革蘭氏染色技術——由來

2021-01-15 i3microorganism
革蘭氏染色是細菌鑑定的常用技術之一，根據染色結果可將細菌分為革蘭氏陰性菌和革蘭氏陽性菌。革蘭氏染色實驗是科研、學生實驗以及理論學習的重點知識。關於革蘭氏染色的歷史及原理，你了解嗎？本期將與大家分享革蘭氏染色的歷史由來，下期學習革蘭氏染色的原理。革蘭氏染色由丹麥醫生Hans Christian Gram於1884年首次提出，距今已有130多年曆史。Gram生於1853年，是家中七兄弟之長子，父親是哥本哈根大學法學教授，想引導兒子放棄自然科學而轉向法律工作，顯然以失敗而告終。Gram於17歲獲得哥本哈根大學植物學學士學位，之後憑藉論文《On the Size of the Red Blood Corpuscles in Man》獲得博士學位。Carl Friedländer(1847-1887)是德國病理學家和微生物學家，他發現Klebsiella pneumoniae(桿菌)幾乎總是可以在肺炎死亡患者身上觀察到，大膽預言它是肺炎的病因。後來Carl Friedländer在肺炎死亡患者肺部組織中又發現了一種球菌(即Streptococcus pneumoniae)，一些競爭對手認為後者才是肺炎的病因。但當時還沒有染色技術可以使研究人員直接觀察肺部組織中的細菌。(注: Carl Friedländer40歲就英年早逝，而死亡原因可能就是Klebsiella pneumoniae)。無巧不成書，畢業之後的Gram遊歷歐洲，在1983年進入Carl Friedländer實驗室待過一段時間。就像青黴素一樣，歷史上偉大的發現總伴隨著偶然和意外：有一次Gram工作到很晚，他把碘化鉀灑在了被結晶紫染色的肺組織上，在嘗試用酒精洗去結晶紫之後，Gram發現在所有的肺切片中球菌保留了紫色，但桿菌脫色了。Gram成為第一個在肺部組織中觀察到細菌的人，後續的實驗結果也證明Klebsiella pneumoniae和Streptococcus pneumoniae都是肺炎的元兇。於是在1886年，Carl Friedländer結束了肺炎病因的爭論：That pneumonia should be produced by different causes is analogous to the multiple causes of acute suppuration。革蘭氏染色技術隨即在微生物領域流傳開來，並成為一個通用的實驗方法。1886年，Carl Weigert對革蘭氏染色進行了小小的改動，在最後一步加上了番紅染色劑進行復染，這樣革蘭氏陰性菌也能顯色可見。至今，革蘭氏染色這個簡單而實用的技術一直沿用。後來Gram回到了哥本哈根大學，擔任藥理學和醫學教授，並被任命為王子(後來的國王)的私人醫生。在40年的醫學生涯中，Gram再也沒有回歸微生物實驗室，也沒有發表過關於革蘭氏染色的文章。1938年，Gram與世長辭，Gram stain長留人間。

Cantey JB. 「A Defective and Imperfect」 Method: H. Christian Gram and the history of the Gram stain. The Pediatric Infectious Disease Journal, 2015, 34: 848

Gram HC. Ueber die isolirte Färbung der Schizomyceten in Schnitt- und Trocken-präparaten. Fortschritte der Medizin, 1884, 2: 185-189

Köhler W, Mochmann H. [Carl Friedländer (1847-1887) and the discovery of the Pneumococcus–in memory of the centenary of his death]. Z Arztl Fortbild (Jena). 1987, 81: 615-618

