點突變實驗,很難嗎?

2021-02-15 植物研究進展

只需三步,即可完成克隆在質粒上的DNA序列的定點編輯!聚合美M5 Site-Directed Mutagenesis Kit可用於10-20kb的質粒的定點突變,多達五個位點的單點突變或者基因片段的插入和刪除,一天搞定,突變率達100%,讓實驗變得簡單起來!

MF129-01

M5 HiPer Site-Directed Mutagenesis Kit

聚合美超高效點突變試劑盒用於克隆在質粒上的DNA序列的定點編輯,可實現快速高效的密碼子突變、插入或缺失等改變,支持大片段序列的插入和刪除,配合推薦的引物設計方法,突變效率可達100%。可以廣泛應用於基因及蛋白質的功能研究。

可以完成一次最多五個位點的單點突變,高效進行基因片段的刪除、插入等操作,進快速進行載體的構建。

預混mix方便使用,只需設計引物,聚合美特製超保真酶擴增,M5-Remase(10U/μl)消化轉化感受態三個過程,一天內完成實驗!

聚合美特製超保真酶M5-Muta配合推薦的引物設計方法,突變效率可達100%,超保真酶可以確保不引入新的突變,更可靠!

點突變引物設計:「非對稱」引物設計

·即突變位點不要位於兩條引物的中央,而是採取下圖的排布方式,保證兩條突變引物的3』端與原始質粒完全匹配的序列的Tm值均達到58-68°C

·圖中所示為將原始質粒上AT替換為GC,引物的上引入突變位點的位置更靠近5』端,使兩條引物的5』端相重疊的序列的Tm值達到48-53°C;同理設計插入和刪除突變的引物

·如對引物設計不熟悉,推薦採取在線引物設計,見說明書

 北京聚合美生物科技有限公司地址:北京市昌平區回龍觀龍域北街10號院1號樓422-424室

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