如何高質量的完成斑馬魚體外受精?

2021-02-25 中國斑馬魚信息中心

中國斑馬魚信息中心 

常見的斑馬魚問題這裡都有答案，點上方藍字關注。

研究者A：這個品系只剩一條雄魚，已經18個月了，配魚總是不成功，怎麼讓它傳代呢？

研究者B：做組學，要2000枚同一個時間點的胚胎，怎麼辦？

那就試試「斑馬魚的體外受精」吧~

作為熱帶淡水魚類，斑馬魚的精子在相對高鹽度的環境下保持無受精活性狀態，在接觸淡水之後被激活，活力可維持1-2分鐘。這段時間是接觸卵子受精的最佳時間。因此體外受精技術是要先收集雄魚的精子收集到高鹽度溶液中，隨後再收集雌魚的卵子，最後將精子與卵子混合，加養殖水後激活，胚胎達到受精目的。

斑馬魚受精實驗分為以下幾個步驟。

 質量好的卵子表現為金黃色、粘稠、有光澤而結構完整。鬆散、蒼白、含有絮狀物等情況都是卵子質量不佳的表現。

► 一寸光陰一寸金

要用6-18個月齡的魚，幼年或者年老的魚都不合適。太小的魚容易死哦。


► 一日之計在於晨

在光周期開始後1-2小時為雌魚最佳狀態，之後卵的質量很快變差，所以體外受精一定要在早上進行。


► 脈脈不得語

實驗前一天，按照正常配魚的操作，將雌雄魚放置在配種缸內用隔板隔開，但是第二天不能抽開隔板。


► 且更從容等待他

按壓魚腹的操作，對魚傷害很大，不宜頻繁。同一條魚一個月以上操作一次，最少間隔半個月。不過一周後可用於自然配魚。

► 重要的事說三遍

Hanks Buffer的終溶液中的NaHCO3溶液，必須實驗當日早晨新鮮配置！當日早晨新鮮配置！當日早晨新鮮配置！

內容來源：中國斑馬魚信息中心

原文作者：李玲璐

授權聲明：原創內容，未經授權，請勿轉載

郵箱：zebrafish@ihb.ac.cn

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