到底蛋白定量產品應該如何選擇合適的呢？接下來為大家揭曉：
蛋白定量目前最受歡迎的要數BCA法和Bradford法了：
BCA法：可耐受去汙劑：SDS、TritonX-100，Tween-20等，但不耐還原劑，若樣本含有去汙劑不含還原劑，可使用該法（推KTD3001）
Bradford法：可耐受耐受大部分樣品中的化學物質，不耐高濃度去汙劑，若樣本含有高濃度的去汙劑，可使用該法（推KTD3002）
蛋白定量之後，做蛋白分析自然是廣大WB實驗者最關心的問題了。
Flag標籤小鼠單克隆抗體，A02010
GFP標籤小鼠單克隆抗體，A02020
GST標籤小鼠單克隆抗體，A02030
HA標籤小鼠單克隆抗體，A02040
第1步是上樣了，上樣過程中，除了大家不能忘記的樣本順序之外，最重要的要數蛋白Marker了，為了能清楚地指示蛋白分子量大小，有的資深WB操作者會選擇點2-3個預染蛋白孔，避免實驗的不確定性，提高指示的清晰度。這裡為大家推薦兩款彩色預染蛋白marker：
從實驗效果圖來看，BMM3001 和BMM3002 marker的色彩鮮明，清晰度和對比度是非常高的。指示結果的參考價值都是非常高的。
經過緊張漫長的跑膠轉膜步驟之後，終於進入了WB的免疫步驟階段。這時如何正確的選擇內參抗體，將成為WB實驗輔助的重要步驟，下面乾貨又來了——三大正確內參選擇的法寶：
1. 樣本種屬來源：哺乳動物的組織或者細胞樣本，通常選擇β-actin、β-tubulin、GAPDH等，植物實驗樣本選用plant actin、Rubisco等
2. 蛋白分子量：應該考慮目的蛋白分子量的大小。通常應該保證目的蛋白與內參蛋白分子量相差5KD以上；對於超過100 kDa的高分子量蛋白，推薦使用Vinculin粘著斑蛋白作為內參抗體。
3. 蛋白表達部位：根據蛋白表達位置的不同可以選擇更加合適的抗體。常用的廣泛性的β-actin、β-tubulin、GAPDH；檢測細胞核Lamin A、Histone H3、PCNA，檢測細胞膜Na,K ATPase等等。
除了內參抗體之外，靶蛋白抗體的選取才是WB實驗的點睛之筆，說到這裡你可能會考慮：如何才能選到特異性強，靈敏度高，文獻支持多的抗體呢？試一試Abbkine的臻品一抗吧，該抗體經過了Abbkine對抗體功能性質進行精心試驗，可以試試。
另外，如果樣本是帶有蛋白標籤的重組蛋白檢測也能提供對應的標籤抗體及其直標抗體。
實驗的最後，當然是顯色液的使用了，Abbkine ECL顯色液的靈敏度是非常可觀的。SuperLumia高敏以及超敏ECL產品具有極高的靈敏度, 對樣品和抗體的需求量更低；發光信號強烈且持續時間長。
文章來源：每日生物評論
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