Mol Plant| 新型雜合高效RuBisCO

2020-09-04 eplants

8月20日,Molecular Plant 在線發表了日本神戶大學(Kobe University)Hiroshi Fukayama教授的題為 HybridRubisco with Complete Replacement of Rice Rubisco Small Subunits by SorghumCounterparts Confers C4-Plant-like High Catalytic Activity 的研究論文。該研究在C3型植物水稻中將編碼RuBisCO蛋白小亞基RbcS基因替換為高粱C4型RbcS,所獲得的雜合RuBisCO蛋白表現出類似C4植物的高催化活性。表達雜合RuBisCO蛋白的轉基因水稻具有稍高的光合能力。根據晶體結構分析,推測小亞基的βC-βD髮夾可能在決定催化活性中起作用。



1,5-二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶(Ribulose-1,5-bisphosphatecarboxylase / oxygenase,通常簡寫為RuBisCO)是一種酶(EC 4.1.1.39),它在光合作用中卡爾文循環裡催化第一個主要的碳固定反應,將大氣中游離的二氧化碳轉化為生物體內儲能分子,比如蔗糖分子。RuBisCO可以催化1,5-二磷酸核酮糖與二氧化碳的羧化反應或與氧氣的氧化反應。同時RuBisCO也能使RuBP進入光呼吸途徑。
RuBisCO在生物學上有重要的意義,因為它所催化的反應是無機態的碳進入生物圈的主要途徑。鑑於它對生物圈的重要性,人們正在努力改進自然界中的RuBisCO的功能。
在目前的大氣條件下,光合作用速率RuBisCO的限制,因為它的催化速率(k cat)非常低,且極低的CO2親和力(Kc)低和CO2的特異性(Sc/o)。
C4植物中的RuBisCO通常顯示出比C3植物更高的kcat。 RuBisCO由八個大亞基和八個小亞基(RbcS)組成。 水稻中的RBCS有5個等位基因,其中OsRbcS1不在光合器官中表達。作者2011年已發表的工作中,通過在水稻中過表達高粱C4型RbcS提高了Rubisco的催化活性 (Ishikawa et al.2011)。 在這項研究中,在之前發表的高粱RBC轉基因水稻中進一步敲除了水稻除OsRbcS1以外的其它4個基因,OsRbcS2-5, 獲得進一步的RuBisCO替換水稻株系(CSS)。作者發現,與野生型水稻相比,RuBisCO含量相較野生型有所下降,但具有較高的kcat,較高的kc和較低的Sc/o,且在高CO2條件下它們顯示展現更高的CO2同化效率。增加CO2濃度可以恢復由於雜合植株在正常條件下可能因Rubisco酶大量減少導致的乾物質積累量減少現象。


作者最後對野生型RuBisCO和Hybrid-RuBisCO的高解析度晶體結構分析,分別獲得1.75 and 1.70 Å高解析度的兩者晶體結構,並且推測了催化活性差異可能是由於RuBisCO的中心孔和RbcS的βC-βD結構差異造成。這種差異,特別是在βC-βD髮夾結構中,可能會影響RuBisCO催化位點的柔性並改變催化性能。

C4植物分布廣泛,由大約7500個物種組成。因此, C4植物可以提供合適的高活性的RBCS基因,可成為非常有用的基因資源。本文已驗證了將C4-RbcS導入C3植物是一種很有前途的改善RuBisCO動力學性質的策略。因此,未來更高效的C4-RbcS的引入,將有可能在未來提高植物的光合作用和生產力。 文章連結:https://www.cell.com/molecular-plant/fulltext/S1674-2052(20)30268-9


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