培養細胞時你需要考慮支原體祛除劑的問題嗎

2020-08-27 締一0601

支原體汙染幾乎可影響所有細胞之生長參數，代謝及研究之任一數據。本文威正翔禹/締一生物為您分析細胞培養中什麼情況會考慮支原體汙染？

●培養基過早變色（變黃）；

●明顯的細胞生長率下降，生長緩慢，破碎細胞多；

●懸浮細胞特別容易成團；

●細胞形態發生改變，細胞間隙大；

● 頻繁改善培養環境才能傳代

綜上所述，您是不是已經對細胞培養中什麼情況會考慮支原體汙染，有所了解。如果還有其他疑問，請諮詢威正翔禹/締一生物資深專家。

威正翔禹生物（締一生物）科技有限公司十多年來（viansaga.com）始終專注於生物醫療、細胞培養、生物製藥等方面的技術支持及產品引進開發，是目前國內此領域最為專業的代理公司。主要代理產品澳洲進口Ausbian血清，支原體汙染防治，液體培養基，支原體祛除檢測劑，微生物培養基，細胞培養試劑，細胞分離液，動物細胞培養，DNA汙染防治，微生物工業品，疫苗檢測，生物科研試劑等。

支原體祛除劑-支原體汙染祛除劑（細胞培養用）--北京締一生物科技有限公司


  • 特點 1) 高效廣譜。Zell Shield®通過阻止支原體、真菌、黴菌、致命病菌增殖過程中DNA及蛋白的合成，有效抑制上述微生物的增殖。 2) 安全。無細胞毒性，專利複合支原體敏感抗生素，對大多數細胞株無毒。 3) 活性穩定。在細胞培養期間，Zell Shield®始終保持穩定的活性。 4) 使用方便。Zell Shield®為無菌溶液，可直接加入培養基使用。

  • 用法
  • 1) 在每次使用Zell Shield®之前，細胞傳代時，先使用廠家推薦的「懸浮衝洗法」處理好細胞，再使用加了Zell Shield®的培養基養細胞，能達到最佳的祛除支原體的效果。（「懸浮衝洗法」的詳細步驟，見下一頁）
  • 2) Zell Shield®常規為-18℃保存，建議使用前，先融化分裝，仍舊-18℃避光保存，使用時按需融化配置。避免反覆凍融。
  • 3) Zell Shield®按1:100濃度可直接加入培養基。例如：500ml培養基中添加5ml Zell Shield®，50mL/瓶的Zell Shield®可供5L培養基使用。
  • 廠家推薦的「懸浮衝洗法」（重要！）
  • 1) 據研究表明，約98％的支原體存在於細胞表面和細胞間隙。細胞傳代時，用乾淨的PBS反覆懸浮衝洗，就能把70%以上的支原體衝下來。
  • 2) 支原體直徑在180~350nm之間，遠遠小於細胞直徑。通過低速離心，很容易將細胞和支原體分離，棄上清即可祛除大部分支原體。


