支原體螢光定量試劑盒（qPCR法）介紹
2020-10-22 上海威正翔禹生物螢光定量PCR法（qPCR）：是在常規PCR基礎上，將『針對支原體特異性保守序列的探針』做螢光標記，使PCR擴增後的產物帶有螢光，利用螢光信號的變化和配套軟體，進行DNA擴增反應的實時監測，簡稱qPCR。本文第締一生物為您做支原體螢光定量試劑盒（qPCR法）介紹。
支原體螢光定量試劑盒（qPCR法）介紹
優點：
①靈敏度高、特異性強。
②時間短，2-3小時出結果。
③檢測結果可定量。
④操作簡便。
缺點：
①對於已做支原體滅活處理的樣品，由於支原體DNA仍舊存在其中，PCR結果會出現假陽性。（可用培養法做補充驗證）
②不同廠家生產的試劑盒質量差異巨大（由於引物及內在設計不同），需謹慎選擇，儘量在專業人員推薦指導下使用。
『支原體qPCR檢測試劑盒』介紹
德國MB公司生產的支原體qPCR檢測試劑盒，依據操作步驟的細微差別，分『經典法』和『一步法』兩類。
此兩類試劑盒較全球其他廠家同類產品，具有以下獨特的優點：
①經典法qPCR試劑盒遵循歐洲藥典流程要求
②高特異性，一次檢測即可涵蓋了所有可能感染細胞的支原體物種（涵蓋歐洲藥典規定的9種支原體），操作簡單，易於觀察。
③高靈敏度，MB公司的經典法試劑盒最高檢測限可達到≤10CFU/ml。
④MB公司有相應配套的10CFU/100CFU的敏感度測試的標準品，便於方法學驗證。
⑤MB公司有相應配套的支原體基因組DNA和細菌基因組DNA，便於特異性驗證。
⑥MB公司有相應配套的支原體絕對定量標準品，便於最後定量檢測。
綜上所述，您是不是已經對支原體螢光定量試劑盒（qPCR法）介紹，有所了解。如果還有其他疑問，請諮詢威正翔禹/締一生物資深專家。
相關焦點
-
支原體螢光定量PCR檢測試劑盒qPCR一步法操作詳解
支原體螢光定量PCR檢測試劑盒(qPCR一步法） VenorGem qOneStep 2.高特異性，一次檢測即可涵蓋所有常見易感染細胞的支原體物種（包括歐洲藥典規定的9種支原體）。與細菌和真核DNA無交叉反應。 3.高靈敏度，最高檢測限可達到≤10CFU/ml。 4.有相應配套的支原體 基因組DNA和細菌基因組DNA，便於特異性驗證。 -
CAR-T細胞治療用：支原體螢光定量PCR法介紹
螢光定量PCR法（qPCR）：是在常規PCR基礎上，將『針對支原體特異性保守序列的探針』做螢光標記，使PCR擴增後的產物帶有螢光，利用螢光信號的變化和配套軟體，進行DNA擴增反應的實時監測，簡稱qPCR。本文締一生物為您分析CAR-T細胞治療用：支原體螢光定量PCR法介紹。 -
螢光定量PCR(qPCR)方法的用途和說明
螢光定量PCR法（qPCR）：是在常規PCR基礎上，將『針對支原體特異性保守序列的探針』做螢光標記，使PCR擴增後的產物帶有螢光，利用螢光信號的變化和配套軟體，進行DNA擴增反應的實時監測，簡稱qPCR。本文締一生物為您分析螢光定量PCR(qPCR)方法的用途和說明。 -
三種快速支原體檢測試劑盒檢測原理與優缺點比較
DNA染色法結果直觀，假陽性率低，但需要螢光顯微設備，實驗操作複雜。能否找到一種省時、省力且準確性高的方法檢測支原體汙染呢？目前，市場上具有多款支原體快速檢測試劑盒，我們選取了其中3種品牌的快速支原體檢測試劑盒，就其檢測原理與優缺點進行一下比較。 -
qPCR支原體檢測試劑盒說明
該試劑盒採用螢光定量PCR技術，是已建立的檢測方法，能一次檢測歐洲藥典（EP2.6.7）和日本藥典（JP G3）提到的所有支原體物種，並且能與大多數儀器配合使用。本文締一生物為您做以下分析。該試劑盒的設計滿足歐洲藥典和日本藥典對於不同類型樣本（如軟骨細胞、血清、細胞培養上清）在DNA抽提後的檢測標準。可直接檢測細胞上清（研究領域），或者先對細胞培養物富集，或先抽提DNA。該試劑盒完全符合EP2.6.7和JP G3的要求。 -
知識點：德國MB螢光定量pcr檢測原理
螢光定量PCR法（qPCR）：是在常規PCR基礎上，將『針對支原體特異性保守序列的探針』做螢光標記，使PCR擴增後的產物帶有螢光，利用螢光信號的變化和配套軟體，進行DNA擴增反應的實時監測，簡稱qPCR。本文締一生物為您做以下分析。 -
知識點:德國MB螢光定量pcr檢測原理
螢光定量PCR法（qPCR）：是在常規PCR基礎上，將『針對支原體特異性保守序列的探針』做螢光標記，使PCR擴增後的產物帶有螢光，利用螢光信號的變化和配套軟體，進行DNA擴增反應的實時監測，簡稱qPCR。本文締一生物為您做以下分析。 -
科普：支原體標準品在核酸法驗證中的應用
支原體核酸法是通過檢測支原體的特異核酸序列，以確定細胞上清或生物製品中是否存在支原體汙染的一種方法。本文締一生物為您分析科普：支原體標準品在核酸法驗證中的應用。由於它具有檢測時間短（只需3-4h）、操作便捷等特點，越來越受到生物製品企業的青睞。 -
