt microRNAs（miRNAs）。在哺乳動物細胞中，miRNAs在基因調控中起著基礎性作用，由miRNA的生物合成途徑產生的。儘管這一途徑的基本步驟是眾所周知的，但最近已經描述了其額外的調節因子和機制。
編碼miRNAs的基因被轉錄以產生前體轉錄物，從中可以逐步生成成熟序列，包括RNase III酶的作用。轉錄本中的特徵性髮夾結構，構成了原發性miRNA（pri-miRNAs）。pri-miRNA中的序列基序，被核Drosha–DGCR8微處理器複合體識別。產物是一種被稱為miRNA前體（pre-miRNA）的較短髮夾，由Exportin-5以Ran-GTP依賴的方式，通過核孔複合體從細胞核中輸出（下圖——南非約翰尼斯堡威特沃特斯蘭德大學健康科學學院病理學院抗病毒基因治療研究室：合成和表達RNA幹擾（RNAi）途徑激活劑）。
在細胞質中，前miRNA的末端環被RNase III酶切開，產生一個不完全配對的≈22bp的miRNA雙鏈。通過Drosha和Dicer對RNaseⅢ的切割，雙鏈末端有2個nt3′懸垂。選擇miRNA雙鏈的一條鏈，作為成熟的miRNA或引導序列，並加載到RNA誘導沉默複合物（RISC）的Argonaute（Ago）蛋白上。在轉載前，Dicer與TAR（反式激活反應）RNA結合蛋白（TRBP）結合形成RISC負載複合物。
RISC負載是不對稱的，因為選擇穩定性較低的miRNA雙鏈作為成熟的miRNA。有4種密切相關的Ago蛋白（ago1-4）可能與miRNA相關，但只有Ago2具有核酸內切酶的活性。miRNA通常將RISC引導至信使RNA（MRNA）3′非翻譯區（UTR）的部分互補結合位點，然後將其靶向翻譯抑制、去基化和降解。或者是，如果miRNA和mRNA之間，存在近乎完美的互補鹼基配對，那麼，mRNA可能被Ago2 RISC切割。
這份關於RNA幹擾（RNAi）開發全球B肝新藥的技術，經常發生在人工RNAi激活劑中，當然，這種激活劑現已經被全球眾多藥企用於開發抗HBV新藥。這些人工序列被設計成在miRNA生物合成途徑的不同步驟中，作為中間產物來重編程沉默以用於慢性B肝。與天然的中間產物一樣，RNA激活劑的序列和結特徵，對於實現高效的HBV基因沉默具有重要的意義。
小番健康結語：RNAi途徑開發新藥十分複雜，作用機制也與其他靶標明顯存在差異性，但已被全球科研人員證明是一種高效沉默B肝全病毒基因型的潛在治療方法。通過深入對RNA幹擾在HBV藥物開發的作用機制認識，我們也能夠發現RNAi與核苷酸逆轉錄酶抑制劑（恩替卡韋或替諾福韋）的開發原理截然不同，全球肝病學領域科研人員，通過以抑制B肝病毒生命周期更多不同步驟，來達到更理想的終點（2020年8月4日 Viruses）。