線粒體是存在於所有真核細胞中的獨特的膜結合細胞器，作為ATP生產和細胞能量供應的主要場所，線粒體的獨特方面（包括稱為mDNA的單獨遺傳物質，其自身的蛋白質合成機制以及嚴格調節的膜電位梯度）使其成為重要的研究課題，另外，隨著衰老過程和更多其他人類疾病方面的研究發現，線粒體的作用比以往更加值得我們研究。
這期主要給大家帶來線粒體螢光探針（活細胞和固定細胞），線粒體膜電位探針，ATP檢測，線粒體自噬檢測，線粒體通透性轉換孔（MPTP）檢測相關工具。
一．細胞線粒體染料
1. 用於標記活細胞線粒體的可用MitoLite染料
線粒體藍色螢光染料MitoLite Blue FX490，貨號：AAT-22674
2. CytoFix紅色固定線粒體染色
CytoFixRed線粒體染色劑增強的細胞維持能力可使線粒體局部螢光得到保持，即使固定過程中線粒體膜電位喪失後也可以保留。該染料產生的螢光信號在溶酶體中得到很好的保留，使其便於長期跟蹤線粒體。CytoFix紅色線粒體染色劑可與GFP表達的細胞，其他螢光偶聯物和其他細胞器染色劑一起使用，進行多色分析。它既可用於懸浮細胞，也可用於貼壁細胞，並易於適應各種螢光平臺。
CytoFix紅色線粒體染色的特徵：
線粒體染色效率高
固定後可長期保留
操作時間短，標記步驟簡便
在96孔黑邊框透明底板上用CytoFixMitoRed染色的HeLa細胞的螢光圖像。
CytoFixRed—適用於固定細胞線粒體染色
CytoFix紅色線粒體染色，貨號：AAT-23200
二．線粒體膜電位：
電子傳輸鏈產生的線粒體膜電位（ΔΨm）是健康的線粒體功能所必需的關鍵參數。與質子梯度一起，它產生了線粒體ATP合成背後的驅動力。它通過選擇性消除功能異常的線粒體在線粒體穩態中發揮關鍵作用，並且是線粒體鈣穩態的重要組成部分。
凋亡早期的顯著特徵是正常線粒體功能的破壞， 線粒體膜的破壞和氧化還原電位可能會引起細胞活力的不必要損失，並成為導致各種疾病的原因。我們提供各種各樣的螢光探針，用於分析活細胞中正常線粒體活性的各個方面，包括活性氧（ROS）產生，線粒體膜電位和鈣通量。
1. JC-10雙發射膜電位（ΔΨm)探針
JC-10是JC-1的衍生物，是電位依賴性探針，用於通過流式細胞儀，螢光顯微鏡和基於微孔板的螢光測定法確定ΔΨm。在健康細胞中，JC-10選擇性地聚集在線粒體中，生成橙色的JC聚集體，該聚集體在590 nm處顯示出較寬的激發光譜和zui大發射。然而，在具有低ΔΨm的凋亡和壞死細胞中，JC-10從線粒體中擴散出來，並生成JC-10單體，導致向綠色發射（525 nm）處轉移。JC-10允許以定性和定量方式來可視化ΔΨm的變化，分別考慮從橙色到綠色的螢光發射和螢光強度比的變化。它已成功用作多種樣本類型的ΔΨm指示劑，包括肌細胞，神經元等。
JC-10的特點：
易於使用：稀釋到水性緩衝液中時，JC-10不會沉澱，從而消除了偽影。
堅固：JC-10由於在水性介質中的溶解度提高和靈敏度更高，因此測定偏差較小。
增強的信號：JC-10具有比JC-1高的信噪比。
增強的靈敏度：在所有測試的細胞系中，JC-10能夠比JC-1更好地檢測到ΔΨm損失的細微變化。
廣泛的應用：JC-10可用於原代大鼠肝細胞檢測
方便：JC-10與螢光酶標儀，細胞成像儀和流式細胞儀兼容。
用JC-10（貨號22204）和JC-1（貨號22200）在Jurkat細胞中測定了喜樹鹼誘導的線粒體膜電位變化。將Jurkat細胞用喜樹鹼（10 M）處理4小時後，將JC-1和JC-10染料加載溶液添加到孔中，並孵育30分鐘。使用NOVOstar酶標儀（BMG Labtech）在Ex / Em = 490/525 nm和540/590 nm下測量了JC-1和JC-10的J聚集體和單體形式的螢光強度。
JC-10和JC-1雙發射線粒體膜電位探針
線粒體膜電位螢光探針JC-10，卓越的JC-1替代物，貨號：AAT-22204
2. 線粒體選擇性羅丹明酯
細胞滲透性陽離子羅丹明，例如TMRE和TMRM，很容易被活性線粒體隔離，通常用於標記活細胞中的線粒體。像JC-10一樣，線粒體中TMRE和TMRM的吸收是由線粒體膜電位驅動的。兩種染料都已成功用於動態和原位定量檢測，用於篩選線粒體通透性轉換孔的抑制劑，評估活細胞中線粒體的功能，並可用於區分活的和死的細胞群，這些電位染料表現出zui小的自發淬滅性，低細胞毒性和合理的光穩定性，它們的螢光強度可以用流式細胞儀或螢光顯微鏡進行測量。與TMRM相比，TMRE的疏水性略強。
用於測量線粒體膜電位的電位染料
線粒體選擇性羅丹明酯，貨號：AAT-22220
三．ATP測定：
三磷酸腺苷（ATP）是一種複雜的有機分子，參與細胞的能量生成，代謝調節和細胞信號傳導。它作為主要能源存在於所有活生物體中，並在沒有活生物體的情況下迅速降解。因此，ATP測定是一種有用的工具，可用於各種研究應用程式中，以鑑定活生物體的存在。常見的應用包括細胞活力和細胞毒性，表面細菌的檢測，水中細菌的定量，培養中的體細胞以及食品質量和汙染測試。
我們的PhosphoWorks發光ATP分析提供了一種快速，簡單且均一的生物發光方法，可用於通過ATP檢測確定哺乳動物細胞的細胞活力，細胞毒性和增殖。
用於測量ATP活性，以及生成或消耗：
PhosphoWorksTM螢光ATP檢測試劑盒，貨號：AAT-21620
文章來源：每日生物評論
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