培養基及無菌水的製備

2020-12-03 食品檢驗員培訓網

一、基本原理

培養基的種類很多,不同微生物所需要的培養基不同.培養基製成後的物理狀態可分為液體、固體、半固體三種類型.目前所用培養基均為已配製好的生物試劑和紙片.

二、器材

三角瓶、試管、燒杯、玻棒、天平、搪瓷杯、量筒、鋁箔紙、角匙、杜氏小管、矽膠塞、電爐

三、培養基的種類

營養瓊脂培養基、乳糖膽鹽發酵培養基、乳糖發酵培養基、伊紅美蘭瓊脂培養基、馬鈴薯-葡萄糖瓊脂培養基（附加抗菌素）、平板計數瓊脂、月桂基硫酸鹽胰蛋白凍肉湯、煌綠乳糖膽鹽肉湯、EC肉湯、高鹽察氏瓊脂、三糖鐵瓊脂等

四、方法步驟

1、培養基的製備：

（1）稱量：根據培養基的配方,稱取適量藥品於搪瓷杯中;

（2）溶解：用量筒量取所需水量,置電爐上加熱,一邊攪拌,至完全溶解,加熱至沸騰,拔掉電源,待冷卻;

（3）分裝：根據不同需要,立即趁熱分裝入三角瓶或試管中,分裝三角瓶以不超過三角瓶一半為宜,分裝試管一般為管長的1/5（需根據試管的大小而定）.液體培養基如乳糖膽鹽發酵培養基約分裝10毫升左右.

（4）塞矽膠塞：裝好培養基的試管應塞上矽膠塞,鬆緊合適,緊貼管壁,不留縫隙,約1/2塞入內,這樣即可過濾空氣,避免雜菌侵入,又可減緩培養基水分的蒸發.

（5）包裝：三角瓶棉塞頭部應用錫箔紙包紮,試管集中於試管簍.

2、無菌水的製備：

（1）用10ml移液管量取9.2ml蒸餾水（稀釋水）裝入試管中.

（2）用100ml量筒量取95ml蒸餾水（稀釋水）裝入150ml的三角瓶中.可置少許玻璃珠於三角瓶內,防止暴沸.

（3）量取240ml蒸餾水（稀釋水）於250ml的三角瓶中,塞上瓶塞用牛皮紙包紮好,高壓滅菌備用.

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  • 培養基的配製
    2、水分：製備培養基常用蒸餾水（因蒸餾水中不含雜質），也可用自來水、井水等，但需先經煮沸，使部分鹽類沉澱，再經過濾方可使用。3、凝固物質：配製固體培養基的凝固物質有瓊脂、明膠和卵白蛋白及血清等。瓊脂是從石花菜海藻中提取的膠體物質，是應用最廣的凝固劑。其化學成分主要是多糖，加瓊脂製成的培養基在98～100℃下溶化，於45℃以下凝固。但多次反覆溶化，其凝固性降低。
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    二.平板培養基將殺菌瓊脂培養液倒人培養皿與三角形燒瓶中，等到它們凝結以後，就可以製成新的培養基，我們把這個培養基叫做平板培養基。平板電腦培養基主要是用以菌苗分離出來及食用菌科學研究。平板培養基的製備是微生物學工作中的一項基本操作技術。
  • 細胞培養基的使用方法
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  • 食用菌培養基的配製
    一合成培養基：用化學藥物配製而成的培養基，一般見於研究性的培養基。如實驗某種食用菌能利用哪種碳源，就選用各種有關的化學藥材，分別製成各種培養基，觀察實驗菌種的生長情況。半合成培養基：以天然材料和化學藥物混合配製而成的培養基。②按菌種擴大形式分類母種培養基：即常用的斜面培養基。廣州等地介紹用枝條代替斜面培養基，這種枝條培養基也屬母種培養基。
  • 【實驗室】常用的微生物培養基及配製方法
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    5 步驟 　　5.1 培養基的製備 　　5.1.1 稱量藥品 　　根據培養基配方依次準確稱取各種藥品，放入適當大小的燒杯中，瓊脂不要加入。蛋白腖極易吸潮，故稱量時要迅速。 　　5.1.2 溶解 　　用量筒取一定量(約佔總量的1/2)蒸餾水倒入燒杯中，在放有石棉網的電爐上小火加熱，並用玻棒攪拌，以防液體溢出。
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