siRNA,shRNA,dsRNA,miRNA間的區別

2021-02-20 中洪博元醫學實驗幫

RNA幹擾(RNAi),即用20多個核苷酸組成的短的雙鏈RNA(siRNA)代替傳統反義核酸進行轉錄後基因沉默,已經迅速而廣泛地應用到基因功能,基因表達調控機制研究等熱門領域,並為基因治療開闢了新的途徑。近兩年來,這方面的科學論文及報導爆炸性增長,幾乎每天都有新的結果湧現。這些論文中,出現了很多與RNA幹擾相關的概念,意思很相近但並不完全相同,這裡列舉了幾個常見的RNA幹擾相關的名詞及其簡單的解釋:


1、 miRNA:在遺傳學中,微RNA(microRNAs,miRNA)是長度在21-23個核苷酸之間的單鏈RNA片段,調節基因的表達。miRNA由基因編碼,從DNA轉錄而來,但不翻譯成蛋白。初級轉錄產物(primary transcripts,pri-miRNA)縮短其頸環結構得到功能性的miRNA。成熟的miRNA分子與一個或更多個mRNA分子部分互補,其主要功能是下調基因的表達。而microRNA這個概念第一次在2001年Science (26 October 2001)的文章中出現。


2、 dsRNA:雙鏈RNA(double-stranded RNA, dsRNA)是一種有互補鏈的RNA,與細胞中發現的DNA相似,dsRNA構成了一些病毒(雙鏈RNA病毒)的基因組。像病毒RNA或siRNA之類的雙鏈RNA能夠促發真核細胞中的RNA幹擾,引起脊椎動物中的幹擾素反應。

3、 shRNA:小發卡或短髮卡RNA(a small hairpin RNA or short hairpin RNA, shRNA)是一段具有緊密發卡環(tight hairpin turn)的RNA序列,常被用於RNA幹擾沉默靶基因的表達。利用載體把shRNA導入細胞,載體中的U6 啟動子確保shRNA總是表達;這種裝載了shRNA載體可被傳遞到子代細胞中去,從而使基因的沉默可被遺傳。shRNA的發卡結構可被細胞機制切割成siRNA,然後siRNA結合到RNA誘導沉默複合物上(RNA-induced silencing complex,RISC),該複合物能夠結合到目的mRNAs並將其降解。shRNA 是由RNA 聚合酶Ⅲ轉錄的,哺乳細胞中的shRNA產物有時會促使細胞產生幹擾素反應(細胞遇到病毒侵襲時做出的自我防衛反應),而miRNA中卻不會遇到這種問題(miRNA是由RNA聚合酶Ⅱ轉錄,與轉錄mRNA的聚合酶相同)。shRNA也被用於植物和其它系統中,在這些系統中不需要U6啟動子的驅動。在植物中,常用的增強表達的啟動子是CaMV35S(cauliflower mosaic virus 35S),在這種情況下,RNA聚合酶Ⅱ參與了轉錄,起始RNA幹擾。


4、 siRNA:小或短幹擾RNA(small/short interfering RNA, siRNA)是一類20-25個核苷酸長度的雙鏈RNA分子,其主要在RNAi通路中起作用,幹擾特異基因的表達。此外siRNA在RNAi相關的通路中也起作用,如抗病毒機制,基因組染色體結構的塑造等。其結構是一段完全互補的RNA雙鏈,兩端各有兩個未互補的的鹼基。


最後做一下小結,miRNA,siRNA,dsRNA和shRNA都是RNA幹擾技術中用到的小分子RNA,其不同之處在miRNA 是單鏈RNA,其餘均為雙鏈RNA;siRNA和dsRNA相似;shRNA需通過載體導入細胞後,然後利用細胞內的酶切機製得到siRNA而最終發揮RNA幹擾作用。

深圳中洪博元生物技術有限公司是一家從事生物醫藥研究、產品開發和生物技術服務的高科技公司,是一家集試劑研發、生產、銷售及科研技術服務等產學研相結合的生物醫藥科技企業。

