深藍雲直播課堂---實時螢光定量PCR的關鍵數據及常見問題分析

2020-08-20 北京深藍雲生物科技

實時螢光定量PCR（Quantitative Real-time PCR，qPCR）已成為分子生物學研究不可或缺的一種技術手段，常見應用於基因表達分析、腫瘤疾病診斷、病原微生物檢測、食品安全分析和動植物育種等。qPCR檢測技術由於具有高靈敏度的特性，應儘量避免操作中的實驗誤差，確保獲得可靠真實的數據。那麼如何確保實驗數據的可靠性和真實性，則需要通過對qPCR關鍵數據的評估來進行判斷。除此之外，如何分析qPCR異常數據，也是每一位qPCR實驗者需要經歷的必要環節。

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相關焦點

  • 實時螢光定量PCR服務
    實時螢光定量PCR的主要優點是能夠準確地確定初始模板拷貝數，具有較寬的動態範圍以及較高的靈敏度，滿足定性和定量實驗的需求。科學研究中較為常用的是SYBR Green qPCR和T aqMan探針qPCR。實時螢光定量PCR在PCR擴增過程中，通過螢光信號，對PCR進程進行實時檢測。
  • 實時螢光定量 PCR詳解
    光定量 PCR（Realtime fluorescence quantitative PCR，qPCR）也稱作實時螢光定量 PCR。它是指在 PCR 反應體系中加入螢光基團，利用螢光信號累積實時檢測整個 PCR 進程，最後通過標準曲線對初始模板進行定量分析的方法。
  • 實時螢光定量PCR的原理及應用
    基因工程研究領域①　基因表達研究：對β地中海貧血症患者β與γ珠蛋白mRNA水平進行檢測，其結果特異性強、定量準確，為了解β地中海貧血的分子病理機制及其臨床診斷提供了可靠的檢測數據。②　轉基因研究：利用兩種發光探針及適當的循環閾值，擴增一個轉移後的基因和一個對照基因，以分析轉基因老鼠接合性。該方法為45個轉基因動物的同型結合及異質結合提供了明確的鑑定結果。通過實時定量PCR檢測，同型結合的異質接合動物交配後其子代中轉基因的傳遞情況符合孟德爾遺傳規律。這項技術在轉基因動物繁育及基因劑量功能效應實驗中將有很大的用途。
  • 知識點：德國MB螢光定量pcr檢測原理
    螢光定量PCR法（qPCR）：是在常規PCR基礎上，將『針對支原體特異性保守序列的探針』做螢光標記，使PCR擴增後的產物帶有螢光，利用螢光信號的變化和配套軟體，進行DNA擴增反應的實時監測，簡稱qPCR。本文締一生物為您做以下分析。
  • 實時螢光定量PCR技術
    實時螢光定量PCR技術(Real-time qPCR)是一種在PCR反應體系中加入螢光基團,利用螢光信號積累實時監測整個PCR進程,最後通過特定數學原理對未知模板進行定量分枂的方法。因其定量準確、特異性強、操作快速、簡單、安全丏自動化程度高等特點，現已廣泛應用在臨床、食品、環境、分子生物學、遺傳學、SNP分枂等領域。
  • 實時螢光定量 PCR技術原理與應用
    在擴增反應結束之後，我們可以通過凝膠電泳的方法對擴增產物進行定性的分析，也可以通過 放射性核素摻入標記後的光密度掃描來進行定量的分析 。無論定性還是定量分析，分析的都是 PCR 終產物。但是在許多情況下，我們所感興趣的是未經 PCR 信號放大之前的起始模板量。例如我們想知道某一轉基因動植物轉基因的拷貝數或者某一特定基因在特定組織中的表達量。在這種需求下螢光定量 PCR 技術應運而生。
  • 知識點:德國MB螢光定量pcr檢測原理
    螢光定量PCR法（qPCR）：是在常規PCR基礎上，將『針對支原體特異性保守序列的探針』做螢光標記，使PCR擴增後的產物帶有螢光，利用螢光信號的變化和配套軟體，進行DNA擴增反應的實時監測，簡稱qPCR。本文締一生物為您做以下分析。
  • 實時螢光定量PCR技術的應用領域
    定量PCR是在定性PCR技術基礎上發展起來的核酸定量技術。實時螢光定量PCR技術於1996年由美國Applied biosystems公司推出，它是一種在PCR反應體系中加入螢光基團，利用對螢光信號積累的實時檢測來監測整個PCR進程，最後通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。
  • 實時螢光定量PCR儀自動分析軟體
    實時螢光定量PCR儀自動分析軟體Pathogen Suite V1.0軟體主要功能與特性 ◎　全中文操作界面； ◎　直觀、簡介的軟體和嚮導，幫助您輕鬆地完成實驗設置； ◎　低成本高效益的4色/8模塊，提供您精確的實時定量PCR結果；
