親和層析原理(Affinity Chromatography)

2020-12-06 中國教育裝備採購網

　　親和層析法是近年來廣為重視並得到迅速發展的提純、分離方法之一。許多物質都具有和某化合物發生特異性可逆結合的特性。例如：酶與輔酶或酶與底物(產物或競爭性抑制劑等)，抗原與抗體，凝集素與受體，維生素與結合蛋白，凝集素與多糖(或糖蛋白、細胞表面受體)，核酸與互補鏈(或組蛋白、核酸多聚酶、結合蛋白)以及細胞與細胞表面特異蛋白(或凝集素)等。親和層析法就是利用化學方法將可與待分離物質可逆性特異結合的化合物(稱配體)連接到某種固相載體上，並將載有配體的固相載體裝柱，當待提純的生物大分子通過此層析柱時，此生物大分子便與載體上的配體特異的結合而留在柱上，其他物質則被衝洗出去。然後再用適當方法使這種生物大分子從配體上分離並洗脫下來，從而達到分離提純的目的(圖3-10)。上海創賽科技提供9008-97-3，植物血球凝集素Phytohemagglutinin BR，商品編號：D23-RD1047-1g，價格560元。

　　

　　親和層析由於是配體與待分離物質進行特異性結合，所以分離提純的效率極高，可提高純度幾千倍，是當前最為理想的提純和濃縮方法。親和層析的配體與待分離物質特異性結合性質還可用來從變性的樣品中提取出其中未變性的部分，從大量汙染的物質中提純小量所需成分，親和層析還可用來從極度稀薄的液體中濃縮其溶質。上海創賽科技提供葡聚糖凝膠G-50中顆粒，Sephadex G-50 medium，商品編號：B11000414-25g，價格504元。

　　親和層析所用的載體和凝膠過濾所要求的凝膠特性相同，即化學性質穩定，不帶電荷，吸附能力弱，網狀疏鬆，機械強度好，不易變形，能保障流速的物質。聚丙烯醯胺凝膠顆粒、葡聚糖凝膠顆粒以及瓊脂糖凝膠顆粒都可用，其中以瓊脂糖凝膠(Sepharose4B)型應用最廣泛。親和層析的關鍵是設法選擇合適的配體，並將此配體與載體以化學方法連接起來，形成穩定的共價鍵，這需要在實際工作中根據需要加以選擇和試驗。上海創賽科技提供61970-08-9，瓊脂糖凝膠 CL-4B，BR ，商品編號：D16-1027316-100ml，價格460元。

　　

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