疑似人禽流感/不明原因肺炎病例標本核酸檢測的注意事項

2020-12-01 生物谷

一、標本的採集

儘量採集下呼吸道標本,如下呼吸道吸取物和肺穿刺標本等。採集標本的溶液使用新開封的DMEM或者Hanks(PH7.0,過酸或過鹼都會導致病毒的滅活,不利於病毒分離)液,標本採集之後要密封好。送往國家流感中心進行覆核的病例標本採集之後直接送檢,如要分裝,在潔淨的BSL-2 生物安全櫃內操作。

二、核酸的提取

疑似禽流感/不明原因肺炎核酸檢測各個實驗區域應儘量分開,如反應液配製區域、核酸提取區域和檢測區域最好分別位於獨立的房間內。如果不能做到各個實驗區域分開,實驗操作開始前應做好清理淨化工作:實驗區域的臺面先用清水擦拭一遍,再用蒸餾水擦拭一遍,最後用75%的醫用酒精擦拭一遍。核酸提取的生物安全櫃檯面擦拭過後,紫外消毒20~30分鐘,然後開啟超淨臺的通風裝置,淨化至少10分鐘。

核酸提取和配製反應液使用的移液器應分開使用,並且做到專用,如不能分開使用,則實驗操作前用含有DNase和RNase的溶液擦拭,或者清水多次擦拭,去除核酸汙染。核酸提取時,離心機、振蕩器等實驗儀器應位於同一區域內,避免來回走動產生氣溶膠。核酸提取過程中同時提取一個陰性對照作為參考。使用過的廢棄Tip頭應及時放入自封袋內,實驗結束後進行高壓滅菌。

三、核酸檢測反應體系的加樣

核酸檢測反應體系配製完畢後,先向反應液中加陰性對照,待所有陰性對照加樣完畢後再加待檢測標本的核酸,最後加陽性對照。使用過的廢棄Tip頭應及時放入自封袋內, 實驗結束後進行高壓滅菌。

四、PCR產物電泳

由於電泳過程是最容易造成氣溶膠汙染的環節之一,電泳區域一定要同其它區域在物理上分開.,及時清理實驗廢棄物,淨化實驗工作檯面。

五、生物安全

無論是標本採集過程中還是實驗檢測過程中,所有工作人員要做好個人防護,佩戴N95口罩、帽子和無粉乳膠手套,穿防護服,避免實驗室感染的發生。 (生物谷Bioon.com)