關注中洪博元微信公眾號,獲實驗最新資訊


相關焦點

  • shRNA序列設計:從載體結構到設計操作案例
    常見shRNA載體現在shRNA最經典的載體就是Sigma的pLKO.1-puro,貨號是SHC001,在Sigma官網上查了一下,其實還有另外一種載體,叫TCR2-pLKO.5-puro,貨號為SHC002,這兩者的區別就在於pLKO.5-puro比pLKO.1-puro多了一個WPRE元件,WPRE元件增強了慢病毒遞送的轉基因的表達,這兩個載體的其他部分完全相同
  • shRNA和siRNA
    我一直沒搞明白shRNA和siRNA這兩者的區別,今天看了一些資料,整理一下,以後就看自己的資料❀❀❀❀❀❀❀❀❀❀❀❀❀❀❀❀❀❀❀❀❀❀❀❀❀❀❀❀❀❀❀❀❀❀❀❀❀❀簡單點說,穩轉用shRNA病毒,瞬時實驗用siRNA。
  • RNA幹擾技術之miRNA、dsRNA、shRNA以及siRNA
  • 快速設計shRNA,方法不止一個
    首先打開網址:http://www.sigmaaldrich.com/life-science/functional-genomics-and-rnai/sirna/mission-predesigned-sirna.html,以Fli1為例,直接輸入基因名,點擊search,出現以下界面:在Products
  • 零基礎迅速進階,教你10秒鐘搞定shRNA的設計!
    在平時研究基因功能過程中經常會用到RNA幹擾(RNAi)技術,最常用的莫過於siRNA和shRNA了,那麼這兩種幹擾技術有什麼區別的
  • TargetScan:哺乳動物miRNA靶基因資料庫
    我們都知道miRNA在不同物種間具有保守性,通過預測不同物種的miRNA靶標位點,targetscan的開發團隊發現其結合位點也具有一定的保守性,可以劃分成以下幾類進一步根據結合區域的特定和miRNA的多序列比對結果,劃分成不同的miRNA family, 通過以下連結可以查詢targetscan整理的miRNA family信息http://www.targetscan.org/cgi-bin/targetscan/vert_72/mirna_families.cgi
  • siRNA,shRNA,RNAi傻傻分不清楚
  • miRNA研究知識資源大總結!值得收藏!
    http://lgmb.fmrp.usp.br/mirnapath/tools.php3. miR2Disease miR2Disease資料庫是一個人工注釋的資料庫,主要收錄的是與人類疾病相關的microRNA信息。
  • 巴西亞與皇冠三間的區別方式
    巴西亞與皇冠三間作為龍魚的配魚 經常有魚友分不清楚 以前曾有「巴西亞與皇冠三隻不過是不同的流域表現型」這種說法,但從分類學的角度來看
  • 如何快速找到有效的shRNA序列
    因此siRNA和shRNA的最大區別就在於是否整合進入了基因組中以及轉染有效性的長短。siRNA有效期較短,shRNA有效期長。有這麼幾種方法獲取有效的shRNA序列:下面以AKT1為例跟大家講一講如何在SIGMA官網挑選你想要的有效的shRNA序列。一、首先打開SIGMA的官網,網址如下,在搜索框中輸入想要的基因名。
  • hsa-miRNA-223-3p調控人骨髓間充質幹細胞成骨分化的作用
    目的:探討hsa-miR-223-3p對骨髓間充質幹細胞成骨分化的調節作用。方法:Percoll密度梯度離心法分離、培養骨髓間充質幹細胞,誘導其成骨分化,然後過表達hsa-miR-223-3p,RT-qPCR和Western blot方法檢測Wnt信號通路標誌物Wnt5a及其下遊信號分子OPG、RUNX2的mRNA和蛋白水平變化。
  • Dev Cell:唾液腺間質細胞在器官發生過程中通過外泌體miRNA調節上皮祖細胞的增殖
    上皮-間質相互作用參與器官發生期間組織之間的基本交流,並且主要由生長因子和細胞外基質調節。
  • 帝王三間和巴西亞魚有什麼區別
    擴展資料:帝王三間能適應弱酸弱鹼性水質,習性與皇冠三間相同,飼養方法也相同,但是值得注意的是在野生環境下帝王三間至棲息在水質透明的地區,所以飼養是要特別注意水質的保持①產地不同bai:只有產自於巴西亞這條河的魚才能稱du作巴西亞魚zhi;而帝王三間原產地是美洲。dao②物種不同:帝王三間是金目麗魚種;巴西亞魚是凱氏麗魚。③外觀不同:巴西亞的後三鰭上都有金色斑點,身上也可能會有金色斑點,而皇冠三間是不會有任何斑點的。
  • miRNA資料庫薈萃,研究miRNA的看過來
    每一個資料庫的功能又不盡相同,既有分子間相互作用的預測,又有對已報導實驗結果的總結和整合。
  • 範德華力和分子間作用力有什麼區別呢?
    F2、Cl2、Br2、I2這樣的非極性分子其分子間作用力主要是色散力,色散力沒有方向,分子的瞬時偶極矩的矢量方向時刻在變動之中,瞬時偶極矩的大小也始終在變動之中。分子越大、分子內電子數多,分子剛性越差,分子裡的電子云越鬆散,越容易變形,色散力也就越大。氟、氯、溴、碘隨著核電荷數的增加,極化作用亦增加,雙原子分子間的範德華力變增大,熔沸點升高。
  • siRNA - siRNA - 非編碼RNA專區 - 生物谷
  • miRNA如何沉默基因
    期間轉錄因子BRD4, CTNNB1被發現(通過MYC,間接地)參與調控miR-19的轉錄,POU2F1(通過結合啟動子)促進pri-miRNA的轉錄,這兩點已有科學家報導過。CSNK1A1 (I型酪蛋白激酶的一種)的敲除尤其在不影響miR-19水平的情況下完全恢復了螢光信號的下調,即基因沉默,該過程中AGO2磷酸化大幅度下調、AGO2靶基因間交互恢復正常。免疫共沉澱揭示CSNK1A1和AGO2間不依賴於RNA的相互作用。
  • 疊螺機在汙泥脫水間的改造
    在很多的中大型汙水處理廠,汙泥脫水間顯得尤為重要。那麼,汙泥脫水間一般的配置有哪些呢?汙泥脫水間的布局汙泥脫水間的布局主要與汙泥脫水設備的佔地面積、汙泥脫水工藝有關,常見的汙泥脫水間配有汙泥絮凝裝置、汙泥濃縮池、加藥泵、汙泥入料泵、汙泥脫水設備、螺旋輸送機(深度脫水後的汙泥餅用螺旋輸送機打成塊狀)等。