  • 設計實時螢光定量PCR引物方法
    作者：Lemon轉載請註明：解螺旋·臨床醫生科研成長平臺 實時螢光定量PCR是一種在DNA擴增反應中，以螢光化學物質測每次聚合酶鏈式反應（PCR）循環後產物總量的方法。通過內參或者外參法對待測樣品中的特定DNA序列進行定量分析的方法。實時螢光定量PCR是實驗室最常用的實驗。研究基因在mRNA表達水平,以及驗證基因敲除後下遊靶基因變化情況等等。對於新手來說，如何快速設計引物呢？首先，推薦三個在線設計實時螢光定量PCR引物的網站，不用安裝軟體，直接上網就可搞定。 1.
  • 賽默飛兩款實時螢光定量PCR儀獲NMPA醫療器械註冊證
    近日，賽默飛世爾科技Applied Biosystems™ QuantStudio™ 3和QuantStudio™ 5實時螢光定量PCR儀(qPCR)獲中國食品藥品監督管理局(以下簡稱NMPA)批准為III類醫療器械，證書編號：國械注進20183400252。
  • 螢光pcr檢測儀器怎麼用
    螢光pcr檢測儀器怎麼用，螢光PCR檢測儀器如何選擇呢？首先我們先來了解一下什麼是螢光PCR檢測儀器。螢光PCR檢測儀器可應用在多個領域，食品安全、水產養殖病害、寵物傳染病、植物病害、科研等。螢光pcr檢測儀器儀器的主要功能包括多通道qPCR檢測，熔解曲線及數據分析管理等。儀器可以使用條形管或單個PCR管進行PCR反應。基於Android的作業系統，所有的儀器設置和分析功能，均受控於一個直觀的、易於使用的軟體界面，可進行快速實驗設置和數據分析。每個熱循環後，所有樣品的螢光強度與循環次數顯示不斷更新。實驗結束後報告可以使用Excel軟體導出和分析。
  • 深度:螢光定量PCR技術專題報告
    ，又名定量PCR，是1996 年由美國Applied Biosystems公司推出的一種新興定量分子檢測技術，通過螢光染料或螢光標記的特異性探針，結合了核酸擴增、雜交、光譜分析和實時檢測技術，對PCR產物進行標記跟蹤，實時在線監控反應過程，結合相應軟體對擴增產物進行分析，計算待測樣品模板的初始濃度。
  • 「實時定量PCR技術」主題網絡會議召開
    儀器信息網訊 實時螢光定量PCR技術操作規範性及科學重複性的標準化都有一定難度和可探討性，同時因其可實時監測，定性定量的特性使其在各個領域有著廣泛的應用。基於此，2017年9月26日，儀器信息網舉辦「實時定量PCR技術」主題網絡會議。
  • 手持式集成化實時螢光PCR系統
    首次採用高透射率材料—聚氯乙烯（PVC）搭建三維空間微反應器，提高了螢光信號的強度，並通過血漿分離的流感病毒（H7N9禽流感）質粒，細菌（大腸桿菌）質粒和B型肝炎病毒（HBV）的三個常見DNA片段，驗證了本系統實時定量的準確性。
  • 實時螢光定量PCR實驗體系的設計與優化
    時螢光定量PCR以其精確、快速、方便，越來越多的應用在科研、臨床及檢驗檢疫的各個領域。但是定量PCR是對精確性要求很高的實驗，不僅要求在實驗前有比較完整的實驗設計方案，而且實驗的條件對實驗結果的影響也非常大。這些都是很多老師與學生非常關心的問題，下面分別從這兩個方面來對定量PCR實驗做一些闡述。
  • 了解實時螢光PCR(real-time PCR)
    但是PCR技術也有其相應的局限性，就是對擴增產物分析時需要開蓋處理，容易造成汙染。為了解決這一問題Russ Higuchi進行了一系列相關研究。1992年，Higuchi在一次報告中提出了實時螢光定量PCR技術。通過檢測溴化乙錠的含量實時監控整個PCR反應的進程。
  • 實時螢光定量PCR技術的原理及與應用——適合菜鳥入門!!
    實時螢光定量PCR基本原理實時螢光定量PCR的實驗設計實時螢光定量PCR兩種相對定量方法比較實時螢光定量
  • 實時螢光定量PCR技術_中國教育裝備採購網
    實時螢光定量PCR技術(Real-time qPCR)是一種在PCR反應體系中加入螢光基團,利用螢光信號積累實時監測整個PCR進程,最後通過特定數學原理對未知模板進行定量分枂的方法。因其定量準確、特異性強、操作快速、簡單、安全丏自動化程度高等特點，現已廣泛應用在臨床、食品、環境、分子生物學、遺傳學、SNP分枂等領域。
  • 非洲豬瘟螢光定量PCR檢測常見假陽性結果分析
    非洲豬瘟診斷目前最有效、使用最多的方法是螢光定量PCR檢測。螢光定量PCR檢測系統由螢光定量PCR儀、螢光定量PCR檢測試劑和耗材、核酸提取儀、核酸提取試劑和耗材等組成。設備、試劑和耗材選擇和搭配不當，可能導致檢測結果不準確。螢光定量PCR是一種非常敏感的檢測方法。