當實驗結果與預期不一致或無法重複時，先自查——查一下自己的研究樣本，特別是細胞培養是否做到位了，其中有「一點」需特別注意，因顯微鏡下很難觀察到它，沒有視覺，就沒有感知，所以它很容易被忽略。
這「一點」就是：支原體汙染！
全世界範圍內，不同實驗室的科研人員在培養細胞時，發生支原體汙染的概率是10%-85%不等。支原體是最小的原核生物，大約0.2-0.3um, 可以透過濾膜(0.22-0.45 um)，因此被汙染細胞常常肉眼觀察不到。有的實驗室被支原體汙染後，如果不進行有效徹底的支原體清除，該實驗的細胞培養很難進行下去，細胞傳代3代以後狀態就急劇下滑，無法進行正常實驗，有的實驗室甚至只能指望換細胞間。
大量文獻報導細胞支原體汙染後，會影響DNA 、RNA 和蛋白的表達，進而會產生以下幾個方面的影響：
1，細胞生長和繁殖
2，細胞代謝及功能
3，染色體異常
4，免疫細胞的質量
如何與這害人的支原體做鬥爭?
首先，可對細胞進行支原體汙染檢測，下面介紹3種方法：
1，PCR法。
若有汙染，會P出條帶，如果不放心送去測序看看是不是支原體序列。記得那會實驗室每周有專人進行全實驗室細胞的支原體檢測，一發現有問題，馬上將其扼殺在搖籃裡。但是有時PCR法敏感性差容易出現假陰性結果，或是因為檢測範圍小不能檢測到所有的支原體汙染。
2，Hoechst等螢光染色法和酶活法。
Hoechst等螢光染色法需要先將細胞種植在載玻片上，等細胞長到合適的密度，對其進行固定、洗滌、染色等,最終在顯微鏡下的現象。酶活法是通過檢測支原體特異性ATP合成酶來檢測支原體的汙染，需要特定的試劑盒和相應的多功能酶標儀，而且試劑盒的價格還比較昂貴。這兩種方法沒有做PCR 來得簡單快速。
3，基於先達基因ERA技術的支原體檢測試劑盒
ERA是由我國蘇州先達基因自主研發的，核心是一套等溫核酸擴增組合酶製劑。該試劑盒可以在恆定的低溫下（25℃-42℃）對痕量的支原體種內保守性DNA片段進行特異性的擴增，擴增反應可以在20min內完成，該試劑盒檢測範圍涵蓋130種支原體。這可以說是目前最為理想的支原體檢測方法了。
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然後，如果檢測到有支原體汙染，該如何處理呢?
方法1：直接棄之！
這就非常簡單粗暴了，如果還沒做處理，還是趕緊棄之吧，搶救不如重新復甦了，另外對培養箱要做由裡至外的清潔處理。
方法2：支原體清除培養基
如果你培養的細胞比較珍貴，直接丟棄可惜，那麼在確定對細胞的基因及蛋白表達沒有影響的情況下，可以使用——支原體清除培養基
Procell支原體清除培養基
支原體清除培養基是Procell在市面上已有的 支原體清除培養基基礎上開發的新一代產品，含有清除「支原體」的特殊成分(一種混合製劑，可通過抑制DNA和支原體生長所必須的相關蛋白合成來取得良好的支原體清除效果，最大程度上挽救珍貴的細胞，減少因支原體汙染帶來的損失)。
拯救被支原體汙染的細胞，你們Get到了嗎?
支原體汙染不易察覺，但染上卻可以毀了全部細胞。為了不讓自己輸在起跑線上，今後，請在蛋白檢測不順時，多注意下不易察覺的細節如支原體汙染，細胞交叉汙染，細胞傳代次數過多所導致的細胞老化，等等。做科研，細節決定成敗!