生物膜作為細胞與外界進行物質的屏障,是生命體第一條也是最後一條防線。生物膜會以選擇透過性的方式,對所要進入細胞的物質進行篩選以及確定準入資格。
因此研究溶劑,尤其是用於皮膚護理過程中的生物膜滲透透過率,對於皮膚護理產品或者化妝品具有十分重要的意義。今天,程誠小編帶您了解一下一種關於生物膜滲透透過率的檢測方法。
本實驗用的是新鮮的血細胞。血細胞沒有細胞壁,當細胞內外滲透壓達到一定程度後,細胞為脹破,從而使溶液顏色變紅。
以鹽酸將血細胞溶液破壞,即細胞完全滲透為標準溶液並繪製標準曲線,檢測樣品對血細胞的溶出漲破後溶液的吸光度值,從而達到定量的目的。
1、標準血細胞預處理:取於0.9%生理鹽水浸泡下血細胞若干,用0.9%生理鹽水不斷清洗直到離心後上清液為無色,將洗好的血細胞用0.9%生理鹽水定容至100ml,備用。
2、標準曲線的配製:分別移取洗好的血細胞溶液0.1ml、0.5ml、1ml、4ml、8ml、10ml於25ml比色管中,於各管中分別加入0.1mol/L鹽酸溶液10ml,反應10min後用0.9%生理鹽水定容至刻度。暗處放置30min後離心得到上清液,于波長450nm下測定吸光度值並繪製標準曲線。(如下圖)
3、水樣血液溶出率的測定:以10ml血細胞溶液為標準試驗基準(100%),加入10ml樣品水於暗處放置40min後離心得到上清液,於450nm下測定吸光度值,代入標準曲線得到溶血率數值即為水分子的生物膜滲透通過率。
4、通過製作標準曲線,以及樣品吸光度值得測量,計算得出樣品對生物膜滲透率的結果數值。
程誠小編結語:本實驗,適用於化妝品尤其是保溼滋養型化妝品,對於人體體細胞滲透通過率的研究。在細胞對於人體對化妝品的吸收研究領域,提供一種解決方案。