RNA病毒檢測（RT-qPCR法）（新冠病毒研究推薦）
下面給您介紹的這款Mix值得關注，因為它可用於新冠病毒研究檢測（不用於診斷），是其中的一個重要組分。一、用途RNA病毒檢測試劑盒（RT-qPCR法）（英文名：ConviFlex™RT-Taq mix）用於定性檢測和分析RNA病毒和RNA分子，特別適合檢測新冠病毒等此類病毒。 -
從以往PCR對支原體汙染的檢測報導看方法驗證的必要性
國外已有不少藥廠將PCR或qPCR用於工業放行檢測中的支原體檢查。PCR的靈敏度、特異性、適用性和可靠性具有達到藥典標準的潛在可能。但需要按步驟和程序開展方法驗證。有作者指出，有些PCR法在反應條件及引物設計上，仍需不斷改良以提高其檢測效率。 -
「支原體qPCR檢測」的方法學驗證
就筆者所知，在適合工業的支原體檢測和方法驗證方面，德國Minerva Biolabs（簡稱MB）公司已有很成熟的產品及商業化應用，它不僅提供有符合國際藥典的『支原體qPCR檢測』試劑盒，而且有一系列支原體標準品及輔助產品，用於qPCR方法的全面驗證。這些產品性價比也較高，全球許多客戶都在使用。 -
『支原體qPCR檢測』的方法學驗證
就筆者所知，在適合工業的支原體檢測和方法驗證方面，德國Minerva Biolabs（簡稱MB）公司已有很成熟的產品及商業化應用，它不僅提供有符合國際藥典的『支原體qPCR檢測』試劑盒，而且有一系列支原體標準品及輔助產品，用於qPCR方法的全面驗證。這些產品性價比也較高，全球許多客戶都在使用。 -
支原體常規PCR檢測試劑盒的方法和用途
支原體是細胞培養中最常見的一種汙染源，研究表明超過15%的培養細胞都存在支原體汙染，它們能輕易地通過標準濾膜，同時能拮抗絕大多數抗生素。支原體檢測能有效的排除支原體幹擾，保障實驗的順利進行！本文為您分析支原體常規PCR檢測試劑盒的方法和用途。1.支原體常規PCR檢測試劑盒（一步法）1）適合科研單位檢測，或單位內檢，用PCR法檢測細胞或其他生物基質。 -
qPCR檢測支原體方法略述
下面以德國MB Venor®GeM支原體檢測試劑盒（qPCR一步法）（Venor®GeM qOneStep）為例，略述檢測原理和過程。該試劑盒包括4管試劑，其中2管分別為緩衝液和PCR水，另2管為最主要試劑。1管即mix，含引物、核苷酸、聚合酶、螢光素標記的探針和內部擴增對照。另1管為陽性對照，均為凍乾粉。 -
支原體常規PCR檢測試劑盒操作詳解
支原體常規PCR檢測試劑盒(一步法) VenorGem OneStep 2.高特異性，僅一條陽性對照條帶，即可涵蓋所有可能感染細胞的支原體物種。 操作簡單，易於觀察。 3.高靈敏度，1-5拷貝/μl的支原體DNA即可檢出。 4.歐洲藥典要求的26種支原體均可檢出。 -
支原體常規PCR方法檢測系列介紹
小編把MB公司關於支原體檢測和支原體祛除的不同產品，以通覽的形式介紹給大家，希望對中國的生物科研和質檢人員，能有所幫助。支原體常規PCR檢測試劑盒（一步法） 用途說明： 1）適合科研單位檢測，或單位內檢，用PCR法檢測細胞或其他生物基質。 2) 比藥典操作標準合併了一步，（將內控對照試劑預先混合在PCR mix試劑中），操作更簡潔。 -
乾貨分享 | 螢光定量PCR要點解析
PCR），是指在PCR擴增反應體系中加入螢光基團，通過對擴增反應中每一個循環產物螢光信號的實時檢測,最後通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。常規螢光定量PCR的流程是：樣品採集-運輸-樣品處理-核酸提取-反轉錄（RNA病毒）-擴增-結果讀取。下面看看各個環節都可以使用哪些對照？ -
同樣是支原體PCR檢測試劑盒,這幾個有什麼區別?
支原體PCR檢測試劑盒是用於細胞上清或生物細胞工業的支原體檢查。它操作簡單、靈敏度高，覆蓋的支原體物種面廣，因此廣受青睞。但市面上品牌很多，五花八門，如何挑選適合自己的試劑盒，需要根據自己的實驗情況和檢測對象（樣本）和需求來確定。 -
乾貨 | 螢光定量 PCR 原理 要點解析
我們通常說的陽性對照和陰性對照指的是擴增試劑盒中附帶的不需要提取的陽性對照和陰性對照，更準確的定義應該是擴增陽性對照和擴增陰性對照。擴增陽性對照含有陽性擴增模板，擴增陰性對照應含有陰性擴增模板（基質核酸）。擴增對照只能監控每次擴增過程中的擴增系統是否正常，不能監控採樣、提取和每份樣品的操作過程。如果是檢測 RNA 樣品的檢測試劑盒，其擴增陽性對照使用質粒，便無法監控反轉錄過程。 -
先看看有沒有支原體汙染
首先，可對細胞進行支原體汙染檢測，下面介紹3種方法：1，PCR法。若有汙染，會P出條帶，如果不放心送去測序看看是不是支原體序列。記得那會實驗室每周有專人進行全實驗室細胞的支原體檢測，一發現有問題，馬上將其扼殺在搖籃裡。