質粒DNA的基本性質,大多數質粒DNA是是環狀雙鏈的DNA分子

2020-12-05 孩子都愛看

(二)質粒DNA的基本性質

大多數質粒DNA是是環狀雙鏈的DNA分子。如果兩條鏈都是完整的環，這種質粒DNA分子稱為共價閉合環狀DNA (covalently closed circular， CCC DNA)。CCC DNA有兩種構型，超螺旋DNA( supercolied DNA, SC DNA)和鬆弛的DNA (Relaxed DNA) ,分別是由DNA促旋酶(DNA gyrase) 和拓樸異構酶(topoi somerase)作用的結果。

如果質粒DNA中有-條鏈是不完整的，那麼這種DNA分子就稱為開環的(open circles, 0C DNA),開環的DNA通常是由內切酶或機械剪切造成的圖3-8)。從細胞中分離質粒DNA時，質粒DNA常常會轉變成超螺旋的構型。

(三)質粒分類

根據質粒的拷貝數將質粒分為鬆弛型質粒和嚴緊型質粒。質粒拷貝數(plasmid copy numberx)是指細胞中單-質粒的份數同染色體數之比值，常用質粒數/每染色體來表示。不同的質粒在宿主細胞中的拷貝數不同,

鬆弛型質粒(relaxed plasmid) 的複製只受本身的遺傳結構的控制,而不受染色體複製機制的制約，因而有較多的拷貝數。通常可達10-15個/每染色體。並且可以在氯黴素作用下進行擴增，有的質粒擴增後，可達到3000/每染色體(Co1E1， 可由24個達到1000至3000個)。 這類質粒多半是分子量較小，不具傳遞能力的質粒。基因工程中使用的多是鬆弛型質粒。

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