微生物從一個斜面培養基接種至另一個斜面培養基上的方法，稱為斜面接種法。其方法步驟如下：
首先，點燃酒精燈。將菌種和斜面培養基的兩隻試管平行放在左手上，用拇指與其它四指夾住，並使中指位於兩試管之間，兩試管的管口齊平。
其次，用右手先將棉塞擰轉鬆動，並稍拉出一些，以利接種時拔出。
第三，右手持接種針，在酒精燈將針凡糠稚蘸烀鵓。針頭以上凡是接種時可能進入試管的部分，均應用火灼燒。
以下操作都要使試管口靠近火旁。
第四，用右手的小指與掌間拔掉左手上兩隻試管上的棉塞，同時迅速將試管口在酒精燈上燒灼3秒鐘左右，使管口上可能沾染的少量雜菌得以燒死。
第五，將燒過的接種針伸入菌種管內，先將針頭接觸培養基上沒有菌的部位（如斜面的頂端），使其冷卻，以免燙死被接種的菌體。然後輕輕接觸菌體，取出少許，慢慢將接種針抽出試管，接種針抽出時不要使針頭部分碰到管壁和管口，取出後，不可使針頭通過火焰，更不可觸及其它無關物品或桌面。
第六，迅速將接種針伸進另一試管，在培養基上輕輕劃線，接種菌體於其上。劃線時，要由底部起劃較密的平行線，一直劃到頂部，以充分利用斜面面積，但不要將培養基劃破。
第七，燒灼試管口，將棉塞塞上。塞棉塞時，不要移動試管迎接棉塞，以免試管在移動中納入可能含菌的空氣。
第八，將針頭在火焰上燒灼滅菌。放回原處後，騰出手將棉塞塞緊。