你的單抗雜交瘤細胞株產不出抗體，不妨試試基因工程抗體
基因工程抗體的概念比較廣
本文僅僅討論怎麼從雜交瘤細胞株開始做基因工程抗體
主要解決如下幾個問題：
1. 智慧財產權保護的需要，給細胞株建立指紋身份；
2. 更容易發文章；
3. 序列比細胞株更容易保存；
4. 對於不容易從腹水或者培養製備抗體的細胞株換個思路
5. 人源化抗體的需求
6. 嵌合抗體潛在需要
從雜交瘤細胞株做單克隆抗體，主要解決分三大步驟：
1. 雜交瘤細胞株測序
測序的方法主要有兩種，
1)兼併引物設計（degenerate primer）分別擴增抗體重連和輕鏈的可變區
2)RACE法，RACE即cDNA末端快速擴增技術( rapid amplification of cDNA ends),是一種基於逆轉錄PCR從樣本中快速擴增cDNA的5′端及3'端的技術
方法1）更加的節約成本，便捷高效；但是很多的實驗室不掌握核心的兼併引物設計方法，只能選擇RACE方法。
2. 載體構建
分別構建重鏈和輕鏈的表達質粒，表達載體的選擇和元件優化組合尤為重要，除了大家認為密碼子優化問題，還有載體的信號肽選擇尤為重要，這個決定抗體的表達水平，一般優先選擇V5信號肽，當抗體產量不高的時候也可以試試其他的信號肽，篩選最優；當然載體的抗體的骨架選擇也是需要注意的。
3. 共轉染哺乳動物細胞表達
抗體的表達一般選用HKE293或者CHO細胞系，好用的細胞系一般都是商業化公司壓箱底至寶，不會輕易流出，其配套的轉染試劑和培養基也是經過特殊優化的，培養基和轉染試劑是可以公開出售的。
進行以上實驗，必須要1.2.0*10^6以上的雜交瘤細胞，越純越好；雜交瘤細胞株測序的難點在於基於PCR的引物對的設計，很多實驗室沒有這個技術，按照文獻發表的序列重複，往往也效果不好；這個時候可以委託專業化公司幫忙。
基因工程表達抗體的益處：
長期做單抗的實驗室都知道，經常遇到雜交瘤細胞株產生抗體能力越來越弱或者抗體效價越來越低，主要原因可能是抗體基因發生突變，因此早期測序留住抗體基因尤為重要，對於規模化生產單抗的均一性更為重要。
現在很多的公司或者實驗室推出所謂的抗體胺基酸測序，目前這個技術不是很成熟，相對於抗體基因測序也不夠精確。抗體胺基酸測序一般是把抗體的重鏈和輕鏈去糖基化，再用蛋白酶切斷，通過質譜鑑定，然後計算機拼接，這裡面的難點：1.算法不一定科學；2.質譜鑑定中區分亮氨酸/異亮氨酸相對困難。