相關焦點

  • 同樣是細胞被支原體汙染，怎麼挑選支原體祛除劑
    養細胞時，除了支原體的檢測需要定期進行外，支原體的預防和祛除也是一個重要方面。它包括工作區域中的支原體的預防和祛除和培養箱水槽、水浴鍋中預防支原體的汙染。但一旦發生細胞培養時有支原體汙染，應如何挑選支原體祛除劑呢？這裡指的支原體祛除劑，是加入到細胞培養基中來發揮作用。德國MB有三種支原體祛除劑，都是加入到細胞培養基中使用。它包括：1.
  • 細胞培養中的支原體汙染問題
    支原體無細胞壁形態呈高度多形性．可為圓形、絲狀或梨形。支原體形態多變，在光境下不易看清部結構。電鏡下觀察支原體膜為三層結構．其中央有電幹密度大的密集顆粒群或絲狀的中心束。支原體多吸附或散在於細胞表面和細胞之間。橫斷面與細胞微絨毛相似，但微絨毛電子密度比支原體小，且中央無顆粒群或中央束。
  • 細胞培養：關於支原體汙染的危害
    支原體汙染普遍存在，據美國數據統計，細胞發生支原體汙染的機率在70%以上。同時，由於支原體直徑很小，僅在180nm~350nm之間，只有通過電鏡才能看到，不易被實驗者肉眼發覺，支原體汙染逐漸成為一個普遍存在的問題。本文締一生物為您分析細胞培養：關於支原體汙染的危害。
  • 祛除細胞培養中支原體的方法
    對於費力擴增的細胞（如已轉染，或經過體外刺激），如果細胞中發現有支原體汙染， 但此細胞又不願丟棄，希望繼續培養， 推薦使用MB公司生產的專利複合抗生素Zell Shield®（支原體祛除劑）。②在祛除細胞支原體汙染的過程中，需要環境、試劑及耗材確保潔淨，無新的支原體汙染加入。只要如法操作，在使用Zell Shield®四代後，細胞中的支原體即可祛除。特點1) 高效廣譜。Zell Shield®通過阻止支原體、真菌、黴菌、致命病菌增殖過程中DNA及蛋白的合成，有效抑制上述微生物的增殖。
  • 如何有效把支原體汙染趕出你的細胞?
    對於已耗費很多時間、大量擴增起來的細胞，或經過基因轉染、體外刺激等大量工作處理過的細胞，如果發現細胞被支原體汙染了，怎麼辦？本文締一生物為您分析如何有效把支原體汙染趕出你的細胞？ 由於前期工作量巨大，我們無法丟棄已有細胞。
  • 細胞總培養不好，你考慮過是支原體在作亂嗎
    實驗室裡總會有各式各樣的細胞需要培養，養細胞的會發生一些囧事：不做實驗的時候，細胞長得老快了；一到做實驗的時候，自家的細胞好像吃了安眠藥一樣，昏昏欲睡，死活長不起來。據報導，細胞培養中發生支原體汙染的機率較高，會達到70%左右，常規抗生素的使用對支原體幾乎無效。那麼，支原體汙染，對細胞培養有什麼危害呢？
  • 支原體汙染引發細胞應激狀態的一則報導
    支原體寄生於人、動物、植物、昆蟲細胞，為寄生生活。 支原體容易附著於細胞表面，與宿主細胞胞膜融合併交換成分。 支原體無論是對於科研或臨床用的培養細胞，還是對於工業上的生產細胞，都會產生嚴重的危害，例如導致細胞基因表達譜改變，但更多具體的改變並不清楚。
  • 細胞被支原體汙染的危害有多大
    在細胞培養過程中，支原體感染發生率達到63%，因而細胞培養過程中被支原體汙染是一個世界性的難題。當細胞（特別是傳代細胞）被支原體汙染後，細胞內的DNA、RNA及蛋白表達發生改變，而細胞的生長率一般並未發生顯著的影響，因而細胞被支原體汙染一般難以察覺。
  • 支原體對細胞的不良影響,你應該早知道
    近日《動物醫學進展》上有一篇文章《支原體對細胞培養汙染的研究概況》（動物醫學進展，2013,34：112-117）談到 「支原體汙染細胞的嚴重性」，裡面提到： 支原體最早發現於1898年，1956年Robinson等首次從細胞培養物中分離出支原體，之後國內外關於支原體汙染細胞的報導屢見不鮮。
  • 方法：珍貴細胞株被支原體汙染怎麼祛除？
    非常珍貴的細胞或不易獲得的生物樣本，被支原體汙染了，但需要挽救，不能丟棄， 例如：珍稀的細胞種子。可採用支原體徹底清除法。本文締一生物為您分析珍貴細胞株被支原體汙染怎麼祛除？若是可以培養超過一個月的細胞，則推薦使用德國MB公司的Mynox® Gold，直接殺除+鞏固防護兩步處理。若是無法長期培養的珍貴樣本或病毒收貨液，則推薦使用德國MB公司的Mynox® ，處理3小時，直接殺除。
  • 細胞培養中的支原體汙染的預防及處理
