miR-148a-5p參與了高蛋氨酸飲食誘導ApoE-/-小鼠的肝細胞凋亡

2020-10-20 中國組織工程研究雜誌

文題釋義：

凋亡：是一種程序性細胞死亡，其特徵是進行性的核和細胞質收縮、染色質濃縮和凋亡小體脫落。凋亡由稱為半胱天冬酶的特定類型的半胱氨酸蛋白酶執行，一旦激活，就可以裂解細胞底物並導致細胞死亡。最常見的凋亡指標為抑制凋亡基因Bcl-2和促進凋亡基因Bax，Bcl-2增高，細胞凋亡減少；Bax增高，細胞凋亡增加。

微小RNA(miRNA)：是一組內源性非編碼小RNA，在動物、植物、病毒和其他生物中普遍存在，可調節將近60%的基因表達，這些基因負責細胞的增殖、分化、凋亡和其他生理過程。miRNA可以在多種疾病中異常表達，並對這些疾病的診斷和預後評估起重要作用。

背景：高蛋氨酸飲食可以導致ApoE-/-小鼠發生肝損傷，微小RNA(miRNA)參與細胞存活、分化和細胞凋亡等各種細胞過程，具有重要意義。

目的：探討miR-148a-5p在高蛋氨酸飲食誘導ApoE-/-小鼠肝細胞凋亡中的作用。

方法：12隻ApoE-/-小鼠隨機分為2組，每組6隻，ApoE-/-對照組為普通飲食，ApoE-/-高蛋氨酸組為高蛋氨酸飲食。蘇木精-伊紅染色觀察2組肝組織形態學變化；TUNEL染色觀察肝細胞的凋亡情況；Western blot測定Bax、Bcl-2的表達改變；螢光定量PCR檢測miR-148a-5p的表達；運用Target Scan靶基因預測軟體預測miR-148a-5p的靶基因；雙螢光素酶活性實驗明確其靶向關係。

結果與結論：①與對照組相比，ApoE-/-高蛋氨酸組肝臟組織肝小葉結構發生明顯紊亂，部分細胞呈胞漿疏鬆化變性，肝細胞凋亡增加，Bax的表達明顯上升且Bcl-2的表達顯著下降(P < 0.01)；②螢光定量PCR結果顯示，ApoE-/-高蛋氨酸組miR-148a-5p的表達增加(P < 0.05)；③靶基因預測軟體提示，Bcl-2為miR-148a-5p的潛在靶基因；④雙螢光素酶活性實驗確定了miR-148a-5p與Bcl-2的靶向關係(P < 0.05)；⑤肝細胞中過表達miR-148a-5p後Bax的表達顯著上升且Bcl-2的表達明顯下降(P < 0.01)；⑥提示在高蛋氨酸飲食誘導的ApoE-/-小鼠肝細胞中，miR-148a-5p通過負調控Bcl-2促進肝細胞凋亡，這可能是造成肝損傷的機制之一。

ORCID: 0000-0003-1524-1117(馬芳)

中國組織工程研究雜誌出版內容重點：組織構建；骨細胞；軟骨細胞；細胞培養；成纖維細胞；血管內皮細胞；骨質疏鬆；組織工程

關鍵詞: miR-148a-5p, Bcl-2, 高蛋氨酸飲食, 肝細胞, 凋亡, 動物

文章來源：馬 芳, 張 輝, 李桂忠, 馬勝超, 沈江湧, 孫 磊, 郝銀菊, 馬生賢, 姜怡鄧. miR-148a-5p參與了高蛋氨酸飲食誘導ApoE-/-小鼠的肝細胞凋亡[J]. 中國組織工程研究, 2020, 24(35): 5632-5637.

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