「胡,starbase是幹嘛的?」
「不就是預測miRNA與mRNA結合的資料庫嘛。」
「還有呢?」
「。。。。。。」
相信大家都聽說過starbase,很火,是的,連實驗外包公司都用它,能不火嘛!但是你對它真正了解多少呢?好啦,下面我們就來系統的介紹一下它。首先,官網地址要知道:http://starbase.sysu.edu.cn/
starbase是從高通量的CLIP-Seq實驗數據和降解組實驗數據中搜尋micorRNA靶標,提供了各式各樣的可視化界面去探討microRNA的靶標,包含了miRNA-mRNA、miRNA-lncRNA、miRNA-circRNA、miRNA-ceRNA和RNA-protein等的調控關係。總而言之,該資料庫從多維測序數據中識別出超過110萬個miRNA-ncRNA,250萬個miRNA-mRNA,210萬個RBP-RNA和150萬個RNA-RNA相互作用,它還提供了進行miRNA,lncRNA,假基因和mRNA的存活和差異表達分析的平臺。
根據官網地址,打開後主頁面如下:
根據其菜單欄模塊多少就能知道該資料庫內容極其豐富,下面小編就幾個常用的模塊來簡單介紹一下該資料庫的用法。
1. miRNA-Target
預測miRNA的靶基因。該模塊提供miRNA-mRNA、miRNA-lncRNA、miRNA-pseudogene、miRNA-circRNA和miRNA-sncRNA的相互作用網絡,這裡我們以miRNA-mRNA為例,展示如何根據特定的miRNA預測與其結合的mRNA,具體操作如下圖所示。
以hsa-let-7a-5p為例,通過左側面板進行具體設置。比如我們搜索人體內該miRNA的結合靶標時,進行如下設置即可。其中mammal代表哺乳動物,CLIP Data可以調整支持CLIP-seq實驗的次數以控制預測的嚴格性,Program Number選擇實驗數目,Predicted Program可以選擇使用哪些預測軟體來進行預測:
提交後結果如下:
點擊上圖基因NAP1L1所在行TargetScan列的,可以看到TargetScan預測的hsa-let-7a-5p與基因NAP1L1的具體結合位點。
點擊AgoExpNum處的52,可以看到測序類型、來源及參考等信息。
接下來我們可以點擊基因GNG5所在行的Pan-Cancer所在列的數字6
可以發現has-let-7a-5p與靶基因GNG5在6個腫瘤疾病中呈負相關性。
當我們想知道某一miRNA是否和某一具體mRNA是否有結合時,可以同時輸入miRNA和mRNA信息,如下圖,提交即可
下圖可以看到hsa-let-7a-5p與ACTB存在結合位點,但只有軟體microT證實。
當然,我們也可以根據某一特定mRNA來預測與其結合的miRNA,如圖所示,輸入過程同上,只是microRNA一欄空置不要輸入,結果如下,紅色方框即為與目的基因ACTB結合的所有miRNA。
2. Degradome-RNA
提供了一種分析RNA降解模式的綜合方法,針對miRNA介導的降解片段進行測序,篩選鑑定miRNA調控的靶基因,準確性更高。包含2個子模塊,即miRNA-mRNA和miRNA-ncRNA。這裡我們以miRNA-mRNA為例,分析miRNA定向切割的靶標。
具體操作方法如1,這裡我們以hsa-let-7a-2-3p為例,進行後續分析。提交後結果如下:
以基因PTMA所在行為例,點擊GeneID列的 ENSG00000187514,可以連結至基因PTMA的ENSEMBL資料庫。點擊CleaveEventNum列的數字2,可以顯示hsa-let-7a-2-3p切割PTMA的2個具體位點。
點擊CleaveExpNum的數字4,發現有4項證據證明hsa-let-7a-2-3p在chr2:232576622-232576622[+]處切割,圖中可以看到該結論在同一項研究內的HeLa細胞和K562細胞均被證實。
3. RNA-RNA
可全面預測候選ncRNA及其靶標之間的RNA-RNA相互作用。主要包括sncRNA-RNA 、lncRNA-RNA、mRNA-RNA、pseudogene-RNA及miRNA-RNA5個模塊。具體方法如1,按需輸入即可。
4. ceRNA-Network
該模塊提供3個子模塊,即mRNA-ceRNA、lncRNA-ceRNA和pseudogene-ceRNA。分別用於通過競爭性結合microRNA來可視化mRNA,lncRNA,轉錄的假基因及其親本基因之間的串擾。
5. RBP-Target
該模塊為目前可用的各種細胞類型提供了最完整的RBP-ncRNA相互作用。該模塊有5個子模塊,包括RBP-mRNA、RBP-lncRNA、RBP-pseudogene、RBP-circRNA 及RBP-sncRNA。結合shRNA篩選數據和確切的RBP-RNA相互作用,我們系統地探索了K562和HepG2細胞系中敲除RBP時RBP靶標的反應。以RBP-mRNA相互作用為例,探索一下有多少RBP可以調節mRNA-TP53。具體操作同上,均是點點點,只不過我們這裡「RBP」 參數下輸入「all」,「target」參數下輸入「TP53」,然後提交即可。具體結果解釋同上。
好啦,今天就先介紹到這裡。其實這個資料庫整體操作起來並不難,當我們不明白具體什麼意思時盡可以點點點,放心,電腦不會壞。