儀器參考條件：方法中會給出儀器參考條件，如色譜儀、色譜柱、流動相、程序升溫條件、檢測器、質譜參數等。一般食品添加劑檢測使用液相色譜或氣相色譜，而部分獸藥殘留或農藥殘留採用色譜質譜聯用。在給定參考儀器條件情況下，需要注意的是可能某些樣品基質有幹擾。檢測色譜項目時，可使用DAD光譜監控、改變流動相梯度或程序升溫。日常檢驗經驗顯示，三氯蔗糖、TBHQ、山梨酸、阿斯巴甜、糖精鈉等項目可能會存在幹擾，需要藉助更換色譜柱、改變流動相或使用質譜進一步確認。如GB 5009.28-2016食品中苯甲酸、山梨酸和糖精鈉的測定第一法中，5.3儀器參考條件中註：當存在幹擾峰或需要輔助定性時，可以採用加入甲酸的流動相來測定，實際檢測中發現該系統可以提高分離來驗證幹擾。而色譜質譜聯用時，可在方法驗證開發質譜條件時，設定多對定性離子來輔助確證。
標準曲線製作：有外標法、內標法、基質匹配、基質加標隨行、標準加入法等方式，標準曲線範圍往往結合目標化合物的儀器響應、方法檢出限、定量限、標準限量值、常見關注濃度綜合確定。標準曲線配製要注意容器的潔淨、體積的精準加入、試劑的順序加入和溫度時間的控制（顯色）等，並儘可能保證標準系列和待測物質相同的基體和介質。另外，標準曲線儀器分析時，從低到高濃度進樣，並且進樣序列中要穿插適當濃度的標準溶液進行儀器響應監控。要特別注意的是，標準曲線產生的不確定度是一個重要的分量。
試樣溶液的測定：測定中往往分為定性測定和定量測定。
定性測定依據保留時間、定性離子的相對豐度比等進行分析。定性確證較為重要，尤其針對複雜基質存在的幹擾。識別幹擾依賴於對分析系統的穩定性、基質效應的評估，也可藉助其他手段（如DAD光譜圖、質譜等）來輔助識別。採用定性離子相對豐度比時，要儘可能採用基質匹配、濃度相當的標準溶液建立參考。
定量測定需要注意的是進樣中要監控全試劑空白，避免交叉汙染。樣品溶液的待測物的響應值應在儀器測定的線性範圍內，適當情況下可將樣品溶液進行稀釋。
結果計算和表達
結果計算和表達會明確計算公式、結果單位和保留有效位數，其中數據修約可參考GB/T 8170-2008（數值修約規則與極限數值的表示和判定）。總則4.3.1中明確，在判定測定值或其計算值是否符合標準要求時，應將測試所得的測定結果或其計算值與標準規定的極限數值作比較，而食品檢測一般會使用全數值比較法，在日常進行結果判定時要尤其注意。另外，如分析結果未檢出，可用未檢出表述分析結果，同時應註明定量限或檢出限。
精密度
指在規定條件下，對同一或類似被測對象重複測量所得示值或測得的量值間的一致程度。方法中一般會明確為，在重複性條件下獲得的兩次獨立測定結果的絕對差值超過均值的百分比要求。有些方法會因為濃度水平不同而設置不同的要求。精密度達不到方法規定要求往往是因為表徵分析系統存在異常，需要系統排查原因。樣品製備不均勻，溶劑提取、水解酶解、淋洗洗脫、溶劑復溶等條件不充分，人員、容器、分析系統被汙染都有可能影響精密度。
其他
其他規定了方法的檢出限和定量限，這也是方法驗證時需要滿足的重要參數條件。檢出限或定量限水平的滿足對於不得使用、禁用等指標的判定尤其重要；如達不到要求，需要進一步優化儀器條件，或考察試劑純度等。
另外，方法中可能還會給出不同濃度的準確度考察要求，以及參考色譜圖等，方法使用時都需要作為參考驗證使用。
理化檢驗方法驗證
參照GB/T 27417，方法驗證是指實驗室通過核查，提供客觀有效證據證明滿足檢測方法規定的要求。即證實該方法能在該實驗室現有的設施設備、人員、環境等條件下獲得令人滿意的結果，必要時可參加能力驗證或進行實驗室間比對。方法驗證過程中關鍵的參數取決於方法的特性和可能測到的樣品基質的範圍，至少應測定正確度和精密度。對於痕量分析，實驗室還應確保檢出限、定量限驗證。當然，還可驗證線性範圍、基質效應等，方法回收率偏差範圍可參考GB/T 27404要求。
檢驗過程質量控制
方法驗證只能證實實驗室要素滿足方法的要求和實驗室擁有相應的技術能力，但不能充分表徵批量實驗結果的準確性和分析系統是否正常。批量實驗時，為監控可能由於環境、試劑、接觸品、人員、實驗操作、分析系統等關鍵要素對結果的異常影響，需要加強檢驗過程質量控制，做到有效科學評估實驗結果。一般會採取全試劑空白、有證標準物質、平行樣、關鍵點加標回收（定量限、限量水平或其他關注濃度）、在線分析監控、不同原理方法比對、人員比對、不同來源標準品比較等多種方式進行監控。日常需積累空白響應、關鍵點儀器響應、基質效應、平行樣精密度、回收率水平、標準物質測定值等重要信息，儘可能同一實驗室穩定，也可採用質量控制圖來分析預警。
歸納總結
使用理化檢驗方法時，要系統化理解方法所有要求，包括方法的各部分技術要求和方法操作關鍵點等；平時要積累方法的性能參數，便於識別實驗異常的重要信號；批量痕量分析時，要採取針對性手段加強過程質量控制，確保結果的準確性和有效性。
□餘曉琴 四川省食品藥品檢驗檢測院