血細胞分析儀已經成為血常規檢驗必用的實驗手段，特別是具有五分類能力的血細胞分析儀，目前已經非常廣泛的應用,不僅大大提高了臨床血液學檢驗的質量和效率，而且基本能夠滿足臨床診斷及實驗要求。
但是由於血細胞分析儀設計方法的局限性，可能會導致某些結果假性增高或降低，甚至檢測錯誤或漏檢，仍不能完全取代人工鏡檢，因此制定嚴格的復檢規則非常必要。國際上已經有41條復檢規則推薦，涉及到紅細胞、白細胞、血小板及網織紅細胞的具體篩檢內容。而各醫院根據自身情況也制定相應的復檢規則，這是一種非常嚴謹的做法，其目的是減少漏檢與差錯的發生，儘量降低假陽性率，避免出現假陰性。近日，在我們科就出現了這麼一例白細胞假性升高的案例。
某日凌晨，對於正在上夜班的筆者來說身體已經疲憊不堪，但仍然聚精會神的審核著剛送過來的一批血常規的結果，絲毫不敢有所懈怠,想到一會就下夜班，不由得加快了進度。這時一個結果引起了筆者的注意，白細胞未分類，這種情況以前也有發生。筆者首先仔細檢查了血液標本，未發現量少、有凝塊及其他異常。然後拿標本到另一臺血細胞分析儀邁瑞BC-5800上複查，這裡說明下，我們夜班主要使用的血細胞分析儀是貝克曼庫爾特LH750這臺儀器。
當複查結果出來後，讓筆者感到困惑，兩臺儀器檢測的主要項目HGB﹑RBC﹑PLT相差不大，但邁瑞BC-5800上檢測的白細胞數值4.6與之前LH750檢測的白細胞數值1.8相差還是挺大，這又是怎麼回事呢？於是筆者首先檢查了下兩臺儀器的室內質控，近期都挺好的。又查看了下病人的情況：庾某，女，24歲，臨床診斷為MDS(骨髓異常增生綜合症)。
然後回顧了兩臺儀器的直方圖與散點圖，BC-5800提示有未成熟細胞,而LH750提示有細胞幹擾及散點圖顯示有核紅細胞大量增多。
圖1：LH750血細胞分析儀測定結果直方圖與散點圖
看到這兒，筆者想到難道是有核紅細胞幹擾了白細胞的測定值？於是決定鏡檢觀察,看是否真如所想的一樣，經過一段時間的推片染色後，迫不及待的在鏡下觀察，結果鏡下果然發現很多有核紅細胞，筆者搞明白了是有核紅細胞影響了白細胞的計數分類，然後手工計數有核紅細胞，根據校準公式WBC數=儀器計數結果×〔100/(100+NRBC)〕糾正白細胞測定值，糾正後白細胞值也基本符合第一次在貝克曼庫爾特LH750上的檢測結果。
圖2：鏡下可見有核紅細胞
為什麼同樣的兩臺全自動五分類血細胞分析儀（貝克曼庫爾特LH750和邁瑞BC-5800）測定結果差別此之大呢？首先我們了解下LH750白細胞計數分類的原理： LH750血液分析儀進行白細胞分類採用VCS技術，是從體積、核質比、顆粒特性、膜特性和形態等方面對白細胞綜合分析。在分類中涉及兩種試劑，一種是五分類溶血素，另一種是穩定劑，稀釋液作為鞘液。當全血進入混勻池時，五分類溶血素首先將血細胞脹大，並破壞溶解紅細胞和血小板，這時穩定劑注入混勻池，使白細胞恢復到原態，混勻後的樣品在樣品壓力與鞘流的作用下，在流式通道內作單細胞排列，進行VCS三種參數的同時檢測（19秒檢測8192個白細胞），然後統計分析得出白細胞分類結果。
而邁瑞BC-5800原理是採用雷射流式細胞技術，當一定量的血細胞被吸入並經過特定量的試劑作用後，血樣經噴嘴注入充滿稀釋液的圓錐形流動室中，在稀釋液形成的鞘液包裹下，細胞單個排列成行地穿過流動室的中央。當懸浮在鞘液中的血細胞經過二次加速後通過雷射檢測區時，血細胞受到雷射束的照射，產生的散射光性質與細胞的大小﹑細胞膜和細胞內部結構的折射率有關。低角前向散射光反映了細胞的大小，高角前向散射光則反映細胞的內部精細結構和顆粒物質，根據這些數據分析得出白細胞的分類。
可以看出兩者在細胞計數上原理相差不大，但是為什麼這次WBC測定結果會相差挺大呢？我們回過頭看，LH750儀器上有提示細胞幹擾以及散點圖顯示大量有核紅細胞，鏡檢結果也說明是有核紅細胞影響了白細胞的計數，根據白細胞計數原理，兩者都是用溶血劑將紅細胞溶解破壞後計數白細胞，但是有核紅細胞只能溶解細胞膜而不能破壞細胞核，因此這些有核紅細胞會被誤認為是淋巴細胞而計入白細胞數中，從而影響白細胞計數，使白細胞測定值假性增高，而LH750儀器白細胞直方圖曲線左移，也提示出淋巴細胞增多。
雖然搞清楚了白細胞計數為什麼增高，但是為什麼LH750檢測的白細胞計數不高且符合手工鏡檢計數呢？這是因為貝克曼庫爾特LH750有白細胞計數自動糾正功能，當血液中存在巨大血小板、血小板凝集、有核紅細胞、難溶紅細胞等非白細胞顆粒時，由於顆粒大小在白細胞計數區域，所以會被誤認為白細胞而計數在內，直方圖顯示與Y軸有個很高的截距，提示在35fl左右計數受到幹擾，對此CoulterLH750血液分析儀在白細胞計數35fl起始處設有閾值監控，若白細胞在35fl處的數量超過該閾值，則會觸發報警，儀器採用智能微數技術，通過複雜的算法自動糾正計數值，並報告糾正值。不管白細胞結果是否被糾正，在血細胞參數欄患者結果中，每份標本均可看到白細胞結果與對應的未糾正值，在LH750儀器結果面板上確實也能看到未糾正前的數值。
血常規分析儀雖然可以極大的提高我們的工作效率，但仍然會因為部分設計缺陷而導致結果有偏差，所以在日常工作中，對於那些特殊疾病或特殊標本的結果審核要倍加小心，必須結合直方圖與散點圖，提示有異常時仍然需要我們去鏡檢。所以，鏡檢是很重要的質量控制，是避免醫療糾紛，減少差錯的重要措施，提高檢驗水品，對病人負責，做一名合格的檢驗人員。
作者 | 張雲霞 茹利強，晉城市人民醫院檢驗科
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