滅菌處理牛心包製備脫細胞支架的內皮化

2020-09-16 中國組織工程研究雜誌

摘要：

文題釋義：

組織工程：主要研究種子細胞、生物材料、構建組織和器官4個方向，其核心是建立由細胞和生物材料構成的三維空間複合體，對病損組織進行形態、結構和功能的重建並達到永久性替代，具有良好的發展前景和廣闊的應用市場。

牛心包脫細胞支架：經化學和物理方法去除牛心包中的細胞，形成無免疫原性或低免疫原性材料，構建組織工程支架。

背景：組織工程學研究常用的動物組織不可避免地存在各種微生物附著，而無菌是組織工程材料臨床應用的一項基本要求。

目的：觀察體積分數75%乙醇滅菌對牛心包性能及生物相容性的影響。

方法：將牛心包組織分別用無菌PBS(對照組)、含1%抗生素(青黴素/鏈黴素/兩性黴素B溶液)的PBS、氯己定及體積分數75%乙醇進行滅菌處理。採用LB固體培養基評價4種方法的殺菌效果；採用VB染色評估4組處理對牛心包組織結構的影響；通過CCK-8實驗測定4種處理抽提液的細胞毒性。將體積分數75%乙醇滅菌處理的牛心包製作為脫細胞支架，與人臍靜脈內皮細胞共培養，觀察細胞的黏附與內皮化效果。

結果與結論：①體積分數75%乙醇和氯己定處理24 h的牛心包滿足完全滅菌的要求，1%抗生素處理組和對照組可見明顯菌落形成；②VB染色顯示，體積分數75%乙醇、氯己定和1%抗生素處理的牛心包膠原纖維呈波浪狀排列整齊，結構緊湊，彈性纖維含量較少但結構清晰；③體積分數75%乙醇滅菌處理的牛心包不影響L929細胞的增殖活性，培養1-3 d內的細胞存活率均在100%以上；氯己定滅菌處理的牛心包有很強的細胞毒性，導致細胞死亡；④人臍靜脈內皮細胞可在脫細胞支架表面正常生長與黏附；在20 d的種植期內，第8-12天脫細胞支架表面黏附的細胞最多；⑤結果說明，體積分數75%乙醇能夠有效消滅附著在牛心包上的所有微生物，不會影響牛心包的組織學完整性與生物相容性。

ORCID: 0000-0002-3448-8230(劉飛)

中國組織工程研究雜誌出版內容重點：生物材料；骨生物材料; 口腔生物材料; 納米材料; 緩釋材料; 材料相容性；組織工程

關鍵詞: 牛心包, 滅菌, 75%乙醇, 脫細胞支架, 組織工程, 內皮細胞化, 生物相容性, 細胞黏附

文章來源：劉 飛, 張冠鑫, 劉曉紅, 王立成, 徐志雲. 滅菌處理牛心包製備脫細胞支架的內皮化[J]. 中國組織工程研究, 2020, 24(28): 4562-4566.

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