DMEM基礎培養基應用方法及操作注意事項

2020-12-03 中國教育裝備採購網

　　DMEM 基礎培養基是最常用的一種Basal Medium Eagle(BME)基礎培養基的改良型，含較豐富的營養成份，包括四倍濃度的胺基酸和維生素，同時含有甘氨酸，絲氨酸及硝酸亞鐵。最初的配方主要用於鼠胚胎細胞的培養，目前用於多種動物細胞的生長。高壓滅菌型是該培養基的熱穩定配方，可保證其營養成份在高壓高熱中不受影響。該配方中不含L-穀氨醯胺及碳酸氫鈉，需在高溫滅菌後添加。

　　DMEM 基礎培養基，低糖，含L-穀氨醯胺，不含碳酸氫鈉

　　DMEM 基礎培養基，低糖，不含L-穀氨醯胺，不含碳酸氫鈉

　　DMEM 基礎培養基，高糖，含L-穀氨醯胺，不含碳酸氫鈉

　　DMEM 基礎培養基，高糖，不含L-穀氨醯胺，不含碳酸氫鈉

　　DMEM 基礎培養基，高糖，含丙酮酸鈉及L-穀氨醯胺，不含碳酸氫鈉

　　DMEM 基礎培養基，高糖，含HEPES 及L-穀氨醯胺，不含碳酸氫鈉

　　DMEM 基礎培養基，高壓滅菌型，不含L-穀氨醯胺，不含碳酸氫鈉

　　DMEM 基礎培養基，低糖，含丙酮酸鈉及L-穀氨醯胺，不含碳酸氫鈉

　　產品規格

　　乾粉(1L, 10L 及100L); 液體(500 ml)

　　配製方法

　　乾粉培養基的過濾配製

　　1 將1 升量的乾粉在950ml 細胞培養級純淨水中攪拌完全溶解

　　2 加入2 克碳酸氫鈉，繼續攪拌至完全溶解

　　3 用1N 鹽酸或氫氧化鈉調整到要求的pH，並將溶液體積調至

　　1000ml

　　4 在超淨臺內用0.22um 濾膜負壓過濾

　　5 將培養基在2~8℃避光保存

　　高壓滅菌型的配製

　　1 將1 升量的高壓滅菌型乾粉在900ml 細胞培養級純淨水中完全溶解

　　2 將pH 調至4.0 並將溶液體積調至960ml

　　3 在121℃，15psi 高壓消毒5 分鐘

　　4 將培養基迅速取出，避免過久加熱引起成份分解或液體蒸發減少

　　5 待培養基冷卻至室溫後，無菌操作加入29.3ml 的無菌7.5%碳酸氫鈉溶液，及10ml 的無菌200mM L-穀氨醯胺

　　6 如有必要，用無菌的1N 鹽酸或氫氧化鈉調整pH

　　7 將培養基在2~8℃避光保存

　　自備材料

　　細胞培養級或注射級純水

　　7.5%碳酸氫鈉溶液(無菌)

　　200mM 穀氨醯胺溶液(無菌)

　　1 N 鹽酸溶液(無菌)

　　1 N 氫氧化鈉溶液(無菌)

　　質檢指標

　　形狀：淡黃色均勻粉末(乾粉)，澄清透明(液體)

　　溶解：乾粉按要求溶解後澄清透明

　　pH 值：(加碳酸氫鈉前)4.4-5.0(加碳酸氫鈉後)(液體)7.4-8.0

　　滲透壓：(加碳酸氫鈉前)230-270(加碳酸氫鈉後)280-320 (液體)

　　菌落：每克小於100cfu (乾粉)，無菌(液體)

　　細胞生長：正常(乾粉及液體)

　　儲存及注意事項

　　1 所有的液體及乾粉培養基應在2~8℃避光保存，並在有效期內使用。

　　2 不建議配製培養基濃縮液，部分胺基酸或鹽會在高濃度下不溶解或沉澱。

　　3 液體培養基的pH 儲存時會因為二氧化碳的逃逸而發生改變，建議儘量減少開瓶次數。

　　4 滅菌後的液體培養基添加物應無菌並在無菌操作下添加。

　　5 乾粉培養基吸溼性強，極易吸水變質。粉包打開後應全部使用或剩餘捨棄。

　　注意：

　　本產品僅限於研發生產使用。

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