【分享】手把手教你如何自製絲狀真菌培養基(PDA)

2021-02-12 臨床微生物論壇

    隨著廣譜抗生素的大量使用,真菌感染尤其是侵襲性真菌感染病例越來越多,相應的實驗室診斷也引起越來越多的重視。各種微生物會議、網絡交流平臺,真菌成了熱門話題,絲狀真菌更是「驚豔」全場。

    絲狀真菌在臨床微生物實驗室屬於少見菌,尤其在基層醫院更甚,沙保羅瓊脂平板(SDA)、馬鈴薯葡萄糖瓊脂平板(PDA)、玉米-吐溫瓊脂和察氏培養基等不常備。遇到標本中「長毛」要麼束手無措,要麼判斷為「汙染」。

    下面小陳就和大家分享一下自製平板心得,材料容易獲得,經濟實惠,製作的數量根據自己實際用量而定。既可以解決你的「黴問題」,又可以讓你享受一下DIY的快樂,帶著你的小夥伴們一起製作吧。

準備材料

土豆,裁紙刀、天平、瓊脂粉、葡萄糖粉、氯黴素、電爐、燒杯、三角燒瓶、玻璃棒、紗布、壓力蒸汽滅菌器等。

操作步驟圖解

清洗土豆,洗的乾淨吧!

去皮,溫馨提示,用刀時注意安全!

根據實際需求定量配製,稱一定量的土豆

整個土豆太難煮,切碎,把滲出的澱粉也用蒸餾水衝洗倒進去,顆粒歸倉哦!

30min後,土豆已熟,碾成土豆泥

溫度冷卻至40-50℃,過濾

用紗布過濾,去除粗顆粒物質


過濾後的土豆泥。建議不要11:00-12:00期間配製,為什麼?香!餓!


把稱量好的瓊脂粉、葡萄糖粉倒入三角燒瓶

 調節PH至6±0.2,為抑制雜菌,可添加氯黴素0.1g。121℃,15-20min(棉花、紗布封口。有點對不起大家,消毒次數太多,我們的紗布不容直視,汗!


    待冷卻至50-60℃,傾倒平板,厚度在3-5mm,放入溫箱,無菌實驗合格後,放入冰箱冷藏保存。為防止變幹,建議翻入密封袋中。(感謝華西醫院陳知行老師的建議)

和大家分享幾張絲狀真菌的鏡下美圖!

    

      來自基層醫院的我,非常羨慕大型醫院的現代化實驗室條件,各種自動化設備、高精尖的培養和鑑定儀器,但現實告訴我:「你現在在基層醫院,無論有沒有條件,工作仍舊要進行」。

      與其抱怨實驗室設備落後,埋怨領導不給購買設備,不如多讀書、多動手,沒條件,自己創造條件。於是乎查閱資料,就地取材。DIY各種基礎實驗。

      後續還會和大家分享,日常工作中的小感動。

參考文獻

  1.GB/T4789.15-2003 中華人民共和國國家標準 食品衛生微生物檢驗 黴菌和酵母計數

  2.GB/T4789.28-2003中華人民共和國國家標準 食品衛生微生物檢驗 染色法,培養基和試劑

  3.化妝品衛生規範 微生物檢驗方法 2007版

  4.GB 4789.15-2010 中華人民共和國國家標準 食品安全國家標準 食品衛生微生物學檢驗 黴菌和酵母菌計數

  5. ISO 18416-2007 Cosmetics----Microbiology Detection of Candida albicans

(實驗過程及本文編輯:陳眾,洛陽市第一中醫院)

