補體結合試驗

補體結合試驗（CFT),是將免疫溶血作為指示系統，用以檢測另一反應系統中抗原或抗體的傳統方法。早在1906年 Wassermann 就將其應用於梅毒的診斷，即著名的華氏反應。這一經典方法經不斷改進，除了應用於傳染病診斷和流行病學調查以外，在一些自身抗體、腫瘤相關抗原以及HLA的檢測和分析中也有應用。該方法並非用於補體的檢測，而是利用補體的溶

細胞作用進行各種物理狀態的抗原抗體測定。

一、試驗原理

試驗有5種成分參與反應，分屬3個系統：

1.反應系統 已知抗原（或抗體）與待測抗體（或抗原）。

2.補體系統。

3. 指示系統 SRBC與相應溶血素，試驗時常將其預先結合，成為致敏綿羊紅細胞（sensi-tized sheep red blood cell,SRBCs).因免疫複合物對補體的活化無特異性，既能被反應系統激活，也能與指示系統結合。為避

免兩系統對一定量補體的競爭利用，反應分兩步進行。首先是反應系統與補體的作用；第二步是指示系統利用剩餘補體的反應。如反應系統中有抗體或抗原，則形成免疫複合物而固定和消耗補體，使後加入的SRBC-抗SRBS指示系統無多餘補體可利用，則無溶血反應發生；反之則溶血反應發生。因此，不溶血為補體結合試驗陽性，而溶血為試驗陰性。試驗中將反應系統的待測抗原（或抗體）作系列倍比稀釋可進行半定量測定。試驗中以50%不溶血作為判斷終點。

二、試驗方法

補體結合試驗的影響因素很多，應充分考慮包括待測抗原或抗體、反應容器在內的可能導致的抗補體現象。因此，從試驗前的製劑準備，到試驗過程中的對照設計，均應嚴格按要求進行。

（一）試劑的準備

1.抗原或抗體。

2.補體 在補體結合試驗中，採用豚鼠血清為補體。

3. 待測標本 採血並及時分離血清用於檢測或－20℃保存備用。試驗前，應先將血清56℃加熱30分鐘（或60℃3分鐘）以滅活補體。血清標本遇有抗補體現象時，可作下列處理：

①加熱滅活時提高12℃;②-20℃凍融後離心去沉澱；③以3mmol/L鹽酸處理；④加入少量補體後再行滅活；⑤以白陶土處理；⑥通入CO2;⑦以小白鼠肝粉處理；⑧用含10%新鮮雞蛋清的

生理鹽水稀釋血清。

（二）正式試驗 根據反應體積的大小，有小量法、微量法等，其中小量法較為常用。

                     

廣州鴻泉生物科技有限公司

地址（Add）：廣東省廣州市黃埔區峻文街9號合景天峻A12-13

電話（Tel）：020-28141975

網址（Web）：www.hqbio.cn

Q Q：2259815516 2944537878

郵箱：[e-mail]