胎盤間充質幹細胞外泌體對高糖培養的成纖維細胞衰老的影響研究

2020-11-27 生物谷

 

為了探索高糖(high glucose，HG)促進體外培養的人皮膚成纖維細胞(human dermal fibroblasts，HDFs)的衰老條件， 天津醫科大學邊曉瑋 張翠萍 李炳旻等人分離人包皮組織的HDFs，建立高糖老化模型；觀察胎盤間充質幹細胞來源的外泌體(exosomes，Exos)對高糖培養的成纖維細胞增殖、遷移及衰老的影響。實驗分為3組：正常對照組(5.5 mmol/L葡萄糖)、HG1組(26 mmol/L葡萄糖)、HG2組(35 mmol/L葡萄糖)。CCK-8試劑盒檢測各組細胞在1、3、5、7 d的增殖情況；各組培養7 d後進行劃痕實驗，觀察各組HDFs在24 h內的遷移率；2′，7′二氯螢光素二醋酸(DCFH)法檢測各組培養7 d後細胞內活性氧簇(ROS)水平；細胞衰老β-半乳糖苷酶染色試劑盒檢測各組培養7 d後β-半乳糖苷酶活性。體外培養胎盤間充質幹細胞(placenta mesenchymal stem cells，PMSCs)，差速高速離心法分離Exos。將上述培養的HDFs分為3組：HG2組(35 mmol/L葡萄糖)、HG2+低濃度Exos(5μg/mL)組、HG2+高濃度Exos(50μg/mL)組，培養3 d後，檢測細胞增殖情況、遷移率、ROS水平和β-半乳糖苷酶活性；流式細胞術檢測細胞周期；Western blot分析衰老相關蛋白p53和p21表達情況。

結果顯示，與對照組相比，HG1和HG2組培養的HDFs增殖、遷移能力明顯下降(P<0.01)，ROS水平顯著升高(P<0.01)，β-半乳糖苷酶活性顯著增加(P<0.01)，而且各指標尤其以HG2組變化最為明顯；Exos實驗結果顯示：高濃度Exos明顯促進高糖培養HDFs的增殖和遷移(P<0.01)，顯著降低細胞內的ROS水平和β-半乳糖苷酶活性(P<0.01)，同時使細胞內p53和p21蛋白的表達水平顯著下降(P<0.01)，而低濃度Exos無明顯效果。

胎盤間充質幹細胞來源的Exos促進高糖培養的HDFs增殖、遷移，緩解細胞的氧化應激損傷和衰老狀態，其機制可能與衰老相關蛋白p53和p21表達下調有關。(生物谷Bioon.com）

 


小編推薦會議  2021（第五屆）外泌體與疾病研討會

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