相關焦點

  • 臨床絲狀真菌鑑定是難點,VITEK MS來支招
    比如對於微生物中的絲狀真菌,應用於質譜鑑定並非一路坦途。  不論是產品研發還是臨床應用,絲狀真菌在譜上的鑑定似乎註定要經歷更多的時間和坎坷,而當下微生物工作者在這個問題上似乎仍然更依賴於形態學鑑定,縱使遇到難題時首先也是考慮測序的方法。
  • 研究揭示絲狀真菌天然產物生物合成新機制
    絲狀真菌具有強大的次級代謝產物合成能力,可以產生結構複雜多樣、具有廣泛生物活性的化合物。目前,許多絲狀真菌的次級代謝產物或其衍生物都已被開發成重要藥物應用於臨床中,包括青黴素、他汀類降血脂藥物和抗真菌藥物棘白菌素。探索絲狀真菌次級代謝產物的生物合成機制,對於進一步挖掘次級代謝產物資源和開發新型藥物具有重要意義。
  • 經驗分享︱如何判斷和防止培養細胞受汙染
    上一期小編已在《【經驗分享】細胞培養如何避免支原體感染》一文中簡單介紹細胞培養過程中的支原體汙染,現在就跟大家探討一下怎樣判斷和防止細胞在培養中出現汙染。
  • 對微生物進行擴大培養為什麼用液體培養基-上海擎澤生物科技
    在我國教科書中,微生物被劃分為細菌、病毒、真菌、放線菌、立克次氏體、支原體、衣原體、螺旋體,共八大類。這些各有不同、個體無法用肉眼觀察的微小生物(部分真菌肉眼可見)看似不重要,實則涉及我們的食品、醫藥、工農業等眾多領域,與人類關係密切。
  • Excel表格中如何繪製稜錐圖 手把手教你在excel2007中插入稜錐圖
    Excel表格中如何繪製稜錐圖 手把手教你在excel2007中插入稜錐圖時間:2017-07-02 14:14   來源:三聯   責任編輯:沫朵 川北在線核心提示:原標題:Excel表格中如何繪製稜錐圖 手把手教你在excel2007中插入稜錐圖 1、打開一個Excel的文件,選中一個單元格,然後滑鼠左鍵單擊菜單【插入】
  • 《閃耀暖暖》AR模式拍照方法介紹 手把手教你如何拍照
    《閃耀暖暖》AR模式拍照方法介紹 手把手教你如何拍照時間:2019-07-18 10:23   來源:牛遊戲網   責任編輯:沫朵 川北在線核心提示:原標題:《閃耀暖暖》AR模式拍照方法介紹 手把手教你如何拍照 在《閃耀暖暖》手遊中,玩家們可以使用AR模式來給暖暖拍照了,拍照背景可以選擇遊戲場景或者真實場景,還可以選擇不同的拍照姿勢哦
  • wps如何求標準差? 手把手教你如何在WPS表格中求標準差
    wps如何求標準差? 手把手教你如何在WPS表格中求標準差時間:2017-08-08 14:42   來源:系統天堂   責任編輯:沫朵 川北在線核心提示:原標題:wps如何求標準差? 手把手教你如何在WPS表格中求標準差 wps如何求標準差?怎麼求一系列數據的標準方差呢?
  • 原種的糞草培養基如何製作?
    從母種培養成原種,就是將馬鈴薯洋菜培養基連同其中生長的母種菌絲,接種於原種培養基上。原種用的培養基因食用菌種類而不同,比如有糞草培養基、稻草培養基等等。下面來介紹一下,原種的糞草培養基如何製作?蘑菇、口蘑和松乳菇等凡是生長在糞堆、草地和腐殖質土上的菇類都用糞草培養基。將新鮮、乾淨(無泥土雜質和黴變)的禽、畜糞和稻、麥、穀草等曬乾,堆製成堆肥後作為原種培養基。堆制方法是這樣的,取糞和草等量,並按二者總量的1%準備石膏粉以及過磷酸鈣。選擇一處不受風吹日曬的地方,整平地面,在地上鋪厚15釐米,寬150釐米的草,長隨用量而定,上面再鋪厚15釐米的糞。
  • 細胞培養之真菌,細菌的防治
    請遵守細胞汙染永恆定律:無論什麼細胞只要是不重要的細胞汙染了,立刻加84棄之,重新復甦新凍存管培養;實在需要挽救的請參考以下:細菌汙染:主要有洋蔥霍爾伯德菌型汙染確定是非常珍貴的細胞 建議分別配置含10倍慶大黴素和兩性黴素溶液(G/A)的PBS和5倍慶大黴素和兩性黴素溶液(G/A)的完全培養基各一份。
  • 沙氏葡萄糖瓊脂培養基的用途與應用
    一、背景 沙氏葡萄糖瓊脂培養基又名SDA培養基或者沙氏培養基,英文名字是Sabouraud Dextrose Agar,是通用型的真菌培養基,屬於營養培養基中的一種,沙氏葡萄糖瓊脂培養基屬於一種改性的沙氏瓊脂,主要用來培養和區分真菌,並且這種培養基一般會和抗生素一起使用
  • 手把手教你如何使用斐波那契回調線
