急性胰腺炎(AP)小鼠模型的建模方法

2020-09-04 雲克隆

原型物種:

來源:雨蛙肽導致急性重症胰腺炎

模式動物品系:SPF級C57BL/6小鼠,雄性,周齡為8w-10w,體重為20g-25g。

實驗分組:實驗分六組:正常對照組、模型組、陽性藥組、受試藥組三個劑量組。

實驗周期:4-6 weeks

建模方法:

A組:較輕症狀的胰腺炎模型:
每周中的一天注射腹腔注射雨蛙肽7次,50 µg/kg(1.25µg/只),每次注射間隔1小時。共注射6周。
B組:重症胰腺炎模型:
每周:1d~3d腹腔注射2次33%乙醇150ul,3g/kg。2次腹腔間隔12小時。第4d腹腔注射7次雨蛙肽,50 µg/kg(1.25µg/只),每次注射間隔1小時。
5d~7d腹腔注射2次33%乙醇150ul,3g/kg(每隻動物75mg)。2次腹腔間隔12小時。
以上建模方式持續6周。
C組:正常組。

應用:急性胰腺炎模型

模型評價

在建模第6周時,處死各組動物,取新鮮胰腺組織。固定於4%多聚甲醛24h以上。將組織從固定液取出在通風櫥內用手術刀將目的部位組織修平整,將修切好的組織和對應的標籤放於脫水盒內,隨後進行脫水,固定,包埋和切片。
進行HE和masson染色,判斷胰腺纖維化程度。

組織病理學

HE染色結果:A組為輕微胰腺炎組,B組為嚴重胰腺炎組,C組為正常組。B組跟C組相比胰島細胞脂肪樣空泡變性,部分腺泡細胞疏鬆水腫,部分腺泡細胞鷹眼樣巨細胞病變。A組跟C組相比胰島無明顯病變,血管有增生。嚴重程度不及B組。
Masson染色結果:A組為輕微胰腺炎組,B組為嚴重胰腺炎組,C組為正常組。B組與C組相比胰腺血管周邊和胰島纖維化,胰島細胞脂肪樣空泡變性,腺泡細胞也發生澱粉樣變性。A組與C組相比只有血管周邊有輕微的纖維化,胰島和腺泡細胞無明顯病變。

標誌因子水平

取各組實驗動物血清,對血澱粉酶,尿澱粉酶,血脂肪酶,谷丙轉氨酶、血肌酐及乳酸脫氫酶等生化檢測指標聯合檢測可以評估急性胰腺炎模型。

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