    與人類感染有關的主要是肺炎支原體和解脲脲原體。 支原體無細胞壁，多呈不規則球狀、長絲狀，可分枝，營寄生共生或腐生。一般侵害對象為動植物，可造成多種疾病。 細胞培養（特別是傳代細胞）被支原體汙染是個世界性問題。
  • 勿讓支原體成為培養細胞的殺手
    有時看到論文裡，會寫到在培養細胞時，一周檢測一次支原體，為什麼會出現這種情況呢？原來，支原體很容易成為培養細胞的殺手。支原體直徑約0.1-0.3µm，比細菌還小。它容易附著於細胞表面，與宿主細胞胞膜融合併交換成分。環境中很容易存在支原體，人體也容易攜帶支原體。
  • 實驗室細胞培養支原體汙染怎麼辦
    概述：在細胞培養過程中，支原體感染發生率達到63%，因而細胞培養過程中被支原體汙染是一個世界性的難題。細胞培養中常遇見的有細菌汙染、真菌汙染、支原體汙染、病毒汙染等。說起支原體汙染，估計細胞培養的同學就開始犯愁了，細胞培養的老手都知道，支原體汙染非常不易察覺。
  • 細胞培養的一些問題
    >細胞培養常見問題 1.幾乎所有的細胞對穀氨醯胺有較高的要求，細胞需要穀氨醯胺合成蛋白質，在缺少穀氨醯胺時，細胞生長不良而死亡。所以，各種培養液中都含有較大量的穀氨醯胺。穀氨醯胺在溶液中很不穩定，應置-20 ◦C冰凍保存，用前加入培養基中。加有穀氨醯胺的液體培養基4 ◦C 冰箱儲存兩周以上時，應重新加入原來量的穀氨醯胺。
  • 細胞培養支原體汙染的判斷和處理方法
    ，光鏡下難以看清它的形態結構，並對青黴素有抗藥性，是細胞培養界的隱性殺手。主要來源是血清，支原體汙染不能用肉眼或光學顯微鏡檢查細胞觀察出來，帶有一定的隱蔽性，易被人們忽視。當細胞被支原體汙染後，在光鏡下常可見到細胞核及胞漿內出現大小不等的顆粒或空泡，細胞營養液可能毫無變化，短期內細胞沒有明顯的病理變化，也可以因為傳代或換液而緩解。只有當汙染嚴重時才影響細胞增殖，使細胞脫落。支原體可以與宿主細胞形成一個共生關係，使汙染不斷擴大。
  • 支原體汙染的影響是什麼?如何應對呢?
    因此，被支原體汙染的細胞會持續受到影響，導致實驗數據不準確。支原體汙染不僅是細胞培養中需要克服的現象，而且是製藥、生物製品生產中需要加以避免的。支原體汙染的影響是什麼？細胞被支原體汙染，解決方案方法一：確認細胞已被支原體汙染，終止試驗，丟棄所有被汙染的細胞和耗材。重新復甦細胞，注意選用未被汙染的細胞株、血清和培養基，並規範操作。方法二：對於珍貴的，樣品不可再得的細胞，或價格昂貴的種子細胞，不但無法丟棄，而且作為種子細胞，還需要徹底根除支原體汙染。
  • 細胞培養出現支原體汙染的危害及檢驗方法
    支原體是目前已知一類能在無生命培養基上生長繁殖的最小的原核細胞型微生物。細胞培養（特別是傳代細胞）被支原體汙染是個世界性問題。國內外研究表明，95%以上是以下四種支原體：口腔支原體（M.orale）、精氨酸支原體（M.arginini）、豬鼻支原體（M.hyorhinis）和菜氏無膽甾原體（A.laidlawii），為牛源性。國外調查證明，大約有二十多種支原體能汙染細胞，有的細胞株可以同時汙染兩種以上的支原體。
  • 細胞培養中支原體檢測的重要性
    支原體是細胞外生存的最小微生物，是一類缺乏細胞壁的原核細胞型微生物，大小一般在0.2~0.5um之間，呈高度多形性，有球形、杆形、絲形、分枝狀等多種態。 1、支原體存在於我們周圍，他可能就如塵埃一樣存在於我們的環境中 2、可透過一般的濾膜，所以不要寄希望於過濾可以清楚支原體汙染的液體 支原體對培養細胞的汙染發生率高，據估計平均發生率在60%左右。同時又非常隱秘，早期不容易被發現，除非用特異性和靈敏度都非常高的檢測試劑盒。
  • 分享：一種在細胞培養中支原體汙染檢測的方法
    支原體汙染是細胞培養實驗中的常見問題之一，那如果細胞被支原體汙染不明顯，出現實驗結果難以理解，重複性差等問題如何解決呢，本文締一生物為您分享：一種在細胞培養中支原體汙染檢測的方法。分享：一種在細胞培養中支原體汙染檢測的方法常規PCR
  • 細胞培養的實驗室對支原體汙染預防有幾種預防
    支原體的汙染肉眼不易察覺，直到嚴重的階段才會出現培養基變色、細胞異常等情況。支原體可造成細胞代謝改變，基因表達譜發生變化，從而嚴重幹擾實驗進程。本文締一生物為您分析細胞培養的實驗室對支原體汙染預防有幾種預防。因此，在細胞培養過程中，定期監測是否存在支原體汙染，及時預防支原體汙染是每個科研人員的工作之一。