【乾貨分享】螢光素酶報告基因技術講座

2021-02-25 美侖生物

上圖. Firefly-Glo發光體系在光強、穩定性以及線性效果對比P進口品牌。(A) 螢光素酶濃度-光強-時間標曲三維圖。在一定濃度範圍內，標準曲線統計顯示為一個截面，說明meilunbio的Firefly-Glo發光體系在2h以內任一時刻的線性良好。(B) meilunbio的Firefly-Glo螢光素酶報告基因檢測試劑盒對比P 進口公司最新版本，在絕對光強和穩定性方面非常接近。(C) 單一時刻光強-Firefly螢光素酶濃度標曲線性良好（R2=0.9994）。

上圖.Firefly-Glo發光體系在不同培養基發光及半衰期驗證。美侖Firefly-Glo發光體系在常用培養基如：DMEM、RPMI1640、DMEM/F12、MEMα、F12等都可以正常發光；螢光半衰期在100-120min 左右，與P進口品牌官方公布的數據相當（此處未完全展示，可參考P公司官方網頁）。

上圖. 293T細胞中TNFα 濃度梯度誘導NF-κB通路檢測效果美侖對比P進口品牌。(A) 歸一化處理後，由圖可知TNFα濃度梯度在2h以內各個時刻均保持著相對一致的誘導關係；並且隨著時間進行，這種誘導關係並無明顯變化。(B) 單一時刻TNFα 濃度梯度誘導NF-κB通路效果美侖對比P進口品牌，結果無顯著性差異。

上圖. (A)細胞濃度梯度光強穩定性和(B)細胞濃度-光強標曲示例。在細胞培養基環境中，原位追蹤檢測Firefly Luciferase發光情況。由圖可知，螢光穩定性和絕對光強與P進口品牌差異不大；而且，單一時刻光強-細胞數標曲線性良好（R2=0.9993）。

上圖. 酚紅濃度-Firefly Glo 螢光穩定性驗證。配製含有濃度梯度的PBS溶液，各自加入等量的螢火蟲螢光素酶並驗證Firefly-Glo 的發光穩定性。由圖可知，meilunbio® Firefly-Glo 對比P進口品牌具有更好的酚紅耐受能力。

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