相關焦點

  • 同濟醫院:孕婦疑似或確診感染,新生兒應立即隔離並檢測核酸!
    在湖北省內,除疑似病例、確診病例外,增加了臨床診斷病例,只要疑似病例出現肺炎影像學特徵即判斷為臨床診斷病例,根據臨床分型的嚴重程度進行治療;省內一旦發現疑似病例和臨床診斷病例,立即隔離、治療,儘快採集標本進行病原學檢測。孕婦處於特殊免疫耐受狀態,是該病毒易感人群,國內已有多例孕婦感染確診病例,涉及到整個孕期。
  • 注意!核酸檢測為陰性並不代表就是安全,應展開抗體全面檢測
    而一些呼吸道疾病可以通過咽拭子或者呼吸道分泌物的核酸檢測來判斷是否感染,以及推測是否具有傳染性。季節性流感、禽流感、冠狀病毒感染等通過咽拭子檢測可以方便地判斷出上呼吸道是否存在病毒成份,從而判斷被檢測者是否屬於感染者。新冠病毒的核酸檢測已經是比較成熟的檢測方法了,只要在咽喉部位擦拭幾秒鐘就可以採集到標本。
  • 施毅:新型冠狀病毒肺炎核酸檢測的意義、問題與對策——阻擊新冠...
    一定要注意防護,注意自己的健康,你們的健康才是病人的健康! 今天想和大家探討新型冠狀病毒肺炎核酸檢測的意義、問題與對策。實際上新型冠狀病毒肺炎已經流行了將近兩個月,大家已經非常辛苦,都希望能夠儘早出現拐點,能夠把整體形勢向好的方向發展。
  • 人禽流感診療方案(2005版)
    2.病毒抗原及基因檢測 取患者呼吸道標本採用免疫螢光法(或酶聯免疫法)檢測甲型流感病毒核蛋白抗原(NP)、M1蛋白抗原及禽流感病毒H亞型抗原。還可用RT-PCR法檢測禽流感病毒亞型特異性H抗原基因。 3.病毒分離 從患者呼吸道標本中(如鼻咽分泌物、口腔含漱液、氣管吸出物或呼吸道上皮細胞)分離禽流感病毒。
  • 核酸檢測究竟是怎麼回事
    而一些呼吸道疾病可以通過咽拭子或者呼吸道分泌物的核酸檢測來判斷是否感染,以及推測是否具有傳染性。季節性流感、禽流感、冠狀病毒感染等通過咽拭子檢測可以方便地判斷出上呼吸道是否存在病毒成份,從而判斷被檢測者是否屬於感染者。  新冠病毒的核酸檢測已經是比較成熟的檢測方法了,只要在咽喉部位擦拭幾秒鐘就可以採集到標本。
  • 湖北疑似病例確診速度加快 核酸日檢測能力提升
    (抗擊新冠肺炎)湖北疑似病例確診速度加快 核酸日檢測能力提升中新社武漢2月6日電 (記者 郭曉瑩)近三天,湖北省新型冠狀病毒核酸日檢測量超1萬份。截至2月5日,全省累計檢測89600多份。這是湖北省副省長楊雲彥6日晚在該省新型冠狀病毒感染的肺炎疫情防控工作新聞發布會上透露的信息。楊雲彥說,加快新型冠狀病毒核酸檢測速度不僅對確診病人的及時救治有非常重要意義,同時對加快病人的收治、控制傳染源也非常重要。為了解決檢測難的問題,湖北省已先後分五批擴充了核酸檢測機構數量,加快核酸檢測工作進度。
  • 什麼是核酸檢測「假陰性」?
    同樣,新冠肺炎的核酸檢測陰性(-),不是指肯定沒有感染病毒,可能是沒有感染病毒,也可能是感染了病毒但因各種原因未檢測出來。 那麼陽性(+)結果怎麼看?一般情況下,陽性代表有問題的存在,某些化驗指標超出了正常範圍。比如,新型冠狀病毒肺炎的臨床診斷病例或疑似病例,如果核酸檢測陽性,就可以確定感染了病毒,為確診病例。
  • 新疆新增3例新型冠狀病毒感染肺炎確診病例(附第四版防控方案)
    1.病例發現。各級各類醫療機構在新型冠狀病毒肺炎監測和日常診療過程中,應當提高對新型冠狀病毒肺炎病例的診斷和報告意識,對於不明原因發熱或咳嗽、氣促等症狀的病例,應當注意詢問發病前 14 天內有無武漢市及周邊地區,或其他有病例報告社區的旅行史或居住史,是否曾接觸過以上地區或社區的發熱或有呼吸道症狀的患者,有無聚集性發病或與新型冠狀病毒感染者的接觸史。
  • [老年醫學學術園地]新型冠狀病毒感染的肺炎實驗室生物安全與檢測技術指南-百問與百答(三)
    各級各類醫,機構的醫務人員發現符合病例定義的疑似病例後,應當立即進行單人間隔離治療,院內專家會診或主診醫師會診,仍考慮疑似病例,在2小時內進行網絡直報,並採集標本進行新型冠狀病毒核酸檢測,同時在確保轉運安全前提下立即將疑似病例轉運至定點醫院。 問題55:如何排除COVID-19疑似病例?
  • 器審中心 | 一文讀懂新型冠狀病毒的核酸檢測!
    2019年12月以來,武漢市部分醫療機構陸續出現不明原因肺炎病例。國家藥品監督管理局隨即啟動《醫療器械應急審批程序》。目前,已批准7家企業的新型冠狀病毒2019-nCoV核酸檢測試劑盒上市。
  • 核酸檢測多次出現假陰性,竟是這幾個原因在搗鬼!