    原標題:手把手教你如何使用斐波那契回調線 後續走勢可能會如何? 現在,我們根據此次畫的斐波那契回調線來預測一下接下來的走勢。從上圖可以看出,已突破0.618線,即圓圈C的位置。目前在跌穿了0.764線後,有所反彈。不過,從當前的走勢來說,方向依然不太明朗。
  • 手把手教你製作ppt日記本
    手把手教你製作ppt日記本時間:2017-07-16 15:06   來源:三聯   責任編輯:沫朵 川北在線核心提示:原標題:ppt怎麼製作筆記本? 手把手教你製作ppt日記本 ppt怎麼製作筆記本?本文介紹了使用ppt製作日記本的方法,製作方法簡單,一起來學習吧!
  • 學姐分享|手把手教你免費安裝、激活Office
    來,小九學姐手把手教你免費安裝、激活office各版本!在這個過程中,我們只需要下載一個內存只有11M的軟體——Office Tool Plus。是的,就是這麼簡單。01.下載Office Tool Plus進入Office Tool Plus官網點擊下載,解壓、打開即可02.
  • pda是什麼設備?
    pda輕巧便攜,可隨身攜帶使用,操作簡單,使用維護方便。通過pda來進行數據採集、數據處理,對於企業而言能夠提高現場工作效率。pda的使用將繁瑣、冗長的數據列表,變化成可以掃描、匹配、確認的設備,提高了物品處理的效率。pda是具備條碼掃描功能的手持設備,可掃描一維條碼、二維條碼、DPM碼等,適應不同行業的應用需求,那麼pda的功能主要體現在哪些方面呢?
  • 年度日食奇觀 攝影老師傅手把手教你如何拍日食
    年度日食奇觀 攝影老師傅手把手教你如何拍日食 2019-12-26 15:11:12 來源:新京報  |  作者:張娜 王金淼
  • 氫彈如何製作?手把手教你做一顆氫彈
    氫彈今天小編手把手教你做一顆氫彈,來看具體操作。首先,你最好住在海邊,因為海水裡可以提煉出大量的氘和氚 ,它們都是氫元素的同位素。(氘有兩個中子,氚有三個中子,還有一個中子的氕,自然界中最多的就是氕,水分子裡的氫元素絕大部分都是氕,含有較多氘或氚元素組成的水叫做重水,極其稀少)然後把上一集教大家做好的原子彈拿過來,要是你沒看上集,沒做好原子彈就沒辦法了,趕快回去補課把原子彈做出來。
  • 手把手教你如何隱藏電腦文件夾
    手把手教你如何隱藏電腦文件夾時間:2017-08-03 19:24   來源:三聯   責任編輯:沫朵 川北在線核心提示:原標題:電腦怎麼隱藏文件夾? 手把手教你如何隱藏電腦文件夾 朋友會向你借電腦,但是電腦上有一些文件又不想讓其他人看到。該怎麼辦呢?有的人把它們放到U盤或移動硬碟,貼身保管;有的人則用軟體進行加密。
  • 手把手教你學ELISA、PCR、免疫組化
    1.手把手教你學ELISAELISA的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結合在固相載體 表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性,酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。2.手把手教你學PCR實時螢光定量PCR,簡稱RT-QPCR,屬於Q-PCR的一種,目前該技術已得到廣泛應用,如:擴增特異性分析、基因定量分析、基因分型、SNP分析等。
  • 【飼育資料】爬寵食品--果蠅飼養餵食容器及培養基自製方法!
    一直有爬友對如何方便飼養及餵食有疑問,故在此分享一下自己的方法。如果是能夠附著於容器上且不易出水的培養基那就要方便很多。以下是個人使用的一個配方,僅作參考,當然你覺得有自己喜歡用的方法也可以。根據自己的需要來定做培養基的量,按照比例來確定5L裡培養基中各成分的量。此培養基是我大學時做遺傳實驗時繁育果蠅用的配方,故不必擔心是否能養活。
  • 如何用LB培養基培育出大腸桿菌?
    大腸桿菌是我們經常聽到的名詞,但你知道它是什麼嗎?大腸桿菌又名大腸埃希氏菌,在1885年被德國人Escherich發現的,起先一直被當作正常的腸道菌群組成部分,也就是非致病菌。4.LB培養基培養時無必要可不添加生長因子,只需加入伊紅美藍,就可鑑別是否存在大腸桿菌。(菌落呈現深紫色,伴有金屬光澤)5.大腸桿菌是外源基因表達的宿主,一方面是它的遺傳背景清晰,培養操作簡單,另一方面是因為他可以大規模的發酵經濟,且技術操作也較為簡單,是目前應用最廣泛、最成功的菌類。