沙氏葡萄糖瓊脂培養基的用途與應用

2020-10-21 百歐博偉生物

一、背景

沙氏葡萄糖瓊脂培養基又名SDA培養基或者沙氏培養基，英文名字是Sabouraud Dextrose Agar，是通用型的真菌培養基，屬於營養培養基中的一種，沙氏葡萄糖瓊脂培養基屬於一種改性的沙氏瓊脂，主要用來培養和區分真菌，並且這種培養基一般會和抗生素一起使用，通過使用沙氏葡萄糖瓊脂培養基可以將真菌和細菌材料中的病原體真菌分離出來。沙氏葡萄糖瓊脂培養基主要就是用來鑑別和培養真菌，尤其是那些皮膚真菌。有些也會用於醫藥工業潔淨區沉降菌和浮遊菌中真菌的鑑定。



沙氏葡萄糖瓊脂培養基含糖量比較高，並且其PH值比較低，這種特性非常有利於真菌的生長，並且可以有效的抑制細菌的生長。真菌學蛋白腖提供氮源、硫源和礦物質及維生素。通過沙氏葡萄糖瓊脂培養基培養生長出的真菌可以保留其典型的形態學特徵，也因此可以通過形態學特徵的不同對菌種進行鑑定。

二、沙氏葡萄糖瓊脂培養基的用途

1、沙氏葡萄糖瓊脂培養基可以用來培養和鑑別皮膚真菌和其他真菌，並且也可以將細菌中的真菌進行分離。

2、沙氏葡萄糖瓊脂培養基還可以檢測化妝品中的微生物的檢測。

3、沙氏葡萄糖瓊脂培養基可以用來測定視頻中真菌的數量。

4、沙氏葡萄糖瓊脂培養基可以幫助臨床上對於酵母和真菌感染的甄別。

5、沙氏葡萄糖瓊脂培養基可以鑑定是哪些真菌引起的皮膚感染。

6、沙氏葡萄糖瓊脂培養基還可以從被真菌和細菌汙染的樣品中將致病性真菌分離出來，沙氏葡萄糖瓊脂也可以作為Pagano-Levin培養基的基礎用於分離白色念珠菌,每升培養基加0.1g紅四氮唑。向培養基中加入上述抗生素可以抑制細菌和非致病性真菌。25°C培養3天後，白色念珠菌菌落未被染色或淺粉色，其它念珠菌和其它真菌則形成深粉色或紅色菌落。

三、應用

用於ZafA基因沉默對煙麴黴菌生長、毒力的影響研究：

探討ZafA基因在煙麴黴菌生長、毒力中的重要性,為肺麴黴病新的治療方法提供理論依據。

方法：

用化學合成法合成siRNA,通過電轉染技術將siRNA轉入煙麴黴菌孢子,提取總mRNA,進行RT-PCR,觀察ZafA基因mRNA表達變化。將經過不同處理的煙麴黴菌孢子通過鼻內接種於麻醉後的免疫力低下小鼠,通過G試驗、觀察小鼠死亡率、肺部病理改變等,了解麴黴菌在體內的生長、毒力情況,並將肺組織於沙氏瓊脂培養基中培養,確定其感染的特異性及真菌的生長情況。

結果：

1、電轉染後,siRNA幹預組煙麴黴菌ZafA基因mRNA表達水平與18srRNA內參的比值為0.533±0.026,較錯義鏈對照組1.098±0.027和PBS對照組1.082±0.012明顯降低(P＜0.05)；

2、轉染後siRNA幹預組煙麴黴菌在沙氏瓊脂培養基上生長較錯義鏈對照組及PBS對照組明顯受限(P<0.05)；

3、小鼠免疫指標:IgG造模前後分別為0.69±0.04、0.33±0.07;IgA 0.71±0.05、0.51±0.06;IgM 1.41±0.08、1.04±0.10(P＜0.05);(4)G試驗檢測(1-3)-β-D葡聚糖的含量,ZafA基因siRNA幹預組較其餘兩對照組明顯降低(P＜0.05)。

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