一、目的要求
通過測定水體中葉綠素a的含量來定量檢測藻類的生物量。
二、基本原理
衡量藻類生長狀況的生物學指標主要有代表藻類現存量的葉綠素a（mg/L）和生物指標。
藻類和浮遊植物依靠光合作用生長，而葉綠素a是所有藻類的主要光合色素，因此水體中葉綠素a含量是反映藻類光合作用潛力的一種指標。葉綠素a含量反映藻類生物量的多少，常被作為衡量藻型湖泊水體中藻類現存量的代表性參數及評價水體富營養化狀況的主導因子。葉綠素a、b的丙酮提取液在紅光區的最大吸收峰分別為663nm和645nm，利用分光光度測定其光密度，即可用公式計算出提取液中的葉綠素a含量。
三、器材
真空泵、抽濾漏鬥、0.45μm微孔濾膜（混合纖維）、濾膜、研缽、分光光度計、離心機、離心管。
四、操作步驟
（1）樣品經微孔濾膜抽濾過濾。
（2）濾膜放入研缽內，每張濾膜加90％的丙酮溶液2～3ml，充分研磨，提取液放置在冰箱中4℃提取24小時。
（3）在3000～4000r/min下離心10分鐘。
（4）取上清液移入比色皿內，放入分光光度計穩定一定時間，分別在750nm、663nm、645nm、630nm波長下測提取液的吸光度。
（5）葉綠素a含量的計算公式如下：
式中：V——樣品體積（ml）；
D——吸光度；
V1——最後提取液體積（ml）；
δ——比色杯寬度（cm）。
思考題
1．計算出樣品中葉綠素a的含量。
2．葉綠素a含量的計算公式的意義是什麼？