    為了疫情能夠早日得到防控,我們從標本採集、檢測方法、產品穩定性等多方面分析產生假陰性的可能原因,並提出行之有效的解決方案,目的為切實降低檢測假陰性或假陽性率提供臨床參考,為COVID-19在臨床上早點準確診斷及疫情防控提供有力支撐。
  • 12省20支檢測醫療隊赴京!北京大規模核酸檢測,究竟怎麼回事?
    對於呼吸道疾病,例如季節性流感、禽流感、冠狀病毒感染等通過咽拭子檢測可以方便地判斷出上呼吸道是否存在病毒成份,從而判斷被檢測者是否屬於感染者。什麼人需要做核酸檢測?事實上,如果核酸檢測的各個環節都能準確無誤,理想狀態下核酸檢測準確率可以達到95%以上。但是各種原因,例如檢測試劑的質量水平、受檢測人員感染時間(過早或者過晚)、標本取材時受檢測者配合情況(配合度差可能導致標本沒有取到位)以及檢驗人員的操作熟練程度等,可能會對檢測結果造成影響。
  • 濟南市核酸檢測能力突破萬份
    濟南市核酸檢測機構總體布局已從「2家疾控機構+6家醫療機構+1家第三方檢測機構」擴容至「3家疾控機構+13家醫療機構+8家符合條件的第三方檢測機構」,核酸檢測能力由每日3750人份提升至突破萬份。第一批認定8家第三方機構為加強對不明原因發熱患者的管理,濟南市規定,所有不明原因發熱患者(超過37.3℃的)均需進行核酸檢測。同時,隨著企業復工復產,省外返濟人員急劇增加,部分企業對核酸檢測的需求也急劇上升。
  • 此次疫情中,為何有病例多次核酸檢測後才呈陽性?
    回顧大連本次疫情曾出現過個別病例多次核酸檢測才呈現陽性的現象如此狡猾的新冠病毒核酸檢測還可靠嗎?一般而言,新冠病毒96小時內即可在人呼吸道上皮細胞內被發現,可通過鼻咽拭子採集標本進行新冠病毒核酸檢測。其中,從感染後到能夠檢測出來的窗口期可能會出現個體差異,不排除少量患者的窗口期確實比較長。
  • 你需要做核酸檢測嗎?準確率多高?有效期多長?一文讀懂
    而一些呼吸道疾病可以通過咽拭子或者呼吸道分泌物的核酸檢測來判斷是否感染,以及推測是否具有傳染性。季節性流感、禽流感、冠狀病毒感染等通過咽拭子檢測可以方便地判斷出上呼吸道是否存在病毒成份,從而判斷被檢測者是否屬於感染者。新冠病毒的核酸檢測已經是比較成熟的檢測方法了,只要在咽喉部位擦拭幾秒鐘就可以採集到標本。
  • 一地確診病例核酸檢測6次後呈陽性?專家回應……
    高偉利解釋說,造成該現象的原因較多,最主要的是呼吸道分泌物的排毒量。高概率是該名病人每次呼吸道排毒的量非常少,所以不容易檢測出來。其次採集標本、運輸標本的規範化程度、檢測時間、實驗室操作規範化程度等均對檢測結果有影響。但檢測結果陰性並不能排除患者未感染新冠,仍需結合流行病學史、臨床表現,多次採集患者樣本進行覆核檢測。
  • 新型冠狀病毒感染的肺炎防控方案 (第三版)
    1.病例發現。各級各類醫療機構在新型冠狀病毒感染的肺炎監測和日常診療過程中,應提高對新型冠狀病毒感染的肺炎病例的診斷和報告意識,對於不明原因發熱或咳嗽、氣促等症狀的病例,應注意詢問發病前14天內有無武漢或其他有本地病例持續傳播地區的旅行史、居住史,是否曾接觸過以上地區的發熱或有呼吸道症狀的患者,有無聚集性發病或與確診病例和新型冠狀病毒感染者的接觸史。
  • 專家解讀:什麼是核酸檢測單陽性和無症狀感染者
    什麼是無症狀感染者,通過什麼途徑發現,病例具有傳染性嗎?張國俊告訴記者,根據《新型冠狀病毒肺炎防控方案(第六版)》,無症狀感染者是指受到新冠病毒的感染卻沒有臨床症狀(如發熱、咳嗽、咽痛等)的人,但呼吸道等標本新型冠狀病毒病原學或血清特異性IgM抗體檢測呈陽性。
  • 新聞裡提到的新冠病毒核酸檢測是如何檢測的?
    圖片來源:中新網 核酸檢測,是指通過特殊的技術手段檢測臨床樣本中是否存在特定的病原體核酸,從而診斷患者的感染原因。此次新冠病毒是單鏈RNA病毒,根據《新冠病毒感染的肺炎診療方案(試行第五版)》(下文簡稱診療方案)建議,針對疑似病例的確診,需要具備以下病原學證據之一者,即為確診病例: 呼吸道標本或血液標本實時螢光RT-PCR檢測新型冠狀病毒核酸陽性; 呼吸道標本或血液標本病毒基因測序,與已知的新型冠狀病毒高度同源;
  • 「我在PCR實驗室 做核酸檢測!」 帶你走近離病毒最近的「抗疫利劍」!
    不僅要對感染者/疑似感染者的樣本進行各種分析,還要對檢驗過程中產生的高危險廢物進行後處理,以保證生物安全。今天,就讓我們通過兩位檢驗人員,走進這把「抗疫利劍」!2月10日早晨六點,天空漸露魚肚白。在西湖區疾控中心PCR實驗室待了一夜的陳松結束了當天的工作。這個夜班,他和同事一共做了43份新型冠狀病毒核酸樣本的核酸檢測。「不算多,最多的一次做了74份。」