經常提質粒嗎？
熟練之後，提質粒乃至質粒構建都很簡單。
但如果真問起一些質粒的細節，可能很多人回答不了。
不信隨我看看。
質粒基本組成要素
複製起始位點Ori即控制複製起始的位點
抗生素 抗性基因 ——如常見的Amp+、Kan+，可便於加以檢測或者篩選
多克隆位點MCS——用於克隆攜帶外源基因片段
P/E——啟動子/增強子
Terms——終止信號
poly（A）信號——可起到穩定mRNA作用
如何閱讀質粒圖譜
第一步：首先看Ori的類型，了解質粒的類型（原核/真核/穿梭質粒）
第二步：再看篩選標記，如抗性，決定使用什麼篩選標記
Ampr水解β－內醯胺環，解除氨苄的毒性；
tetr可以阻止四環素進入細胞；
camr生成氯黴素羥乙醯基衍生物，使之失去毒性；
neor（kanr）氨基糖苷磷酸轉移酶 使G418（卡那黴素衍生物）失活；
hygr使潮黴素β失活。
第三步：看多克隆位點（MCS）
它具有多個限制酶的單一切點。便於外源基因的插入。（如果在這些位點外有外源基因的插入，會導致某種標誌基因的失活。）
第四步：是否含有表達系統元件，即啟動子－核糖體結合位點－克隆位點－轉錄終止信號。這是用來區別克隆載體與表達載體。
不同的啟動子適用於不同的宿主，選擇載體主要依據啟動子類型判斷是否適用於目的工具宿主。
如何選擇載體
選擇載體主要依據構建的目的，同時要考慮載體中應有合適的限制酶切位點。
如果構建的目的是要在指定宿主中表達一個特定的基因，則要選擇與宿主相匹配的表達載體。如要做基因的原核表達，則需要選擇原核表達載體。
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