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  • 革蘭氏染色小常識
    二、步驟   革蘭氏染色法的步驟為：塗片→固定→結晶紫色染色→水洗→碘液媒染→水洗→酒精脫色→番紅復染→水洗→乾燥→觀察。1、塗片   首先在載玻片上滴一小滴蒸餾水，用灼燒過的接種針挑取少量細菌，置於載玻片的水滴中與水混合併塗抹開。注意塗抹要均勻平坦，塗抹成直徑約為1 cm的薄層。
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    未經染色之細菌，由於其與周圍環境折光率差別甚小，故在顯微鏡下極難觀察。染色後細菌與環境形成鮮明對比，可以清楚地觀察到細菌的形態、排列及某些結構特徵，而用以分類鑑定。革蘭氏染色屬復染法。，故乙醇處理不會出現縫隙，因此能把結晶紫與碘複合物牢牢留在壁內，使其仍呈紫色；而革蘭氏陰性菌因其細胞壁薄、外膜層類脂含量高、肽聚糖層薄且交聯度差，在遇脫色劑後，以類脂為主的外膜迅速溶解，薄而鬆散的肽聚糖網不能阻擋結晶紫與碘複合物的溶出，因此通過乙醇脫色後仍呈無色，再經沙黃等紅色染料復染，就使革蘭氏陰性菌呈紅色。
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    染色法的種類有很多，表解如下：2.革蘭氏染色法在上述的各種染色法中，以革蘭氏染色法最為重要。這一染色方法由丹麥醫生漢斯·克裡斯蒂安·革蘭於1884年所發明，最初是用來鑑別肺炎球菌與克雷白氏肺炎菌之間的關係，後推廣為鑑別細菌種類的重要特性之一。
  • 微生物鑑定基礎——革蘭氏染色
    革蘭氏染色的基礎是不同細菌細胞壁的不同。革蘭氏陽性菌通常具有厚的肽聚糖層，可以保持初染媒染的染料。而革蘭氏陰性菌肽聚糖層比較薄，初染媒染的染料在乙醇脫色時逸出。所以作為關鍵點來說，就是細胞壁，任何影響細胞壁的事件都有可能導致革蘭氏染色的錯誤結果。比如菌齡（細菌的培養時間）很重要，太嫩的細胞壁還沒有形成，太老的有可能又自融了。
  • 革蘭氏染色的基本原理及方法
    革蘭染色法是1884年由丹麥醫師Gram創立，直到現今，革蘭氏染色法仍是細菌學中廣泛使用的一種鑑別染色法。細菌先經鹼性染料結晶紫染色，而後經碘液進行媒染，之後用酒精脫色，在一定條件下有的細菌媒染後的顏色不被脫去，有的可被脫去，因此可把細菌分為兩大類，前者叫做革蘭氏陽性菌(G+),後者為革蘭氏陰性菌(G-)。
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    視頻下載請點擊右下角的「每日必看」革蘭氏染色法是細菌學中廣泛使用的一種鑑別染色法，1884年由丹麥醫師
  • 你真的會做革蘭氏染色實驗嗎？
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    革蘭氏染色法是細菌學中廣泛使用的一種鑑別染色法，未經染色之細菌，由於其與周圍環境折光率差別甚小，故在顯微鏡下極難觀察。染色後細菌與環境形成鮮明對比，可以清楚地觀察到細菌的形態、排列及某些結構特徵，而用以分類鑑定。革蘭氏染色屬復染法。
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  • 你真的會做革蘭氏染色實驗麼?
    但大家在日常的革蘭氏染色過程中有沒有發現過這樣的問題：明明是革蘭氏陰性菌，怎麼我的染色結果是陽性呢？或者怎麼陽性菌被我染成陰性了呢？為什麼會產生這樣的偏差？革蘭氏染色是一項經典的細菌鑑別手段，自19世紀80年代丹麥的醫師GRAM創立起，至今已經近一個半世紀，仍舊在細菌的檢測和鑑定分類上被廣泛應用著。在我國，GB 4789系列的國標中很多致病菌的檢測也都需要進行革蘭氏染色，可見其重要性。
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    （1）染色原理由於微生物細胞含有大量水分，機體是無色透明的，與周圍背景沒有明顯的反差，必須進行染色，使經染色後的菌體與背景形成明顯的色差，從而能更清楚地觀察到其形態和結構。 微生物中細菌、致病菌是很小的生物體，必須通過染色的方法，在顯微鏡下才能看得清楚，並且還可以通過染色的方法鑑別革蘭氏染色特性，以及是否長有鞭毛、周毛、莢膜和芽孢等。（2）染色方法①簡單染色法簡單染色法又叫作普通染色法，只用一種染料使細菌染上顏色，觀察細菌的形態。
  • 細菌的簡單染色和革蘭氏染色
    簡單染色法是只用一種染料使細菌著色以顯示其形態，簡單染色不能辨別細菌細胞的構造。革蘭氏染色法是1884年由丹麥病理學家C.Gram所創立的。革蘭氏染色法可將所有的細菌區分為革蘭氏陽性菌（G+）和革蘭氏陰性菌（G—）兩大類，是細菌學上最常用的鑑別染色法。
  • 今兒個講講革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌,
    俠股柔情 免費訂閱本刊養狐之旅，從這裡開始關注俠股柔情，品讀養狐人生 革蘭氏染色的實際意義(2) 選擇藥物:革蘭氏陽性菌與革蘭氏陰性菌在細胞壁等結構上有很大差別，因而對抗菌素等藥物的敏感度不一。例如大多數革蘭氏陽性菌都對青黴素敏感;而革蘭氏陰性菌則對青黴素不敏感，而對鏈黴素、氯黴素等敏感。所以首先區分病原菌是革蘭氏陽性菌還是陰性菌，在選擇抗生素方面意義重大。
  • 什麼是革蘭氏陰性菌?
  • 細菌的形態結構觀察和染色技術實驗——萬融實驗
    革蘭氏染色法：由丹麥病理學家Hans Christian Gram於1884年創立，是細菌學中最重要的鑑別染色法。各種細菌經革蘭氏染色後，可分為革蘭氏陽性菌（G＋）和革蘭氏陰性菌（G-）兩大類。其基本步驟分為：結晶紫初染，碘液媒染，乙醇（或丙酮）脫色和番紅復染。一般認為，革蘭氏染色原理與細菌細胞壁結構和組成有關。
  • 革蘭氏陽性菌的詳細分類及治療
    如果你去醫院就醫，醫生懷疑你有感染，可能會要求進行革蘭氏染色檢查。該測試還可以幫助您的醫生了解細菌是革蘭氏陰性還是革蘭氏陽性，從而選擇合適的治療方式。然而你可能對於革蘭氏陽性菌陰性菌這些概念並不熟悉，今天為大家講解下，革蘭氏陽性菌，革蘭氏陰性菌的區別，革蘭氏染色法，常見的革蘭氏陽性菌類型以及相應的治療。首先，我們了解下，革蘭氏陽性菌和陰性菌各自的特徵。
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    革蘭氏染色法是細菌學中廣泛使用的一種鑑別染色法，1884年由丹麥醫師Gram創立。不經染色的細菌與周圍環境偏差極小，不易觀察，對細菌進行染色，「染上」顏色後，細菌不僅美麗的像藝術品，也更容易觀察和研究。孩子們會對老師選取的3種典型性細菌進行全過程的染色操作，學習革蘭氏染色法，然後通過專業的顯微鏡觀察自己染色的細菌。生活中我們都見過長毛、發黴的東東吧！
  • 實驗六:1.細菌的簡單染色和革蘭氏染色 2.顯微鏡油鏡的使用
    一、實驗目的：1．學習微生物塗片、染色的基本技術，掌握細菌的單染色法。